Flavobacterium psychrophilum y su patología en alevines de Onchorhynchus mykiss del centro piscícola El Ingenio, Huancayo

León, Jorge; Ávalos, Rita; Ponce, Milagros

doi:10.15381/rpb.v15i2.1737

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“…Se verificó mediante PCR la presencia de F. psychrophilum en muestras de piel, observando que, aunque esta bacteria también podía identificarse en peces aparentemente sanos, los amplicones fueron de me- nor intensidad que aquellos encontrados en animales con signología clara, sugiriendo una mayor carga bacteriana en los animales afectados. Casos de flavobacteriosis han sido reportados en Huancayo, Perú (León et al, 2009) en órganos internos de alevines de 5-7 cm, identificados por métodos microbiológicos convencionales. En forma similar, Gonzales (2013) detectó F. psychrophilum en truchas de 25-35 cm cultivadas en el Lago Titicaca, realizando cultivos en medio Agar Tripticasa de Soya (TSA) desde varios órganos, incluido la piel.…”

Section: Discussionunclassified

“…Esta enfermedad también afecta a peces en etapas juveniles y adultos (Antaya et al, 2008), siendo característica la presencia de úlceras en la región dorsal y la melanosis de la piel. La flavobacteriosis se encuentra globalmente distribuida (Nicolas et al, 2008) y Perú no es la excepción (León et al, 2009). El aislamiento e identificación de esta bacteria es dificultoso debido a los exigentes requerimientos nutricionales y condiciones de cultivo (Nematollahi et al, 2003), de allí que se emplean técnicas moleculares de mayor sensibilidad, como PCR, para confirmar el diagnóstico (Toyama et al, 1994; Bader et al, 1998; Urdaci et al, 1998).…”

Section: El Agente Causal De La Enfermedad Bacteriana Del Agua Fría (unclassified

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Identificación molecular de Flavobacterium psychrophilum y caracterización de las alteraciones cutáneas en la trucha arcoíris (Oncorhynchus mikyss) procedente de Puno, Perú

Sánchez

Sanchez

Sanmiguel

et al. 2020

Rev. investig. vet. Perú

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El presente estudio tuvo por objetivo comparar las lesiones histológicas de truchas arcoíris (Oncorhynchus mikyss) afectadas por la Enfermedad Bacteriana del Agua Fría (BCDW) con muestras de piel de truchas asintomáticas procedentes de centros piscícolas en el Lago Titicaca (Puno, Perú) e identificar la presencia de Flavobacterium psychrophilum mediante PCR convencional. Se trabajó con 13 truchas con lesiones de piel y siete sin lesiones, con tallas superiores a los 25 cm y peso promedio de 350 g. En el PCR para la identificación de F. psychrophilum se utilizaron iniciadores dirigidos a la región 16S ARNr. Molecularmente, ambos grupos de animales resultaron positivos para la presencia de F. psycrophilum. Se puede concluir que este patógeno está presente en la zona sur del país.

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Section: Discussionunclassified

Section: El Agente Causal De La Enfermedad Bacteriana Del Agua Fría (unclassified

Identificación molecular de Flavobacterium psychrophilum y caracterización de las alteraciones cutáneas en la trucha arcoíris (Oncorhynchus mikyss) procedente de Puno, Perú

Sánchez

Sanchez

Sanmiguel

et al. 2020

Rev. investig. vet. Perú

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“…Características similares con nuestros resultados son reportados por Mata S (2017) (9) quien describe las características severas, de tipo necrótico en la piel, y manifiesta que F. psychrophilum también ocasiona el síndrome del alevín de la enfermedad septicémica que afecta a los peces de primera alimentación, causando oscurecimiento corporal, abultamiento abdominal. Así mismo León J. et al (1), también relaciona las características fenotípicas con la enfermedad lesión macroscópica externa más frecuente fue la ulceración profunda de la región dorsal del pez acompañado de un ennegrecimiento localizado de la piel, también Gonzales J. (2013) (13), en un estudio realizado a truchas, procedente del Lago Titicaca-Puno determinó la enfermedad flavobacteriosis y una mortalidad aproximada del 60%, posiblemente corresponda a Flavobacterium psychrophilum, conocido como el agente que causa la "enfermedad bactérica de aguas frías" (BCWD) o enfermedad del pedúnculo.…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

