Handling of lipemic samples in the clinical laboratory

Abstract

Interferences in the clinical laboratory may lead physicians misinterpret results for some biological analytes. The most common analytical interferences in the clinical laboratory include hemolysis, icterus and lipemia. Lipemia is defined as turbidity in a sample caused by the accumulation of lipoproteins, mainly very-low density lipoproteins (VLDL) and chylomicrons. Several methods are available for the detection of lipemic samples, including the lipemic index, or triglyceride quantification in serum or plasma samples, or mean corpuscular hemoglobin (MCHC) concentration in blood samples. According to the European Directive 98/79/CE, it is the responsibility of clinical laboratories to monitor the presence of interfering substances that may affect the measurement of an analyte. There is an urgent need to standardize interference studies and the way interferences are reported by manufacturers. Several methods are currently available to remove interference from lipemia and enable accurate measurement of biological quantities. The clinical laboratory should establish a protocol for the handling of lipemic samples according to the biological quantity to be tested.

Interferencia generada por la lipemia en la medición de constituyentes bioquímicos

“…Los umbrales establecidos por el criterio del error máximo deseable fue el más permisivo, lo que derivó que menos constituyentes presentaran interferencia por lipemia, la amplitud de dichos límites fue muy semejantes al obtenido por Fernández et al y Lippi et al (8,16) A pesar de que este último criterio permite la personalización de cada constitu-yente, los resultados identificaron umbrales más permisivos que el 10% de sesgo, incluso para analitos ampliamente reconocidos como susceptibles a la interferencia por lipemia. Una reciente investigación propone una modificación de este criterio para estimar el sesgo significativo sin considerar la variabilidad analítica del constituyente (17)(18)(19)(20) .…”

“…Los criterios de aceptación de interferencia no serán los mismos para los analitos con diferente variación biológica y rendimiento analítico, siendo el criterio del fabricante más permisible para magnitudes con pequeña variabilidad y menos permisivo en aquellas magnitudes con elevada variabilidad biológica. Por lo tanto, es injustificable que se utilicen valores arbitrarios del 10% como sesgo admisible de interferencia para todos los analitos de manera indistinta (21)(22)(23) . Los resultados de la presente investigación evidencian que empleando el umbral del 10%, ciertos constituyentes como: urea, proteínas totales, albúmina, sodio y calcio, no se hubieran detectado como sensibles a la interferencia en el analizador de química líquida, y lo mismo con las magnitudes de creatinina, proteínas totales, sodio, potasio, cloro, calcio, fósforo y fosfatasa alcalina, en el analizador de química seca.…”

“…La principal causa de interferencia de la lipemia en la medición de diversas magnitudes bioquímicas es la dispersión de luz provocada por la presencia de lipoproteínas en las muestras biológicas. La lipemia dispersa la luz en el espectro de 300 a 700 nm, dicha dispersión aumenta a medida que disminuye la longitud de onda, esto se traduce en que los ensayos con lecturas en longitudes de onda más cortas del espectro sean más susceptibles a la interferencia (21,23) . La medición de la concentración de ciertos analitos en química clínica está basada en la reacción indicadora NAD(P) + ↔ NADH (P) + H + , dado que las lecturas del cambio de absorbancia de esta reacción se realizan a una longitud de onda de 340 nm, metodologías que utilicen este indicador se verán muy afectados por la lipemia (22,23) .…”

“…293 el analizador de química seca, alcanzando sesgos de +24,85%, además de presentarse resultados incongruentes en las últimas alícuotas. Fernández Prendes y Lebeck sugieren el empleo de muestras con lípidos nativos provenientes de pacientes para realizar estudios de interferencia por lipemia cuando los métodos están basados en la producción de glicerol (21)(22)(23)(24) . En esta misma línea Zheng et al compararon el uso de lípidos endógenos extraídos por ultra centrifugación de pacientes con hipertrigliceridemia y una emulsión lipídica comercial Intralipid para valorar el efecto de interferencia por lipemia sobre la medición de las enzimas ALT y AST.…”

“…Una estrategia para eludir dicho efecto es emplear metodologías donde la determinación de la concentración de electrolitos no dependa de la proporción agua/sólido y la medición se realice en muestras sin diluir como en las metodologías de ISE directo. El efecto de exclusión de electrolitos es más marcado para el sodio, debido a su concentración plasmática relativamente alta y su estrecho rango fisiológico (21,23) .…”