Extração e caracterização parcial do inibidor de tripsina/quimotripsina de sementes de quinoa (Chenopodium quinoa)

Abstract

RESUMOA quinoa (Chenopodium quinoa) (60, 70, 90, 100ºC Palavras-chave:Chenopodium quinoa, semente, inibidor de protease, extração, caracterização, tripsina. INTRODUÇÃOChenopodium quinoa Willd é um pseudocereal que tem sido cultivado na região andina por milhares de anos. É uma planta perene que possui cerca de 1 a 2m de altura e raízes profundas e penetrantes. C. quinoa pode ser cultivada do nível do mar até uma altitude de 3800m, sendo mais encontrada entre as altitudes de 2400 e 3800m. A planta apresenta tolerância a frio, salinidade e escassez de nutrientes e tem a habilidade de crescer em solos marginais. o grão da quinoa é altamente nutritivo devido sua qualidade excepcional de proteínas e seu amplo espectro de vitaminas e minerais. A proteína da sua semente é rica em aminoácidos como a lisina e a metionina que são comumente deficientes em outros cereais. A habilidade da quinoa em produzir grãos com alto teor proteico mesmo em condições ecologicamente extremas faz dela importante para a diversificação de futuros sistemas agrícolas, especialmente em áreas de altitudes elevadas 1 . os inibidores são moléculas proteicas capazes de associar com proteases de modo competitivo, promovendo perda de todas as funções catalíticas das enzimas. No sítio ativo, composto por uma pequena sequência de resíduos de aminoácidos, há um domínio formado a partir de uma ponte dissulfeto. A interação inibidor/protease se dá através de numerosas interações resultando em um ajuste excelente 2,3 . Estudos adicionais sobre a distribuição precisa e ação dos inibidores de proteinases são ainda necessários para confirmar os mecanismos pelos quais os inibidores atuam. MATERIAL E MÉTODOSSementes de Chenopodium quinoa foram moídas e peneiradas para se obter uma farinha fina, a qual foi submetida à extração. Diferentes soluções foram testadas para a extração sendo: água destilada; NaCl 0,10m; NaCl 0,15m; NaCl 0,30m; NaoH 0,01m e NaCl 0,02m e em diferentes tempos (1, 2, 3, 4 e 5 horas). o efeito da temperatura sobre a recuperação da atividade do inibidor de tripsina foi testado pelo aquecimento às temperaturas de 60, 70, 80, 90 e 100°C. As extrações foram feitas sempre na proporção de 1:5(p/v) de farinha de semente para meio de extração, sob agitação branda constante. Após a homogeneização, o material foi centrifugado a 3.600rpm durante 30min. o sobrenadante foi separado e dialisado contra água