“…Echo que Castillo A (2017)(10) en su trabajo de investigación sobre caracterización fenotípica, bioquímica y genética de Flavobacterium psychrophilum, manifiesta que en medio de cultivo TYES tienen una concordancia fenotípica significativa con lo reportado a nivel mundial. Así mismo León J. et al(1) en su trabajo reporto el desarrollo en agar Cytophaga Modificado (ACM); según Anaker & Ordal (1959) fueron aisladas inicialmente 29 Gram negativas, de las cuales según la caracterización fenotípica y pruebas bioquímicas 9 fueron consideradas como F. psychrophilum, observándose que el uso de medios de cultivo para el aislamiento de F. psychrophilum fueron diferentes. Identificación de Flavobacterium psychrophilum mediante pruebas bioquímicas de orientación aislados de los alevines de "trucha arco iris" (Oncorhynchus mykiss).…”

unclassified

Identificación de Flavobacterium psychrophilum en alevines de "trucha arco iris" (Oncorhynchus mykiss). Distrito de Huanta. Ayacucho 2019

Espinoza

Cruz

Chaupe³

2020

RevInvestigacion

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Flavobacterium psycrophilum causa la enfermedad de las aguas frías o síndrome del alevín de la trucha. El trabajo de investigación se desarrolló en el Laboratorio del Área Académica de Microbiología y Laboratorio de Embriología, Histología y Patología Veterinaria. Sección de Ictiopatología. Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, con el objetivo de identificar Flavobacterium psychrophilum en alevines de "trucha arco iris” (Oncorhynchus mykiss). Distrito de Huanta. El estudio fue de tipo no experimental, descriptivo transversal, la población estuvo conformada por todos los alevines del Centro de Producción de la Empresa Nutrimento JANA SAC, ubicado en la comunidad de Razuhuillca del Distrito de Huanta, el muestreo utilizado según el código sanitario para los animales acuáticos fue el muestreo especifico. Se utilizaron técnicas microbiológicas como el aislamiento de microorganismos en medio Flavobacterium, pruebas bioquímicas de orientación y la identificación molecular a través de la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). Respecto a los resultados las características fenotípicas de alevinos de “trucha arco iris” presentaron pigmentación oscura en la piel, cambio de color en los riñones y bazo inflamado, en la caracterización fenotípica de las colonias se obtuvieron colonias amarillas, brillantes y mucoides, dentro de las pruebas bioquímicas de orientación las colonias resultaron ser bacterias Gram negativas, catalasa y oxidasa positiva. La confirmación por la técnica de PCR mostro la banda 971pb indicando positivo para Flavobacterium psychrophilum; con lo que se confirma la presencia de esta bacteria en los alevines de la “trucha arco iris”.

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“…Si bien la distribución originaria de F. psychrophilum se limitó a Norte América, actualmente se la aisla a partir de peces enfermos de pisciculturas de todo el mundo (Nematollahi et al, 2003). En Sudamérica, la presencia de F. psychrophilum fue reportada en Chile (Bustos et al, 1995), Perú (León et al, 2009), Argentina (Moreno et al, 2016) y México (Castillo et al, 2017).…”

Section: Flavobacterium Psychrophilumunclassified

Oomicosis en salmónidos (Salmonidae) y pejerrey patagónico (Odontesthes hatcheri) de cultivo en la provincia del Neuquén

