Effects of dimethyl sulfoxide and glycine on cryopreservation induced damage of plasma membranes and mitochondria to striped bass (Morone saxatilis) sperm

Adição de alanina, glicina e glutamina ao meio crioprotetor seminal de garanhões Mangalarga Marchador

“…A associação benéfica na motilidade espermática entre crioprotetores e aminoácidos constatada em equinos (Khlifaoui et al, 2005) e em outras espécies (Kundu et al, 2001;He & Woods 2003) não ficou evidenciada neste trabalho, possivelmente porque não foi reduzido o volume dos crioprotetores descritos por Vidament et al (2002), enquanto Khlifaoui et al (2005) reduziram o volume do glicerol, o qual não estava associado com dimetilformamida, para adição de glutamina. É possível que a concentração dos aminoácidos idealizada por Kundu et al (2001) não seja a mesma para utilização com o meio proposto por Vidament et al (2002) contendo glicerol e dimetilformamida com o objetivo de melhorar os parâmetros de motilidade espermática.…”

“…A adição de 40 mM de alanina ou 40 mM de glicina ou 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina resultaram em maior integridade de membrana acrossomal, enquanto o tratamento que utilizou 40 mM de alanina + 40 mM de glicina + 60 mM de glutamina apresentou menor funcionalidade de membrana e maior porcentagem de espermatozoides com acrossomas lesados, juntamente com o grupo em que não foram adicionados aminoácidos (Tabela 4). He & Woods (2004a) observaram que a glicina protege a mitocôndria e seu conteúdo de ATP, mas não protege a integridade da membrana plasmática espermática pós-descongelamento. Mesmo não melhorando a funcionalidade da membrana plasmática, a adição de 40 mM de alanina ou 40 mM de glicina ou 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina melhorou a integridade de membrana acrossomal, o que indica efeito protetor desses aminoácidos nestas concentrações utilizadas.…”

“…Apesar de ter sido verificado o efeito crioprotetor sobre espermatozoides em diversas espécies (SanchezPartida et al, 1992;Renard et al, 1996;Trimeche et al,1999;Kundu et al, 2001;He & Woods 2003, 2004a, os mecanismos de crioproteção espermática por aminoácido, assim como a função de aminoácidos livres na fisiologia do espermatozoide, ainda não foram esclarecidos. Kundu et al (2001) especularam ser possível os aminoácidos interagirem eletrostaticamente com grupos fosfato de fosfolipídeos na membrana plasmática do espermatozoide, formando desse modo uma camada protetora na superfície espermática.…”

“…Desse modo, sugeriram que essa mistura de crioprotetores pode ser benéfica para a criopreservação de sêmen de várias espécies. He & Woods (2003) também observaram melhor crioproteção utilizando alanina ou glicina associada ao Me 2 SO em espermatozoides de peixe "baixo listrado" (Morone saxatilis). A glicina tem sido usada com sucesso como crioprotetor não-penetrante para criopreservar espermatozoides e aumentar a motilidade pós-descongelamento (Kundu et al, 2001;He & Woods 2003).…”

“…He & Woods (2003) também observaram melhor crioproteção utilizando alanina ou glicina associada ao Me 2 SO em espermatozoides de peixe "baixo listrado" (Morone saxatilis). A glicina tem sido usada com sucesso como crioprotetor não-penetrante para criopreservar espermatozoides e aumentar a motilidade pós-descongelamento (Kundu et al, 2001;He & Woods 2003). He & Woods (2004b) observaram que a glicina protege a mitocôndria e seu conteúdo de ATP, mas não protege a integridade da membrana plasmática espermática no pós-descongelamento.…”