Ex-Vivo Method to Quantifiably Evaluate the Staining Effectiveness of Anterior Lens Capsule Dyes

Abstract

Purpose High frequency of cataracts and the requirements of new European Union regulations for medical devices require the availability of preclinical models to adequately evaluate anterior lens capsule dyes before their use in patients. Herein, we describe an ex vivo method to quantifiably evaluate the macroscopic and microscopic staining effectiveness of anterior lens capsule dyes using porcine eyes. Methods Commercially available trypan blue–based products or physiological saline solution (negative control) was injected into porcine eyes. Anterior pole and lens (after extraction) were macroscopically photographed, and the images were quantitatively analyzed. Lenses were histologically processed, and the staining intensity microscopically was semiquantified. Results Macroscopic evaluation of the anterior pole revealed bluish staining of the anterior capsule; however, this coloring cannot be macroscopically discerned after lens extraction. Quantitative image analyses showed significant ( P < 0.01) staining of the lens capsule compared to the negative control, but not significant ( P > 0.05) between the products tested. Quantitative analysis of dying on lens images could not be performed. Microscopic semiquantification of the capsule staining intensity allows us to appreciate differences between products. Conclusions The described method is a quick and useful tool for macroscopic evaluation by surgeons to choose an anterior capsule staining for use during everyday surgeries, and a more specific microscopic evaluation also allows us to determine the effectiveness and usefulness of these products. Translational Relevance This method satisfies preclinical effectiveness evaluations required by European Union regulations and complements the safety and toxicity evaluations that new products must guarantee before they enter the market and are used in clinical practice.

Avaliação ex vivo da coloração da cápsula anterior da lente de cavalos com três concentrações de violeta genciana para treinamento cirúrgico

“…Diferentes técnicas de coloração da cápsula da lente são descritas. Fernández et al (28) injetaram o corante sob uma bolha de ar, conforme descrito originalmente por Melles et al (10) . No presente estudo, optou-se pela técnica de coloração sob bolha de ar, pois é um método que já havia sido descrito em estudos de treinamento de facoemulsificação (10,28) .…”

“…Fernández et al (28) injetaram o corante sob uma bolha de ar, conforme descrito originalmente por Melles et al (10) . No presente estudo, optou-se pela técnica de coloração sob bolha de ar, pois é um método que já havia sido descrito em estudos de treinamento de facoemulsificação (10,28) . Além disso, é uma técnica fácil, econômica, reprodutível e que possibilita a coloração homogênea da cápsula.…”

“…Ainda não está estabelecido o tempo adequado de exposição da cápsula anterior ao corante vital. Em estudos anteriores foram estabelecidos períodos de exposição de 10 (14) , 30 (28) e 60 segundos (11,20) . Em nosso estudo, o tempo de contato entre o corante e a cápsula anterior foi de 60 segundos.…”

“…Os avaliadores foram representados por cirurgiões experientes em cirurgia de catarata. Fernández-Bueneo (28) avaliou a coloração macro e microscopicamente e afirmou que a avaliação macroscópica é um método rápido e útil para os cirurgiões escolherem um produto para uso em cirurgias diárias. No presente estudo, optamos pela avaliação macroscópica e subjetiva de dois examinadores com experiência cirúrgica.…”

Ex vivo evaluation of anterior lens capsule staining in horses with three concentrations of gentian violet for surgical training

“…Different techniques for staining the lens capsule are described. Fernández et al (28) injected the dye under an air bubble, as originally described by Melles et al (10) . In the present study, we opted for the air bubble staining technique as this method has previously been described in phacoemulsification training studies (10,28) .…”