Evaluación de los parámetros funcionales espermáticos en individuos infértiles normozooespérmicos

Mayorga-Torres, B.J.M.; Maya, Wálter Cardona; Cadavid, Ángela P.; Camargo, Maurício

doi:10.1016/j.acuro.2012.06.008

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“…La evaluación de los parámetros espermáticos funcionales se realizó por citometría de flujo (CoulterEpics XL -BeckmanCoulter, CA, USA) analizando entre 5.000 y 10.000 espermatozoides de acuerdo a los protocolos previamente estandarizado en el Grupo Reproducción (15-19) y luego de incubar 250 µL de semen con el inóculo bacteriano o con los factores solubles a 37°C/2 horas en proporción 1 a 1. Posterior a la incubación, se obtuvieron alícuotas de (15,16,22) 2x10 6 y de 5x10 6 espermatozoides para ser incubadas con diferentes fluorocromos (Tabla I) de acuerdo al parámetro a evaluar (15,16,(20)(21)(22).…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

Evaluación in vitro del efecto de Neisseria gonorrhoeae y los factores solubles producto de su metabolismo sobre la calidad espermática

Suárez

Maya

2016

Rev. chil. obstet. ginecol.

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a Microbióloga Bioanalista. b Bacteriólogo. RESUMENAntecedentes: N. gonorrhoeae es una de las principales causas de uretritis, prostatitis y epididimitis en hombres. En el tracto urogenital masculino, esta bacteria o los factores solubles producto de su metabolismo pueden interactuar con los espermatozoides y alterar su calidad. Objetivos: Determinar el efecto de la incubación in vitro de N. gonorrhoeae y los factores solubles producto de su metabolismo sobre la calidad espermática y evaluar la interacción bacteria-espermatozoide. Método: Se realizó incubación de una concentración 0,5 McFarland de N. gonorrhoeae y de los factores solubles producto de su metabolismo bacteriano con muestras de semen de voluntarios aparentemente sanos. Se cuantificaron los parámetros espermáticos convencionales (movilidad y viabilidad) y funcionales (potencial de membrana mitocondrial, integridad y lipoperoxidación de la membrana espermática, detección de especies reactivas del oxígeno, integridad de la cromatina y expresión de Anexina V), empleando microscopía y citometría de flujo, respectivamente. Para evaluar la interacción de N. gonorrhoeae con los espermatozoides humanos se realizaron extendidos en placas para su observación al microscopio. Resultados: N. gonorrhoeae puede unirse al espermatozoide y disminuir la viabilidad espermática luego de 1,5 horas de incubación con los espermatozoides humanos (84,5% vs 66,5%, p<0,05), sin afectar los parámetros espermáticos funcionales. Conclusión: N. gonorrhoeae interactúa con los espermatozoides humanos afectando la viabilidad espermática.PALABRAS CLAVE: Neisseria gonorrhoeae, factores solubles bacterianos, calidad seminal, parámetros espermáticos convencionales y funcionales SUMMARY Background: N. gonorrhoeae is a major cause of urethritis, prostatitis and epididymitis in men. In the male urogenital tract, the bacteria or soluble products of their metabolism may interact with sperm, and alter their quality. Aims: To determine the in vitro effect of incubation of N. gonorrhoeae and soluble products of their metabolism on sperm quality and assess the bacteria-sperm interaction. Methods: Soluble products of bacterial metabolism and 0.5 McFarland concentration of N. gonorrhoeae were incubated with semen samples from healthy volunteers. Conventional (motility and viability) and functional sperm parameters (potential of mitochondrial membrane integrity and sperm membrane lipid peroxidation, detection of reactive oxygen species, chromatin integrity and expression of annexin V) were quantified using microscopy and cytometry flow, respectively. To assess the interaction of N. gonorrhoeae to human sperm microscopic observation was performed. Results: N. gonorrhoeae can join the sperm and decreases sperm viability after 1.5 hours of

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Section: Materiales Y Métodosunclassified

Evaluación in vitro del efecto de Neisseria gonorrhoeae y los factores solubles producto de su metabolismo sobre la calidad espermática

Suárez

Maya

2016

Rev. chil. obstet. ginecol.

