Effect of Cryopreservation Conditions on Phenotypic Profile and Immunomodulating Activity of Fetal Liver Cells

Abstract

Исследовано влияние условий криоконсервирования (концентрация криопротектора диметилсульфоксида-ДМСО, скорость охлаждения в различных температурных интервалах) на фенотипический профиль и иммуномодулирующую активность клеток фетальной печени (КФП) крыс 14 суток гестации. Клетки замораживали по двум режимам под защитой 7,5; 10 и 12,5% ДМСО. Определяли фенотипический профиль КФП (CD34 + СD38-, Sca-1 + CD34-, Sca-1 + CD34 + , CD44-CD73 + , CD44 + CD73 +), их цитоморфологические показатели, количество и жизнеспособность. Разработанный в данной работе режим криоконсервирования КФП обеспечивал сохранность в гетерогенной популяции клеток с иммуномодулирующей активностью, которую оценивали в системе in vivo на модели экспериментального атопического дерматита (ЭАД). Экспериментально установлена эффективность применения криоконсервированных КФП по режиму 1 (1 град/мин до-25°С; 5-минутная стабилизация при-25°С и погружение в жидкий азот) с 10% ДМСО для восстановления показателей крови и снижения интенсивности кожных воспалительных реакций у крыс с индукцией ЭАД. Ключевые слова: криоконсервирование, ДМСО, клетки фетальной печени крысы, иммуномодулирующая активность, атопический дерматит. Реферат: Досліджено вплив умов кріоконсервування (концентрація кріопротектору диметилсульфоксиду − ДМСО, швидкість охолодження в різних температурних інтервалах) на фенотипічний профіль та імуномодулюючу активність клітин фетальної печінки (КФП) щурів 14 діб гестації. Клітини заморожували за двома режимам під захистом 7,5; 10 і 12,5% ДМСО. Визначали фенотипічний профіль КФП (CD34 + СD38-, Sca-1 + CD34-, Sca-1 + CD34 + , CD44-CD73 + , CD44 + CD73 +), їх цитоморфологічні показники, кількість та життєздатність. Розроблений у даній роботі режим кріоконсервування КФП забезпечував збереження в гетерогенній популяції клітини з імуномодулюючою активністю, яку оцінювали в системі in vivo на моделі експериментального атопічного дерматиту (ЕАД). Експериментально встановлено ефективність застосування кріоконсервованих КФП за режимом 1 (1 град/хв до −25°С; 5-хвилинна стабілізація при −25°С і занурення в рідкий азот) з 10% ДМСО для відновлення показників крові та зниження інтенсивності шкірних запальних реакцій у щурів із індукцією ЕАД. Ключові слова: кріоконсервування, ДМСО, клітини фетальної печінки щура, імуномодулююча активність, атопічний дерматит.

Cord Blood as a Corrector of Hematological and Cytomorphological Characteristics of Lymphohemopoietic Organs in Experimental Atopic Dermatitis

“…Відомо, що ступінь впливу факторів кріоконсервування на біологічний об'єкт визначається умовами реалізації процесу заморожування-відігрівання [97]. Незважаючи на те що кріоконсервування і ліофілізація є ‚агресивними‛ відносно структурних і функціональних харак-теристик клітин, ці процеси залишаються до теперішнього часу найбільш оптимальними методичними підходами до їх зберігання.…”