Genetic Complementation Studies of Human Pin1 in Azotobacter vinelandii Revealed that it Requires Amino Terminus of the NifM to Deliver PPIase Effect to the Fe-protein of Nitrogenase

Abstract

Abstract:The NifM is a peptidyl prolyl cis-trans isomerase and is required for the maturation and activation of the Fe protein of Nitrogenase. Since the carboxyl terminus of NifM is similar to the Human Pin1, we expressed the Human Pin1 in A. vinelandii BG98, a nifM mutant strain containing a kanamycin insertion and found that it could not complement the function of nifM. It was hypothesized that the amino terminus of the NifM might be required for the Pin1 to bind to NifH similar to requirement of the WW domain for the binding to pSer/Thr-Pro of Cdc25C. Therefore we expressed a NifM amino-terminal and Pin1 fusion protein chimera in A. vinelandii BG98 and this chimera was able to complement the function of NifM. This observation indicated that the amino-terminal of NifM is responsible for the specificity for NifH similar to the specificity of WW domain of Pin1 for pSer/ThrPro while the carboxyl terminal domain functions as peptidyl prolyl cis/trans isomerase.

Βιοχημική και μοριακή ανάλυση των πεπτιδύλ-προλύλ cis-trans ισομερασών στα φυτά και στους μικροοργανισμούς

“…Η NifM έχει βρεθεί ότι αλληλεπιδρά με την NifΗ, σημαντικό ρόλο στην αναγνώριση της NifΗ από την NifM φαίνεται να έχουν τα πρώτα 126 κατάλοιπα της άμινο τελικής περιοχής της NifΜ. Η παρατήρηση αυτή βασίζεται στο γεγονός ότι η hPIN1 μπορεί να συμπληρώσει τη λειτουργία της NifM σε στέλεχος του A. vinelandii, μόνο όταν παράγεται σε σύντηξη με την άμινο τελική περιοχή της NifM (Raja et al, 2006).…”

Μοριακή Και Βιοχημική Ανάλυση Των Βακτηριακών Παρβουλινών Και Κυκλοφιλινών

“…Διαθέτει ενεργότητα PPIάσης συγκρινόμενη με αυτήν της Par10 (Gavini et al, 2006). Η AvNifM έχει βρεθεί ότι αλληλεπιδρά με την NifH και σημαντικό ρόλο στην αναγνώρισή αυτή φαίνεται να έχουν τα πρώτα 126 κατάλοιπα της άμινοτελικής περιοχής της AvNifM (Raja et al, 2006). Ακόμα, βρέθηκε ότι στην αλληλεπίδραση αυτή εμπλέκεται η περιοχή γύρω από την P258, που βρίσκεται στην καρβόξυ-τελική περιοχή της NifH, η οποία περιελίσσεται γύρω από την άλλη υπομονάδα του διμερούς της NifH (Gavini et al, 2006).…”