Feasibility of rhizobia conservation by liquid conditioners

Abstract

-This paper evaluates the possible use of liquid preservation methods for rhizobia long term conservation under ambient temperature conditions. Saline solution (sterile distilled water + NaCl), glycerol and carboxymethycellulose (CMC) were evaluated for preservation of Rhizobium tropici and Bradyrhizobium japonicum cultures up to 180 days and regarding their capacity to promote common bean (Phaseolus vulgaris [L.]) and soybean (Glycine max [L.]) nodulation. The total population was determined after 0; 1; 7; 15; 21; 30; 60; 90; 120; 150 and 180 days of conservation and conserved bacteria were evaluated for symbiotic characteristics after 15, 60 and 120 days of conservation. Although there were significant species x conservation method interactions, both saline solution and CMC may be used for short storage terms, allowing the production of inoculant for field experiments, and its test for purity and concentration before field establishment. The utilized techniques have low cost and easier usage as inoculants, compared to the traditional turf-based products, and if determined feasible by further research it could be a low cost addition to the standard microbiological techniques, particularly as working culture preservation media.Key words: Bradyrhizobium. Carboxymethycellulose. Glycerol. Preservation of bacterial cultures.RESUMO -Neste trabalho foi avaliado o possível uso de métodos de preservação líquida para conservação de rizóbio ao longo do tempo, sob condições de temperatura ambiente. Solução salina (água destilada esterilizada + NaCl), glicerol e carboximetilcelulose (CMC) foram avaliados visando à preservação de culturas de Rhizobium tropici e Bradyrhizobium japonicum por 180 dias e em relação a sua capacidade para promover a nodulação do feijão comum (Phaseolus vulgaris [L.]) e da soja (Glycine max [L.]). A população total foi determinada após 0; 1; 7; 15; 21; 30; 60; 90; 120; 150 e 180 dias de conservação e, as bactérias conservadas foram avaliadas quanto as suas características simbióticas após 15, 60 e 120 dias de conservação. Embora tenham ocorrido interações significativas entre os métodos de conservação x espécies, a solução salina e o CMC podem ser usados por períodos curtos de armazenamento, permitindo a produção de inoculante para experimentos de campo e teste de pureza e concentração antes do seu estabelecimento em campo. As técnicas utilizadas têm custo baixo e uso mais prático do que as tradicionais formulações em base turfosa, e se determinada a viabilidade por meio de novas pesquisas, poderia ser uma adição de baixo custo para a padronização de técnicas microbiológicas, particularmente como meio de trabalho para preservação de culturas.Palavras-chave: Bradyrhizobium. Carboximetilcelulose. Glicerol. Preservação de culturas bacterianas. *Autor para correspondência 1 Recebido para publicação em 21/03/2012; aprovado em 28/03/2013