Errors in development of fetuses and placentas from in vitro-produced bovine embryos

Farin, P.W.; Piedrahita, Jorge A.; Farin, Charlotte E.

doi:10.1016/j.theriogenology.2005.09.022

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“…Several studies have demonstrated increased blastocyst development when FBS is supplemented, (Lazzari et al 2002, Leivas et al 2011) similar to the current study. However, the use of FBS has also been associated with abnormal fetal growth, in subsequent pregnancies (Young et al 1998, Lazzari et al 2002, Farin et al 2004). However, these latter studies supplemented FBS up to 10%, while the current study utilized 2.5%.…”

Section: Immunofluorescene Of H3r26me2 During In Vitro Developmentmentioning

confidence: 99%

Supplementation of fetal bovine serum alters histone modification H3R26me2 during preimplantation development of in vitro produced bovine embryos

et al. 2015

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In vitro production (IVP) of bovine embryos is not only of great economic importance to the cattle industry, but is also an important model for studying embryo development. The aim of this study was to evaluate the histone modification, H3R26me2 during pre-implantation development of IVP bovine embryos cultured with or without serum supplementation and how these in vitro treatments compared to in vivo embryos at the morula stage. After in vitro maturation and fertilization, bovine embryos were cultured with either 0 or 2.5% fetal bovine serum (FBS). Development was evaluated and embryos were collected and fixed at different stages during development (2-, 4-, 8-, 16-cell, morula and blastocyst). Fixed embryos were then used for immunofluorescence utilizing an antibody for H3R26me2. Images of stained embryos were analyzed as a percentage of total DNA. Embryos cultured with 2.5% FBS developed to blastocysts at a greater rate than 0%FBS groups (34.85±5.43% vs. 23.38±2.93%; P<0.05). Levels of H3R26me2 changed for both groups over development. In the 0%FBS group, the greatest amount of H3R26me2 staining was at the 4-cell (P<0.05), 16-cell (P<0.05) and morula (P<0.05) stages. In the 2.5%FBS group, only 4-cell stage embryos were significantly higher than all other stages (P<0.01). Morula stage in vivo embryos had similar levels as the 0%FBS group, and both were significantly higher than the 2.5%FBS group. These results suggest that the histone modification H3R26me2 is regulated during development of pre-implantation bovine embryos, and that culture conditions greatly alter this regulation.

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Section: Immunofluorescene Of H3r26me2 During In Vitro Developmentmentioning

confidence: 99%

Supplementation of fetal bovine serum alters histone modification H3R26me2 during preimplantation development of in vitro produced bovine embryos

et al. 2015

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show abstract

“…Embryos that develop in vivo are superior in quality to in vitroproduced embryos, survive cryopreservation better and are less prone to developmental abnormalities (Rizos et al, 2002;Farin et al, 2006 andHavlicek et al, 2010). Therefore, improved knowledge of the very early uterine environment (i.e.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

PGF2α levels in Day 8 blood plasma are increased by the presence of one or more embryos in the uterus

Gómez

Martín

Carrocera

et al. 2015

Animal

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In cattle, the detection of very early endometrial responses is considered to be hampered by the presence of only a single embryo. Therefore, we have previously developed a model of multiple embryo transfer to circumvent this hindrance. In this work, we analysed embryo-maternal interactions in the bovine uterus on day 8 of development while comparing the presence of multiple v. single embryos using embryo transfer and artificial insemination, respectively. Concentration of proteins (β-actin, NFkB, clusterin and immunoproteosome 20S β5i subunit-i20S), by western blot, and hexoses (glucose and fructose) were measured in paired samples of uterine fluid (UF) from the same animal with and without embryos in the uterus and were compared with UF obtained after artificial insemination. Prostaglandin (PG) F 2 α and PGE 2 concentrations were also analysed in blood plasma. The four proteins analysed and hexoses were unaffected by the presence of one or more embryos in the uterus. However, blood PGF 2 α showed similar, significant increases with one or more embryos over cyclic animals; such changes were not observed in blood PGE 2 . Although multiple embryo transfer may appear to be non-physiological, we showed that the uterus, at the very early embryonic stages, does exhibit physiological reactions. Multiple embryo transfer can, therefore, be used for studies of very early embryomaternal interactions in vivo in monotocous species.