Moreno¹

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La acuicultura es una actividad económica con gran crecimiento en los últimos años. Tanto a nivel regional como mundial, los productos de acuicultura se diversificaron y aumentaron considerablemente sus volúmenes de producción. En este contexto, las técnicas de cultivo intensivo promueven el surgimiento de enfermedades que implican un problema importante para la piscicultura de aguas continentales. En particular, las oomicosis (también llamadas “saprolegniasis”) son causa de mortalidad y pérdidas económicas, principalmente en los países donde el cultivo de salmónidos se encuentra más desarrollado. Estas infecciones son causadas por Oomycetes acuáticos del orden Saprolegniales que afectan a los peces de cría en todos los estadios de su ciclo de vida y resultan muchas veces letales sin tratamientos adecuados. Además de causar serios problemas en los sistemas de producción, las oomicosis fueron observadas en peces silvestres e inclusive están implicadas en la declinación de poblaciones naturales de salmónidos y en brotes asociados a situaciones de estrés ambiental. En la piscicultura del CEAN, Junín de los Andes, se realiza la cría y reproducción de salmónidos (trucha arcoíris, Oncorhynchus mikiss; trucha marrón, Salmo trutta y salmón del Atlántico, Salmo salar) y, de manera experimental, del pejerrey patagónico (Odontesthes hatcheri). Tanto en la incubación de ovas como en otras etapas del ciclo de cría de estos peces, comúnmente se observan infecciones oomicóticas, que causan pérdidas en la producción y deben ser combatidas mediante el uso de tratamientos preventivos y/o terapéuticos. Este trabajo de tesis tiene como objetivo ampliar el conocimiento sobre Oomycetes que afectan a los peces de cría en estaciones de piscicultura, estudiar aspectos patogénicos y, además, los efectos de la interacción con Flavobacterium psychrophilum, una bacteria patógena de salmónidos. Por otro lado, y con fines de implementación en tratamientos de control, se evalúa la capacidad antioomicótica de ciertas sustancias de origen vegetal frente a algunas cepas aisladas durante este estudio. El capítulo 1, se dedicó al aislamiento e identificación de Oomycetes asociados a ovas, peces y materia orgánica de la piscicultura del CEAN. Se colectaron ovas de salmónidos y pejerrey patagónico infectadas naturalmente en los sistemas de incubación. Mientras que, en los estanques de cría, se recolectaron peces moribundos (trucha arcoíris y pejerrey patagónico) que presentaban micelio en la superficie corporal. La identificación se realizó mediante características morfológicas y moleculares. En este estudio, se aislaron e identificaron morfológicamente once taxones pertenecientes a los órdenes Saprolegniales y Leptomitales del phylum Oomycota, de los cuales, Saprolegnia diclina, S. ferax, S. parasitica, S. glomerata, Newbya dichotoma, Scoliolegnia asterophora y Leptomitus lacteus fueron registradas en Argentina con anterioridad, mientras que Saprolegnia aenigmatica, Achlya ambisexualis, Pythiopsis cymosa y P. humphreyana representan nuevas citas para nuestro país. Por otra parte, mediante los estudios moleculares, se logró la amplificación de la región Cox2 del ADN mitocondrial y se obtuvieron 62 secuencias que fueron incorporadas al proyecto “OOMAC Oomycota de Argentina y Chile” de la base de datos de BOLD SYSTEMS. En base al análisis de similitud con secuencias depositadas en GenBank y a los análisis filogenéticos, se logró agrupar a 56 de las secuencias y asignarlas a los taxones Saprolegnia parasitica, S. ferax, S. diclina, S. aenigmatica y Saprolegnia sp. Finalmente, y de acuerdo a los agrupamientos realizados en el análisis molecular, se estimó la abundancia relativa de cada taxón por sustrato de aislamiento. En el capítulo 2, se evaluaron la capacidad infectiva y los efectos patológicos de algunas de las cepas aisladas en los muestreos del capítulo anterior. Se realizaron infecciones experimentales sobre ovas y juveniles de trucha arcoíris y pejerrey patagónico donde se consideraron las tasas de infección, mortalidad y efectos histológicos. Los principales resultados indican que las zoosporas de cepas identificadas como S. parasitica, S. ferax, S. diclina, S. glomerata, Saprolegnia spp., Leptomitus lacteus y Achlya sp. tienen la capacidad de colonizar ovas muertas de trucha arcoíris, sin embargo, no generan un aumento significativo de la mortalidad de las ovas vivas. Mientras que, el contacto con inóculos infectivos de Saprolegnia spp., S. glomerata, S. parasitica, S. diclina y S. ferax generó infección y mortalidad en las ovas vivas, aunque esto fue dependiente de la cantidad de los inóculos. Por otra parte, las ovas muertas de pejerrey patagónico también fueron colonizadas por zoosporas de S. parasitica, S. diclina y S. ferax, sin embargo, las ovas vivas fueron un sustrato donde las esporas germinaron y desarrollaron pequeñas hifas, sin causar incrementos significativos en la mortalidad. Estos resultados sugieren que el corion de las ovas representa una barrera de defensa efectiva frente a la infección por las zoosporas de Oomycetes a la vez que los estadios vegetativos (hifas) son los causantes de