It is generally assumed that the first step of alkane degradation in several yeast strains and bacteria is catalyzed by a monooxygenase system containing cytochrome P-460 as the terminal oxidase and a NADPH-cytochrome P-480 reductase as the electron transfer component. To prove this hypothesis both proteins were purified to homogeneity from the microsomal fraction of the alkane-assimilating yeast L. elongisporus and reconstituted in vitro.The cytochrome P-450, having a specific content of 12-17 nmoles/mg protein turned out t o be a typical member of this class of hemoproteins with respect to the molecular weight (53500) and spectral properties.The raductase component with a molecular weight of 79000 contains FAD and FMN as prosthetic groups.The recombination of the hemoprotein and the flavoprotein results in an enzyme system which catalyzes the monoterminal hydroxylation of hexadecane.The activity of the reconstituted enzyme system is remarkably stimulated by nonionic detergents, suggesting the requirement of an additional lipid factor. The possible importance of other electron transfer systems and of substrate transport is discussed with respect t o the function of the alkane monooxygenase system under in Vivo conditions. Ziel der Untersuchungen war die Aufklarung der Natur des Enzymsystems, das in der Hefe L. elongisporus den 1. Schritt des Alkanabbaus katalysiert. Das experimentelle Herangehen wurde dabei vor allem durch die beiden folgenden Befunde bestimnit : a ) der Hefestamm verfiigt iiberwiegend iiber einen monoterminalen Weg des Alkanabbaus.
b) n-Alkane induzieren die Bildung von Cyt Y-450, das beraits in den unzerstortenHefezellen anhand seines charakteristischen CO-Differenzspektrums nachweisbar ist (SCHUNCK et al. 1978, MAUERSBERGER et al. 1981.
Die Eigenschaft Cpt P-450 bei Kultivierung auf n-Alkanen zu bilden, teilt derLodderomyces-Stamm mit mindestens 8 weiteren Hefestiimmen sowie einer Reihe von Bakterien (Tab. 1).Bereits die ersten Nachweise dieses Hamoproteins in alkanverwertenden Mikroorganismen (CARDINI u. JURTSHUK 1968, GALLO et al. 1971, LEBEAULT et al. 1971, GALLO et al. 1973) fiihrten zu der Annahme, da13 Cyt P-450 in einigen Mikroorganismen den 1 . Schritt des Alkanabbaus katalysiert. Tabelle 2 so11 veranschaulichen auf welche Ergebnisse sich diese Hypothese stutzen kann. Folgt man der kritischen Bewertung der aufgefuhrten Kriterien (COOPER et al. 1979, BURKE 1981, so gab es neben einer Vielzahl indirekter Hinweise (Punkte 1 bis 8 in Tab. 2) lange Zeit keinen eindeutigen experimentellen Nachweis (Punkte 9 bis 11 in Tab. 2) fur die postulierte i, Hervorgegangen aus einem Vortrag, gehalten auf dem Leipziger Biotechnologie-Symposium, Sept. 1982; vgl. auch M-ER et al. (1983) Abkiirzung: Cytochrom -Cyt 44 2. Allg. bllkrobiol., Bd. 23, H. 10
