Eine Mikromethode zur schnellen und spezifischen Serienbestimmung des Proteingehaltes unzerstörter Mikroorganismen

Abstract

Es wird eine Methode beschrieben, die es gestattet, den absoluten Proteingehalt in unzerstorten Mikroorganismen serienmaBig zu bestimmen. Als Material zur Erarbeitung und Diskussion der Methodik dienten Hefen; es lassen sich jedoch ohne Abanderung des Verfahrens Bakterien, Zellorganellen, Pilzsporen 11. a. untersochen.Proben mit einer Trockenmasse von 25 pg bis 200 pg werden auf Filterpapierquadrate anfgebracht, extrahierend fixiert nnd mit Bromphenolblau angefkrbt. Die Extinktion des eluierten Farbstoffs wird spektrophotometrisch bei 598 nm geniessen.Die Farbausbeute der Anfarbung ist nahezu linear abhangig von der Masse des Proteins und nnabhangig yon dessen Struktnr nnd Aminosanrezusammensetzung.Vergleichende Untersuchnngen mit Hilfe klassischer Proteinbestimmungsverfahren (Gesamtstickstoff, Proteinstickstoff, Aminosauren nach Totalhydrolyse) bestatigten die iiber die Farbemethode gewonnenen Proteinwerte.Zur Trockengewichtsbestimmung kleinster Probemengen (Abnahme einer Impfose yon distinkten Kolonien) dient eine Xtreulichtmessung im Suspensionsmittel Methanol/Wasser. I n proteinreichen Hefen ist der Anteil freier Aminosauren signifikant niedriger als in protcinarmen Spczies. Dagegen ist der Anteil des nichtproteinischen Stickstoffes in allen untersuchten Stammen annahernd gleich.

Wirkung von Ölen und Fettsäuren auf Wachstum und Enzymbildung bei Thermoactinomyces vulgaris II. Methodik der Wachtumsmessung in einer Submerskultur in Gegenwart von Öl

“…Fenchtmassebestimmungen (KOBAYASHI u. SUZUKI 1972, RORZANI et al 1972, UPTON u. FOGARTY 1977, GRAHAM et al 1976, WLACHOW 1980, KAMEL u. EL-AWAMRY 1979, YAMAMOTO et al 1964, TAUFEL et al 1979, LALUCE u. MOLINARI 1977, Extinktions-oder Trubungsmessungen (TSUJISKKA et al 1973, JEWSEN 1972, MANFREDINI u. WANG 1970 sowie die Proteinbestimmung in der Biomasse (SHIMADA et al 1978, EIRA~TZKE et al 1979, CONCONE et al 1978, HESSE et al 1971, HILLIGER ti. LINDNER 1975 herangezogen.…”