los incrementos en la mortalidad y la propagación de los Oomycetes en los sistemas de incubación de ovas. En este estudio, solamente los peces sometidos a un tratamiento previo de abrasión fueron infectados por las zoosporas de S. parasitica, S. diclina y S. ferax. Las infecciones causaron, además, un aumento significativo de la mortalidad. Estos resultados sugieren que el tegumento representa una línea de defensa eficaz contra la infección por las zoosporas de Oomycetes. En estos ensayos, se observaron diferencias inter e intraespecíficas en las tasas de infección y mortalidad. A nivel histológico, se observó que S. diclina y S. ferax causan alteraciones a nivel del tegumento y capa muscular, y una débil respuesta inflamatoria. Por otra parte, en el ensayo con larvas de pejerrey patagónico, se observó que los componentes de la dieta pueden incidir en la infección y mortalidad generada por zoosporas de S. diclina. Las observaciones histológicas sugieren, en este caso, que las infecciones se originaron a nivel del tracto digestivo, desde donde las hifas se expandieron hacia el resto del cuerpo. En el capítulo 3, se evaluó el efecto de la infección por Flavobacterium psychrophilum como un probable factor inductor de la infección y la mortalidad por Saprolegnia parasitica en juveniles de trucha arcoíris. Se estudiaron, además, aspectos patológicos y parámetros inmunológicos y de estrés oxidativo. Se evaluaron la predisposición a la infección por zoosporas de S. parasitica en peces previamente infectados con F. psychrophilum y posibles efectos sinérgicos o antagónicos. Para ello, a partir de peces naturalmente infectados, se aislaron e identificaron distintas cepas de F. psychrophilum, se seleccionó una de éstas y se la utilizó, junto con una cepa de S. parasitica en un ensayo in vivo de exposición consecutiva. Se midieron las tasas de infección y mortalidad, y se realizaron observaciones clínicas y análisis histológicos. Se midió el contenido de inmunoglobulinas en el mucus, el recuento diferencial de leucocitos y, a nivel hepático, el contenido de indicadores del balance oxidativo y de daño a lípidos. F. psychrophilum generó alteraciones patológicas principalmente a nivel del tegumento y la musculatura, sin embargo, la infección bacteriana no promovió la infección por S. parasitica y no se observó un efecto sinérgico en la mortalidad ni a nivel histopatológico. Flavobacterium psychrophilum generó el incremento en los porcentajes relativos de monocitos y trombocitos con forma de huso, lo cual puede indicar una activación de la respuesta inmune inespecífica. La exposición a zoosporas de S. parasitica incrementó el porcentaje relativo de linfocitos, sin embargo, esta respuesta no fue evidente en los peces infectados previamente con F. psychrophilum. Los descensos en los niveles de inmunoglobulinas en mucus de peces infectados por F. psychrophilum también sugieren una inhibición de la respuesta inmune adaptativa. La infección por F. psychrophilum disminuyó el pool de glutatión total en los hepatocitos y afectó el balance hacia el estado antioxidante. Mientras que la exposición a S. parasitica produjo un aumento en los niveles de daño oxidativo a lípidos sin modificar los otros parámetros del balance oxidativo estudiados en el hígado. No se observaron efectos sinérgicos entre F. psychrophilum y S. parasitica sobre los indicadores de daño oxidativo. Finalmente, en el capítulo 4 se evaluó in vitro la acción antioomicótica del eugenol, el isoeugenol, el timol y el guaiacol frente a estadios vegetativos y zoosporas de una cepa de S. diclina, una de S. ferax y dos cepas de S. parasitica. En estos ensayos, se emplearon las técnicas de microatmósfera y dilución en placas para la determinación de la concentración inhibitoria total (CIT) y la concentración letal (CL) de estas sustancias frente a los Oomycetes. Además, según el caso, se estimaron la concentración inhibitoria 90 (CI90) y la concentración inhibitoria 50 (CI50) mediante modelos de regresión no lineal. Los resultados mostraron que los estadios vegetativos y las zoosporas de S. parasitica, S. ferax y S. diclina fueron sensibles, en mayor o menor medida, al eugenol, isoeugenol, timol y guaiacol. El timol y el isoeugenol fueron las sustancias más efectivas en reducir o inhibir el crecimiento oomicótico y podrían ser consideradas en futuros estudios de búsqueda de productos antioomicóticos alternativos para su aplicación en acuicultura.

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Flavobacterium psychrophilum y su patología en alevines de Onchorhynchus mykiss del centro piscícola El Ingenio, Huancayo

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Identificación molecular de Flavobacterium psychrophilum y caracterización de las alteraciones cutáneas en la trucha arcoíris (Oncorhynchus mikyss) procedente de Puno, Perú

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Identificación de Flavobacterium psychrophilum en alevines de "trucha arco iris" (Oncorhynchus mykiss). Distrito de Huanta. Ayacucho 2019

Oomicosis en salmónidos (Salmonidae) y pejerrey patagónico (Odontesthes hatcheri) de cultivo en la provincia del Neuquén

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