Most analytical methods for oxysterols identification and quantification use GC. These methods are very useful, in particular when GC is coupled with MS. Some difficulties however remain concerning derivatization and possible artefact formation. HPLC-MS appears as the method of future. HPLC with light scattering detector could also be very useful in detecting sterol hydroperoxides and preventing artefact formation. L es oxystérols sont des dérivés oxydés du cholestérol (oxycholestérols) ou de stérols végétaux (oxyphytosté-rols). Il ne sera ici question que des oxycholestérols, qui sont les composés les plus étudiés ; tout ce qui concerne les oxycholestérols peut aisément être transposé aux oxyphytostérols.En plus de la fonction alcool en 3β, les oxystérols peuvent contenir des fonctions céto, époxy, alcool, hydroperoxy [1] ; les principaux oxystérols ( Fig. 1) sont issus :• d'une oxydation en position 7 du stérol (7α-hydroxycholestérol ; 7β-hydroxycholestérol ; 7-oxocholestérol)• d'une oxydation de la double liaison (cholestérol-5α, 6α-époxyde ; cholestérol-5β, 6β-époxyde ; cholestanetriol) • d'une oxydation sur la chaîne latérale (25-hydroxycholestérol ; 20α-hydroxycholestérol).Ces oxystérols peuvent être formés au cours des traitements technologiques des aliments ou du stockage, à partir des stérols initialement présents [2]. Ces composés, après absorption intestinale, interfèrent avec les oxystérols formés in vivo [3]. L'ensemble de ces composés, qu'ils soient d'origine alimentaire ou qu'ils aient été formés dans l'organisme, peut avoir de nombreuses propriétés biologiques [4] : effet inhibiteur sur la biosynthèse du ch o l e s t é ro l , e ffet cy t otoxique, rôle dans l'athérosclérose, etc... Cela explique que des travaux de plus en plus nombreux soient consacrés à ces composés.Cependant, le dosage de ces composés présente encore quelques difficultés.• D'abord, les oxystérols ne représentent que quelques ppm des lipides, et il faut arriver à les séparer des autres composés, sans les altérer.• Ensuite, des oxystérols parasites peuvent se former artefactuellement au cours de l'analyse, à partir des stérols non-altérés (qui sont présents en quantité beaucoup plus importante que les oxystérols), si l'on ne prend pas assez de précautions pour protéger les échantillons [5].• Enfin, certains oxystérols peuvent être détruits lors de certaines étapes de l'analyse, si elles sont effectuées dans des conditions trop drastiques [6].De nombreuses méthodes ont été utilisées pour le dosage des oxystérols. La plupart comportent une phase de concentration-purification et une phase de détection-quantification. Il ne sera ici question que de la phase de détection-quantification. La majorité des analyses s'effectue par chromatographie en phase gazeuse (CPG) ; mais on note un regain d'intérêt pour les méthodes utilisant la ch ro m at ograp h i e liquide à haute performance (CLHP).
Méthodes utilisant la CPGL'amélioration des connaissances sur les oxystérols a été de pair avec les progrès de la CPG. En 1967, Fioriti et Sims ont...