EXTRAÇÃO DE LIPASE DE MAMONA (Ricinus communis L.) EM FASE AQUOSA

Abstract

RESUMO -Endospermas de mamona (Ricinus communis L.) processados contendo atividade lipolítica têm sido utilizados com sucesso em alguns bioprocessos. Porém, a toxina ricina presente na mamona limita a aplicação deste biocatalisador, sendo necessário separá-la da lipase. A primeira etapa deste processo é a solubilização do biocatalisador em fase aquosa. Neste contexto, foi avaliada a extração da lipase de mamona em diferentes tampões e pHs. O extrato bruto de mamona foi incubado em diversos tampões por 12h a 25°C; seguido de centrifugação para separação do endosperma. Os melhores resultados nesta etapa foram obtidos com tampão fosfato 0.05 mol.L -1 pH 7.0, carbonato-bicarbonato 0.05 mol.L -1 pH 9.0 e 10.0, onde mais de 70% da atividade lipolítica foi extraída para a fase líquida ao final do processo. INTRODUÇÃOProcessos enzimáticos, quando comparados com processos catalisados quimicamente, apresentam como principais vantagens a redução do consumo energético do processo, uma vez que enzimas atuam em condições suaves de temperatura e pressão, apresentando alta seletividade e especificidade (Narwal, Gupta 2013). Enzimas são capazes de catalisar reações químicas sem a formação de subprodutos indesejáveis e sem as custosas etapas de proteção e desproteção de grupos reativos necessárias na maioria dos processos onde catalisadores químicos são empregados (Leung et al., 2010).Atualmente, inúmeras enzimas são empregas em processos industriais, como proteases, celulases e lipases. Dentre estas, lipases (glicerol éster hidrolases, E.C 3.1.1.3) são especialmente interessantes devido sua vasta aplicabilidade -desde a indústria alimentícia, passando pela química fina chegando até a produção de biocombustíveis -fazendo com que sejam alvo de extensa pesquisa científica (Vescovi 2012).Lipases naturalmente catalisam a hidrólise de óleos e gorduras quando em meio aquoso, de forma parcial ou total. Porém, também são capazes de realizar reações de esterificação, transesterificação (alcoólise) e interesteríficação de lipídeos quando em meio orgânico (Atabani et al., 2012;Adlercreutz 2013). Embora lipases mais utilizadas industrialmente sejam obtidas a partir de fontes microbianas, lipases podem ser obtidas de diferentes fontes, como células animais e vegetais (Pierozan et al., 2009). Enzimas vegetais são novidade em termo de fontes enzimáticas; porém possuem vantagens como baixo custo da matéria-prima, aplicação na indústria farmacêutica e alimentícia, fácil aceitação no mercado devido sua Área temática: Processos Biotecnológicos 1

Lipases: Sources of Acquisition, Ways of Production, and Recent Applications

“…Ricinus communis L. [21,46,47] Citrus sinensis [23] Oryza sativa [48] Cucurbita moschata [49] Prunus dulcis [50] Table 2 Animal sources for lipase production.…”

Otimização Da Extração Da Lipase De Sementes Dormentes De Mamona Por Extração Sequencial

“…Extração de lipase em diferentes pHs: A extração foi realizada seguindo a metodologia descrita por Silva et al, (2015), empregando os tampões com força iônica de 50 mM: citrato de sódio pH 4, fosfato de sódio pHs 6 e 7, carbonato-bicarbonato de sódio pH 10. 30 g de ESM foram suspensos em 30 mL de tampão.…”

“…A extração máxima, 45%, foi obtida a pH 7, uma vez que a pH 10, houve diminuição da atividade medida no sobrenadante para 17% (dados não apresentados). Os resultados obtidos para o efeito do pH na extração dessa lipase confirmam os anteriores observados no estudo preliminar (Silva et al, 2015).…”