Filamin A (FLNA) Plays an Essential Role in Somatostatin Receptor 2 (SST2) Signaling and Stabilization After Agonist Stimulation in Human and Rat Somatotroph Tumor Cells

Abstract

Somatostatin receptor type 2 (SST2) is the main pharmacological target of medical therapy for GH-secreting pituitary tumors, but molecular mechanisms regulating its expression and signaling are largely unknown. The aim of this study was to investigate the role of cytoskeleton protein filamin A (FLNA) in SST2 expression and signaling in somatotroph tumor cells. We found a highly variable expression of FLNA in human GH-secreting tumors, without a correlation with SST2 levels. FLNA silencing in human tumoral cells did not affect SST2 expression and localization but abolished the SST2-induced reduction of cyclin D1 (-37% ± 15% in control cells, P < .05 vs basal) and caspase-3/7 activation (+63% ± 31% in control cells, P < .05 vs basal). Overexpression of a FLNA dominant-negative mutant that specifically prevents SST2-FLNA binding reduced SST2 expression after prolonged agonist exposure (-55% ± 5%, P < .01 vs untreated cells) in GH3 cells. Moreover, SST2-induced apoptotic effect (77% ± 54% increase of caspase activity, P < .05 vs basal) and SST2-mediated ERK1/2 inhibition (48% ± 17% reduction of ERK1/2 phosphorylation, P < .01 vs basal) were abrogated in cells overexpressing another FLNA mutant that prevents FLNA interaction with partner proteins but not with SST2, suggesting a scaffold function of FLNA in somatotrophs. In conclusion, these data demonstrate that FLNA is involved in SST2 stabilization and signaling in tumoral somatotrophs, playing both a structural and functional role.

Filamin-A is required to mediate SST2 effects in pancreatic neuroendocrine tumours

“…In addition, the relevance of FLNA in pituitary tumour responsiveness to pharmacological treatment has been demonstrated in PRL-secreting pituitary tumours, where FLNA plays a key role in dopamine receptor type 2 signalling and cell surface expression (Peverelli et al 2012). Recently, FLNA/SST2 interaction has been found to play a critical role for SST2 stabilization and cell survival in human pancreatic tumour cells (BON) and in melanoma cell line (Najib et al 2012) as well as in tumourous pituitary GH-secreting cells (Peverelli et al 2014).…”

Análise da expressão da filamina A nos tumores hipofisários e suas implicações clínicas e terapêuticas

“…Na literatura, apenas prolactinomas e somatotropinomas haviam sido avaliados quanto à expressão de FLNA (15,16) . Em nosso estudo, avaliaram-se 11 amostras…”

“…A expressão da FLNA em somatotropinomas havia sido avaliada em apenas um estudo (16) , no qual não houve correlação com a expressão de SSTR2, porém demonstrou-se que a presença da FLNA foi necessária para a sinalização intracelular do SSTR2, após ligação com agonista. Em nosso estudo, a expressão moderada ou intensa (IRS ≥ 4) de FLNA ocorreu em 3% dos casos, a expressão moderada ou intensa de SSTR5, em 31%, e de SSTR2, em 80% dos casos.…”

“…A FLNA foi recentemente implicada na expressão de DRD2 e respostas aos AD em prolactinomas (15) . Adicionalmente, a FLNA parece estar envolvida na cascata de sinalização intracelular após ativação dos SSTR2 aos LRS em somatotropinomas (16) .…”

“…Por sua vez, a expressão de DRD2 na superfície celular foi associada à redução da secreção de PRL e da proliferação celular, em culturas primárias de células de prolactinomas e de células MMQ, com o tratamento com AD. O mesmo grupo de pesquisadores avaliou a expressão da FLNA em somatotropinomas humanos e em cultura de células, e não houve correlação entre a FLNA e a expressão do receptor de somatostatina do subtipo 2 (SSTR2) (16) . No entanto, a FLNA parece ser importante na estabilização e nas vias de sinalização do SSTR2 (16) (1) No entanto, a influência da FLNA na expressão de DRD2 em prolactinomas e na expressão e ação do SSTR2 em somatotropinomas, bem como seu papel em outros tumores hipofisários, precisa ser confirmada (15) .…”