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“…O maior peso observado nos produtos de PIVE reforça evidências anteriores em bezerros taurinos de diferentes raças (Hasler et al 1995, Jacobsen et al 2000, Numabe et al 2000, Bertolini & Anderson 2002, mas contradiz outras (Jacobsen et al 2003, Rérat et al 2005. Definitivamente, não caracteriza, nos animais estudados, a ocorrência da condição denominada de Síndrome do Recém-nascido Grande (Large Offspring Syndrome), a qual é relatada em bezerros concebidos por métodos artificias in vitro (Young et al 1998, Farin et al 2006. Gasparelli et al (2009), acompanhando o nascimento de 122 bezerros Nelore produtos de PIVE, chegaram a observar dois bezerros nascidos com peso entre 50 e 59 kg, e três com peso superior a 60 kg.…”

Section: Resultsunclassified

“…A morfologia diferenciada da placenta pode contribuir para isso (Bertolini & Anderson 2002, Farin et al 2006 e suspeita-se do efeito da exposição dos oócitos e dos embriões a componentes de enriquecimento empregados na composição dos meios de cultura utilizados para a manipulação dos mesmos (Behboodi et al 1995, Young et al 1998, Jacobsen et al 2000. As alterações morfológicas do sistema circulatório, Fig.5.…”

Section: Resultsunclassified

“…No caso dos bezerros clonados já está bem caracterizado que nascem com tamanho e peso maiores, com vasos umbilicais de maior diâmetro e apresentam maior chance de desenvolverem doenças umbilicais (Garry et al 1996, Batchelder et al 2007, Miglino et al 2007, Meirelles et al 2010. A ocorrência da síndrome do bezerro grande (Large Offspring Syndrome) é comumente descrita em animais frutos de processos artificiais de fertilização e não somente nos bezerros clonados (Behboodi et al 1995, Kruip & den Daas 1997, Young et al 1998, Jacobsen et al 2000, Bertolini & Anderson 2002, Farin et al 2006. A maior susceptibilidade dos bezerros produtos de PIVE à doença umbilical é um assunto que merece ser melhor esclarecido.…”

Section: Introductionunclassified

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Avaliação ultrassonográfica da involução das estruturas umbilicais extra e intracavitárias em bezerros sadios da raça Nelore concebidos naturalmente e produtos de fertilização in vitro

Sturion

Lisbôa

2013

Pesq. Vet. Bras.

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Esse trabalho foi desenvolvido com o objetivo de caracterizar a involução das estruturas umbilicais em bezerros sadios da raça Nelore ao longo dos primeiros 35 dias de vida, e de comparar esse processo em bezerros concebidos por métodos naturais ou por fertilização in vitro (FIV). Quarenta bezerros foram distribuídos em dois grupos (n=20) de acordo com o método de concepção (natural ou FIV) e cada grupo foi composto por dez machos e dez fêmeas. A ultrassonografia (transdutor microconvexo de 7,5 MHz) foi empregada para examinar o conjunto das estruturas remanescentes do cordão umbilical que compõem o umbigo externo e as estruturas abdominais (veia umbilical, artéria umbilical esquerda e ducto alantóide), mensurando-se os seus diâmetros em locais definidos. Os exames foram realizados entre 24 e 36 horas de vida e aos 7, 14, 21, 28 e 35 dias de idade. Testaram-se os efeitos do sexo, da idade e do método de concepção por meio da análise de variâncias de medidas repetidas. O exame ultrassonográfico provou-se adequado para a avaliação das estruturas umbilicais extra e intracavitárias permitindo a caracterização do processo fisiológico de involução das mesmas. No umbigo externo, as veias umbilicais foram observadas como imagem individualizada até os 14 dias de vida e um conjunto de estruturas em processo de atrofia era visualizado após essa idade. No abdômen, a veia e a artéria umbilicais foram visualizadas até os 35 dias de idade e o ducto alantóide somente durante a primeira semana de vida. Essas estruturas apresentaram-se com parede hiperecóica regular e contínua e lúmen homogeneamente anecóico. O diâmetro de todas as estruturas umbilicais estudadas se reduziu continuamente ao longo do primeiro mês de vida (p<0,05), sem efeito do sexo (p>0,05). Comparados aos bezerros concebidos por métodos naturais, os produtos de FIV nasceram com os vasos umbilicais e o ducto alantóide um pouco mais calibrosos (diâmetros 1 a 3 mm maiores). Distintamente dos valores mais elevados estabelecidos em estudos prévios para os bezerros de raças européias, pode-se admitir, por fim, que nos bezerros recém-nascidos sadios da raça Nelore a espessura das estruturas que compõem o umbigo externo não deve ultrapassar 2 cm, o diâmetro da veia e da artéria umbilicais pode chegar a 1 cm e o do ducto alantóide é próximo a 0,5 cm.

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Errors in development of fetuses and placentas from in vitro-produced bovine embryos

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Supplementation of fetal bovine serum alters histone modification H3R26me2 during preimplantation development of in vitro produced bovine embryos

Supplementation of fetal bovine serum alters histone modification H3R26me2 during preimplantation development of in vitro produced bovine embryos

PGF2α levels in Day 8 blood plasma are increased by the presence of one or more embryos in the uterus

Avaliação ultrassonográfica da involução das estruturas umbilicais extra e intracavitárias em bezerros sadios da raça Nelore concebidos naturalmente e produtos de fertilização in vitro

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