RESUMO -Lipase da semente de mamona (Ricinus communis L.) é tradicionalmente estudada utilizando-se a semente moída, com remoção do óleo presente na semente. Essa forma, porém, dificulta estudos cinéticos da enzima, além de ainda resultar em baixa concentração de lipase por grama do extrato sólido. A extração da enzima para a sua forma solúvel permitirá também concentrá-la e imobilizá-la em suporte insolúvel para melhoria de suas propriedades cinéticas. A partir de estudos preliminares já realizados, testou-se aqui estratégia de extração sequencial da enzima em dois pHs diferentes, visando maior seletividade na operação. A semente moída e desengordurada foi assim submetida à extração em tampão fosfato, pH 6, 1 hora, condição de alta extração de proteínas contaminantes, seguida de extração em pH 7 por 1 hora, condição de alta extração da lipase, objetivo do trabalho. Essa estratégia foi efetiva, permitindo aumento no grau de purificação de 0,69 para 2,01, com pequena redução no rendimento da extração.