Effect of monensin on secretory pathway in GH3 prolactin cells. A cytochemical study.

Abstract

The effects of the carboxylic ionophore monensin have been studied on a rat prolactin cell line (GH3 cells) under basal conditions or after acute stimulation by thyrotropin-releasing hormone (TRH). It was found that 1) monensin induces a rapid dilatation of Golgi elements in these endocrine cells; 2) secretory product, prolactin, is localized by electron microscope immunocytochemistry attached to the inner face of the membrane of these dilated vacuoles; 3) monensin induces preferentially a dilatation of the cis face of the Golgi zone, since the "GERL" complex identified by acid phosphate cytochemistry is disorganized or fragmented rather than vacuolized; and 4) monensin decreases strongly the basal release of prolactin in the culture medium but does not prevent the stimulating effect of TRH on this release. This suggests that monensin blocks preferentially the pathway of release of secretory product under basal conditions in GH3 cells but that another pathway less sensitive to monensin is involved under acute stimulation by TRH.

Cytochemical localization of nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase(NADPase) and nucleoside diphosphatase activities in the Golgi apparatus of the rat epididymis.

“…Whether this dilation simply means the accumulation of transport material is a matter of conjecture because uniform vacuolization of all cisternae has been evidenced in the Golgi apparatus of the epididymal epithelium (41). In addition, the dilatation with monensin treatment has also been reported in other cell types at concentrations of 0.1-25 ,uM over longer periods (5,11,17,19,20,22,31,40,42,43). The basis for the cisternal swelling produced by monensin may also be related to the ability of the ionophore to catalyze the exchange inward of a monovalent cation for the outward release of a proton.…”

Effets de la monensine sur la sécrétion des caséines dans les cellules épithéliales mammaires de lapines en lactation

“…La prolactine, qui exerce un effet rapide sur la sécrétion des caséines, provoque un accroissement du volume relatif des micrové-sicules de la région golgienne (Ollivier-Bousquet, 1978). Enfin, cette région constitue un lieu de circulation de membranes intracellulaires puisque des molécules endocytées après liaison à la membrane plasmique sont rapidement décelables dans la région golgienne (Kane et al, 1983 (Tartakoff, 1983 ;Tougard et al, 1983). Il a ainsi permis d'étudier la fonction golgienne et de nombreuses voies intracellulaires qui lui sont associées (Ledger et Tanzer, 1984 ;Melin et al, 1984 ;Burditt et al, 1985).…”

“…Vassili, 1978 ;Tartakoff, 1983 ;Tougard et al, 1983: Orci et al, 1984. Dans les cellules épithéliales mammaires, les vésicules dilatées ne contiennent pas de phosphatase acide mais des protéines néosynthétisées, et peuvent donc être assimilées à des vésicules golgiennes contenant des produits de sécré-tion.…”

“…Dans les cellules épithéliales mammaires, les vésicules dilatées ne contiennent pas de phosphatase acide mais des protéines néosynthétisées, et peuvent donc être assimilées à des vésicules golgiennes contenant des produits de sécré-tion. Ceci est en accord avec les effets de la monensine dans les cellules GH3 (Tougard et al, 1983) où la prolactine en cours de sécrétion reste attachée à la face interne de la membrane des vésicules dilatées. Dans les cellules pancréati-ques, il a été montré, par autoradiographie en microscopie électronique, que la monensine agit au point de sortie des protéines sécrétoires, hors de l'appareil de Golgi (Tartakoff et Vassili, 1978).…”

“…Enfin, la monensine inhibe le niveau de base de la sécrétion de prolactine par les cellules GH3, mais n'inhibe pas la libération de prolactine induite par le TRH (Tougard et al, 1983 …”