Emerging Bacterial Food‐Borne Pathogens and Methods of Detection

Logue, Catherine M.; Nolan, Lisa K.

doi:10.1002/9781118308035.ch44

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“…Además de los métodos microbiológicos estándar para la detección de S. enterica en alimentos, se ha diseñado una gran diversidad de ensayos basados en la PCR tanto de punto final como de tiempo real (7,8,9) , algunos de los cuales ya se encuentran disponibles como kits comerciales (7,10) . Aunque los ensayos de PCR en tiempo real para la detección de S. enterica en alimentos tienen gran sensibilidad, rapidez y especificidad (7,8) , los altos costos de implementación y el nivel de capacitación requerido limitan el acceso a dichas técnicas por las instituciones públicas encargadas de la inocuidad de alimentos y vigilancia sanitaria, manteniendo a los ensayos de PCR de punto final como una opción para la detección de S. enterica en alimentos en países en vías de desarrollo como es el caso de México.…”

unclassified

“…Aunque los ensayos de PCR en tiempo real para la detección de S. enterica en alimentos tienen gran sensibilidad, rapidez y especificidad (7,8) , los altos costos de implementación y el nivel de capacitación requerido limitan el acceso a dichas técnicas por las instituciones públicas encargadas de la inocuidad de alimentos y vigilancia sanitaria, manteniendo a los ensayos de PCR de punto final como una opción para la detección de S. enterica en alimentos en países en vías de desarrollo como es el caso de México.…”

unclassified

“…Besides, the standard microbiological methods for detection of S. enterica in foodstuffs, a varied assortment of endpoint and real-time PCR assays have been designed for that purpose (7,8,9) , some of which are available as commercial kits (7,10) . Despite that real-time PCR analyses for detection of S. enterica in foodstuffs are highly sensitive, fast, and specific (7,8) , their elevated costs and the level of training needed for its implementation limits its access by public institutions in charge of food safety and sanitary survey, which makes endpoint PCR assays to be an option for detection of S. enterica in foodstuffs in developing countries as Mexico. Furthermore, to the best of our knowledge, there are no reports in the literature of an endpoint or real time multiplex PCR method which detects Salmonella genus, subspecies I and serotype Typhimurium in milk.…”

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A multiplex PCR assay for detection of genus Salmonella, subspecies I , and serotype Typhimurium in milk

Vázquez-Garcidueñas

Meléndez-Ceja

Vázquez-Marrufo

2015

Rev. Mex. Cienc. Pecu.

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RESUMENDebido a la importancia social y económica de las enfermedades gastrointestinales causadas por alimentos contaminados con Salmonella enterica, es necesario contar con sistemas de detección rápidos, sensibles y específicos para la detección oportuna de dicho patógeno. En este trabajo se presenta un protocolo de PCR de punto final para la identificación de S. enterica en leche, que utiliza los pares de iniciadores STM3098-f2/STM3098-r2, STM4057-f/STM4057-r y STM4497-f/STM4497-r previamente validados como específicos del género Salmonella, de la subespecie I y del serotipo Typhimurium, respectivamente. El protocolo presentado permite la detección de 1 UFC/25 ml de leche contaminada artificialmente, con un periodo de pre-enriquecimiento de 12 h, en ensayos de PCR simple y multiplex con los tres pares de iniciadores. El protocolo diseñado puede ser aplicado en sistemas de vigilancia sanitaria para la detección de S. enterica en leche. PALABRAS CLAVE: Salmonella enterica, Leche, PCR multiplex. ABSTRACTGastrointestinal diseases caused by foodstuffs contaminated with Salmonella enterica implicate important social and economic issues, making it necessary to have fast, sensitive, and specific systems for opportune detection of the pathogen. An endpoint PCR protocol for identification of S. enterica in milk is presented using primer pairs previously validated as specific to the genus Salmonella (STM3098-f2/STM3098-r2), subspecies enterica (subspecies I) (STM4057-f/STM4057-r), and serotype Typhimurium (STM4497-f/ STM4497-r). This protocol allowed for detection of 1 CFU/25 mL of spiked milk after a 12 h pre-enrichment period by means of simple and multiplex PCR assay with the three used primer pairs. The designed protocol can be applied in sanitary survey programs for detection of S. enterica in milk.

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