Hemoglobinas em silurídeos da Amazônia Central: I. Análise eletroforética dos hemolisados.

Abstract

INTHODUÇÃOOs Silurídeos do rio Amazonas que abrangem os bagres e cascudos fornecem material de alto interesse para estudos sobre hemoglobinas. Esta é talvez a região do globo onde tais espécies são as mais abundantes vivendo num habitat dos mais variados possibilitando por conseguinte detalhados estudos da relação estrucura-função entre hemoglobinas de peixes. A função da hemoglobina deve estar associada as necessidades respiratórias do animal, e estas necessidades ou melhor os níveis de oxigenação no rio Amazonas são os mais diversos e os peixes devem possuir uma ou mais destas proteínas respiratórias adaptadas a tal diversidade na tensão do gás.Neste trabalho, pretendemos determinar a multiplicidade de componentes de hemoglobinas das diferentes famílias mais comuns e mais facilmente capturados de bagres e cascu- dos no rio Amazonas. Realizamos eletroforesis individuais dos peixes e relatamos nossos resultados procurando relacionar com o meio amb'ente predominante das espécies estudadas. MATERIAIS E MÉTODOSAs espécies mais comuns dos peixes Siluriformes Tabela I foram coletadas no lago Janauacá, rio Sclimões. Exemplares adultos foram sangrados individualmente logo após coleta por punção cardíaca com seringa heparinizada, as hemácias separadas por centrifugação e lavadas repetidas vezes com solução de NaCI 1,7% e tris 1 mM pH 8,0 a 4°C. Após lise com solução de tris 1 mM pH 8,0 a 4°C, o material foi centrifugado várias vezes até obter-se solução límpida de hemolisado e era mantido a Os componentes de hemoglobinas dos hemolisados foram analisados por eletroforese em gel de poliacrilamida 7,5% pH 8,9 utilizando-se técnicas descrita originalmente por Orns tein 1964 e Davis 1964, com algumas modificações feitas por Fyhn ef al, 1979, controlando-se cuidadosamente as condições de padronização e concentrações do gel de resolução e de contraste .As amostras de hemoglobina para eletroforese foram preparadas misturando-se 0.1 ml de solução de hemoglobina 1 mg/ml. 0,4 ml de glicerol, 0,2 ml de B-mercaptoetanol 0,01 M em tampão tris-glicina 0,05 M pH 8,9 equilibrada até saturação cem monóxido de carbono. C sistema de tampões tris-glicina 0,05 M pH 8,9 foi usado no anôdo e tris-C1 0,1 M pH 8,1 no cá-todo, e a eletroforese foi realizada, mantendoanaus.-707