Evaluation of an Immunoradiometric Assay for Bone Alkaline Phosphatase Mass Concentration in Human Sera

Abstract

The performance characteristics of an immunoradiometric assay for bone alkaline phosphatase mass concentration in human sera are reported.Within-run imprecision (n = 20) was 12.1% (x = 7.8 μ §/\) and 3.6% (x = 22.8 Mg/1), between-day imprecision (n = 8) was 10.1% (X = 20.3 μ£/1) and 2.8% (x = 84.3 μ §/1). There was a linear relationship between the concentrations of the Standards employed and the counts per minute up to 120 μ^Ι. The detection limit was 0.3In 102 apparently healthy persons (51 males and 51 females; r nge of age: 18-56 years) the following reference intervals were established: 3.8-21.3 μg/l (males) and 3.4-15.0 μg/l (females).We compared the values obtained using the immunoassay with those obtained by precipitating of bone alkaline phosphatase with wheat-germ lectin (alkaline phosphatase activity concentration was determined at + 25 °C by the optimized Standard method according to the Recommendations of the German Society for Clinical Chemistry). For the reference individuals the relationship between the results pf the two methods is given by the following regression equation: Bone alkaline phosphatase activity concentration [U/l] = 14.81 + 3.28 X bone alkaline phosphatase mass concentration [jigft] (r = + 0.783). In 89 sera from 32 patients before and after renal transplantation (r nge of bone alkaline phosphatase mass concentration: 2-39 μg/l) comparison between the two methods yielded a linear correlation coefficient of r = + 0.886.Of 20 sera taken from patients suffering from various hepatobiliary diseases (r nge of total alkaline phosphatase activity concentration: 217-3270 U/l) 18 (90%) showed a bone alkaline phosphatase mass concentration above the upper reference limit (r nge of bone alkaline phosphatase mass concentration: 16-206 μg/l). This is probably due to a cross-reactivity of the antibodies employed for the immunoassay of bone alkaline phosphatase with liver alkaline phosphatase in plasma. It is concluded that an increased release of liver alkaline phosphatase into serum leads to falsely high values for bone alkaline phosphatase mass concentration, severely limiting the diagnostic validity of the test in such cases.

Monitoring of Bone Resorption after Renal Transplantation by Measuring the Urinary Excretion of Pyridinium Cross-Links

“…For the interpretation of bone alkaline phosphatase values (as determined immunoradiometrically) it has to be taken into account that the antibodies employed in the test show 16% cross reactivity with liver alkaline phosphatase (19,20). In the sera examined in the present study interference by liver alkaline phosphatase can be excluded since all sera with increased bone alkaline phosphatase mass concentrations showed Ζ,-γ-glutamyl transferase activity concentrations within the reference range.…”

Bestimmung der knochenspezifischen Alkalischen Phosphatase: Immunoradiometrischer Assay versus Lektinfällung

“…Schließlich korrelieren in unserer Studie die Lektinfällungswerte sehr gut mit der AP-Aktivität. Die IRMA-Werte korrelieren aufgrund unserer Daten ebenfalls sehr gut mit der AP-Aktivität, womit wiederum Daten von Bouman et al [3] und Withold und Rick [4] bestätigt werden. Dagegen läßt sich bezüglich der IRMA-Werte zwar eine positive Korrelation mit normalen LAP-Aktivitäten nachweisen, nicht jedoch mit erhöhten.…”

“…Hier fanden sich signifikant höhere IRMA-Werte in Seren von Hepatopathie-Patienten im Vergleich zu Patienten ohne klinisch-chemische Hinweise auf eine Lebererkrankung, wie dies andere Autoren bereits beschrieben haben [4,6]. Dieser Sachverhalt gilt gleichermaßen für die Lektinfällung.…”

“…Somit erfährt sowohl die Lektin-Methode als auch die Knochen-AP-Bestimmung mittels IRMA eine Einschränkung hinsichtlich ihrer diagnostischen Wertigkeit, sobald die zu untersuchenden Seren von Patien-ten mit hepatobiliären Erkrankungen stammen. Eine Erklärung für diese "Kreuzreaktivität' 4 mag darin liegen, daß es bei benignen hepatobiliären Erkrankungen [4,7] Der potentielle Nachteil der Lektin-Methode, daß' bei Probenlagerung von länger als 30 Tagen bei -20 °C ein signifikanter Aktivitätsverlust der Knochen-AP eintritt [3], dürfte im Klinikalltag keine wesentliche Rolle spielen, da die Patientenprobenbearbeitung wohl kaum dermaßen verzögert stattfindet.…”

Review

“…Both assays show a cross-reactivity of 14-20% with liver alkaline phosphatase (8)(9)(10)(11)(12). However, it is supposed that in patients with hepatobiliary diseases the measured bone alkaline phosphatase values stay within the reference range if total alkaline phosphatase activity does not exceed about twice the upper limit of the normal range (6).…”