Fundamentos de engenharia genética e edição gênica: uma revisão sistemática sobre as diferentes técnicas utilizadas em fungos filamentosos

Abstract

Introdução: O advento das tecnologias de edição gênica permitem modificar organismos de modo específico. Desta forma, pode-se selecionar um organismo com potencial biotecnológico e melhorar a produção de suas enzimas e metabólitos. Objetivo: Este trabalho tem como objetivo elencar as técnicas de edição gênica utilizadas em fungos nos últimos 5 anos (2015-2019). Metodologia: Foi empregada uma revisão sistemática da literatura. Para tal, realizou-se as seguintes etapas: Elaboração das perguntas a serem respondidas; Determinação das strings de busca e dos bancos de dados; Definição de critérios de inclusão e exclusão de artigos; Seleção, extração, análise e interpretação dos resultados. Resultados: Obteve-se 32 artigos, os quais descrevem 9 técnicas de edição gênica: Mutagênese Clássica; Nocaute gênico induzido por transposon (TAGK); Integração mediada por enzimas de restrição (REMI); Meganucleases; Recombinação homóloga; Nucleases efetoras do tipo ativadoras de transcrição (TALENs); Nucleases dedo de Zinco (ZFNs); Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens (ATMT); e Clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats associado a nuclease Cas9 (CRISPR/Cas9). Sendo CRISPR/Cas9 a tecnologia predominante nos trabalhos. Conclusão: Para realização da engenharia genética em um organismo, além da técnica de edição gênica é necessário a escolha de um vetor e de uma técnica de transformação, bem como conhecimento acerca do mecanismo de reparo de DNA na espécie-alvo. Existem diferentes tecnologias, com diferentes fundamentos, a escolha de qual técnica utilizar dependerá da avaliação da equipe e do objetivo da pesquisa.