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“…Varias aproximaciones metodológicas permiten la cuantificación de ROS espermáticas: quimioluminiscencia, espectroscopía y citometría de flujo (18,33). El ensayo de quimioluminiscencia evalúa el estado redox de los espermatozoides con alta sensibilidad, sin embargo, la fuente de éstas en el semen no está claramente identificada, convirtién-dose en un factor de confusión en este análisis.…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

“…Diferentes autores proponen la importancia de la compactación del ADN en la protección de la información genética masculina frente a diferentes factores tanto internos como externos (33,(49)(50)(51)(52)(53).…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

“…Daños en el ADN espermático son una sólida señal de baja calidad seminal (33,(48)(49)(50)(51), no obstante, el desarrollo de tecnologías en la reproducción asistida, han permitido el desarrollo de embriones in vitro, a partir de espermatozoides que habrían sido rechazados in vivo, lo cual puede tener serías implicaciones a largo plazo en la salud y el bienestar de los niños concebidos mediante técnicas de reproducción asistida, siendo un objetivo claro, la selección de gametos con las mejores características.…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

“…El estrés oxidativo juega un papel importante en la etiología de la infertilidad masculina (33), aunque los orígenes de las ROS responsables de esta condición han sido objeto de una considerable incertidumbre y de cierta controversia. Si bien existen otras fuentes celulares, la contribución por parte de la mitocondria espermática ha sido estudiada como un factor regulador de la actividad y funcionalidad espermática, dadas las características únicas de estas células al estar en contacto con el ambiente externo.…”

Section: Conclusionesunclassified

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Estrés oxidativo: ¿un estado celular defectuoso para la función espermática?

Mayorga-Torres

Camargo

Cadavid

et al. 2015

Rev. chil. obstet. ginecol.

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RESUMENEn los organismos vivos, las cantidades de radicales libres y especies reactivas del oxígeno (ROS) son controladas por un complejo sistema de homeostasis, capaz de mantener niveles fisiológicos de ROS necesarios para el funcionamiento y regulación de algunas biomoléculas. Paralelamente, los organismos poseen sistemas bioquímicos de protección contra el estrés oxidativo, que consiste en el desbalance entre la producción de especies químicas altamente reactivas y las defensas antioxidantes de la célula. Dicho estrés contribuye de manera importante a la etiología tanto de la senescencia celular como de algunas enfermedades. En el contexto reproductivo, las células espermáticas pasan por una serie de cambios fisiológicos durante los procesos de maduración, capacitación y fecundados, entre los que se incluyen las modificaciones de las proteínas existentes, reguladas por señales procedentes del entorno espermático, donde las ROS modulan importantes vías bioquímicas, involucradas en procesos fundamentales de la función del espermatozoide y que se pueden alterar en estados de estrés oxidativo. El objetivo de esta revisión de literatura es describir algunos de los procesos que contribuyen al estrés oxidativo y sus implicaciones sobre la funcionalidad espermática. PALABRAS CLAVE: Espermatozoide, fertilidad, especies reactivas del oxígeno, antioxidantes SUMMARYLiving organisms regulate the load of free radicals and reactive oxygen species (ROS) by a complex homeostatic system, capable of maintaining physiological levels of ROS, necessary for the action and regulation of some biomolecules. In parallel, organisms harbor biochemical protection systems against oxidative stress, consisting of an unbalance state between oxygen reactive chemical species and antioxidant defense production; this kind of biochemical stress has been shown to contribute to cellular senescence and the development of different diseases. In the reproductive field, the spermatic cells undergo a serial of physiological changes during the maturation, capacitation and fertilization process. Such changes include the modification of proteins regulated by signals from the sperm environment, where ROS modulate important biochemical pathways involved in fundamental processes of sperm function, and that could be altered under oxidative stress conditions. The objective of this review is to describe some of the processes that contribute to oxidative stress and its implications on sperm functionality.

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Mammalian Sperm Mitochondrial Function as Affected by Environmental Toxicants, Substances of Abuse, and Other Chemical Compounds

Amaral

Tavares

Escada-Rebelo

et al. 2018

Mitochondrial Dysfunction Caused by Drugs and Environmental Toxicants

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Evaluación de los parámetros funcionales espermáticos en individuos infértiles normozooespérmicos

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Evaluación in vitro del efecto de Neisseria gonorrhoeae y los factores solubles producto de su metabolismo sobre la calidad espermática

Evaluación in vitro del efecto de Neisseria gonorrhoeae y los factores solubles producto de su metabolismo sobre la calidad espermática

Estrés oxidativo: ¿un estado celular defectuoso para la función espermática?

Mammalian Sperm Mitochondrial Function as Affected by Environmental Toxicants, Substances of Abuse, and Other Chemical Compounds

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