Effect of chamber characteristics, loading and analysis time on motility and kinetic variables analysed with the CASA-mot system in goat sperm

et al. 2018

Reprod. Fertil. Dev.

For over 30 years, CASA-Mot technology has been used for kinematic analysis of sperm motility in different mammalian species, but insufficient attention has been paid to the technical limitations of commercial computer-aided sperm analysis (CASA) systems. Counting chamber type and frame rate are two of the most important aspects to be taken into account. Counting chambers can be disposable or reusable, with different depths. In human semen analysis, reusable chambers with a depth of 10µm are the most frequently used, whereas for most farm animal species it is more common to use disposable chambers with a depth of 20µm . The frame rate was previously limited by the hardware, although changes in the number of images collected could lead to significant variations in some kinematic parameters, mainly in curvilinear velocity (VCL). A frame rate of 60 frames s-1 is widely considered to be the minimum necessary for satisfactory results. However, the frame rate is species specific and must be defined in each experimental condition. In conclusion, we show that the optimal combination of frame rate and counting chamber type and depth should be defined for each species and experimental condition in order to obtain reliable results.

Section: Effect Of Counting Chamber Type On Casa-mot Resultsmentioning

confidence: 99%

Section: Effect Of Counting Chamber Type On Casa-mot Resultsmentioning

confidence: 99%

CASA-Mot technology: how results are affected by the frame rate and counting chamber

Bompart

García‐Molina

et al. 2018

Reprod. Fertil. Dev.

“…This distribution seems to be species‐dependent, being almost non‐existent (i.e., homogeneous) in human, (Soler et al, ) whereas there is a trend for skewed distribution in fox (Soler, García et al, ). Each of the various reusable and disposable counting chambers currently available has shown a different kind of distribution stability which needs to be taken into account when assessing motility data (Bompart et al, ; Del Gallego et al, ). For this reason, all the scored fields were included in our analyses to reduce the random effect related to non‐homogeneous distribution of the cells.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Dog sperm swimming parameters analysed by computer‐assisted semen analysis of motility reveal major breed differences

Reprod Domestic Animals

Arnau

García‐Molina

et al. 2019

Contents Dogs have undergone an intensive artificial selection process ever since the beginning of their relationship with humans. As a consequence, a wide variety of well‐defined breeds exist today. Due to the enormous variation in dog phenotypes and the unlikely chance of gene exchange between them, the question arises as to whether they should still be regarded as a single species or, perhaps, they be considered as different taxa that possess different reproductive traits. The aim of this study was therefore to characterize some male reproductive traits, focusing on kinematic characteristics of dog spermatozoa from several breeds. Thirty‐seven dogs from the following breeds were used: Staffordshire Bull Terrier, Labrador Retriever, Spanish Mastiff, Valencian Rat Hunting Dog, British Bulldog and Chihuahua. Semen samples were obtained via manual stimulation and diluted to a final sperm concentration of 50 million/ml, and they were subsequently analysed by the computer assisted semen analysis (CASA‐Mot) ISAS®v1 system. Eight kinematic parameters were evaluated automatically. All parameters showed significant different values among breeds and among individuals within each breed. The fastest sperm cells were those of Staffordshire Bull Terriers and the slowest were recorded in Chihuahuas. The intra‐male coefficient of variation (CV) was higher than the inter‐male CV for all breeds with the Staffordshire Bull Terrier showing the lowest values. When taking into consideration the cells by animal and breed, discriminant analyses showed a high capability to predict the breed. Cluster analyses showed a hierarchical classification very close to that obtained after phylogenetic studies with genome markers. In conclusion, future workers on dog spermatozoa should bear in mind major differences between breeds and realize that results cannot be extrapolated from one to another. Because sperm characteristics are associated with breed diversity, dogs may represent a good model to examine changes in reproductive parameters associated with selection processes.

“…Los diferentes diseños de cámara afectan tanto la distribución final de los espermatozoides dentro de la cámara como las características de movilidad y cinética. Esto se ha demostrado en diversas especies como el verraco (Christensen et al, 2005), el bovino (Prathalingam et al, 2006;Contri et al, 2010;Lenz et al, 2011;Gloria et al, 2013), el caprino (Del-Gallego et al, 2017), el humano (Tomlinson et al, 2001;Peng et al, 2015), conejo (Massányi et al, 2008), ovino (Palacín et al, 2013) y el equino (Len et al, 2010;Spizziri et al, 2010;Hoogewijs et al, 2012). En especies como la caprina, la movilidad progresiva y las velocidades de los espermatozoides fueron mayores con cámaras de carga capilar a alturas de 20 μm respecto de 10 μm (Del-Gallego et al, 2017).…”

Section: Discussionunclassified

“…Esto se ha demostrado en diversas especies como el verraco (Christensen et al, 2005), el bovino (Prathalingam et al, 2006;Contri et al, 2010;Lenz et al, 2011;Gloria et al, 2013), el caprino (Del-Gallego et al, 2017), el humano (Tomlinson et al, 2001;Peng et al, 2015), conejo (Massányi et al, 2008), ovino (Palacín et al, 2013) y el equino (Len et al, 2010;Spizziri et al, 2010;Hoogewijs et al, 2012). En especies como la caprina, la movilidad progresiva y las velocidades de los espermatozoides fueron mayores con cámaras de carga capilar a alturas de 20 μm respecto de 10 μm (Del-Gallego et al, 2017). Sin embargo, estos resultados no se confirmaron en otras especies, como la humana (Lannou et al, 1992;Soler et al, 2012) o el hámster (Cricetinae), (Shivaji et al, 1995), lo que podría relacionarse con el hecho de que los espermatozoides de diferentes especies exhiben diferentes patrones de movilidad.…”

Section: Discussionunclassified

Evaluación de cámaras de recuento sobre parámetros espermáticos de verracos analizados con un sistema CASA-Mot

Madrigal‐Valverde

2019

Agron. Mesoam.

Introducción. La comprensión de la variabilidad en los valores de la cinética de los espermatozoides, por medio de diferentes profundidades de cámaras, demuestra la importancia de crear un estándar para los métodos de control de calidad en la industria de la inseminación artificial (IA). Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los parámetros de cinética de los espermatozoides con base en diferentes profundidades de cámara de visualización mediante un sistema comercial de análisis de esperma asistidos por computadora, CASA-Mot. Materiales y Métodos. Se utilizaron veinte dosis seminales de diez verracos pietrain. El periodo experimental fue de febrero a julio del año 2017. Se utilizó el sistema integrado de análisis de semen (ISAS®v1) con una frecuencia de captura de 50 Hz. Se utilizaron cámaras de recuento ISAS®D4C16 e ISAS®D4C20 con una altura de 16 y 20 μm, respectivamente y precalentadas a 37 °C. Resultados. Se encontraron valores superiores (p<0,05) para todos los parámetros cinéticos cuando la altura de la cámara de recuento fue de 20 μm. El efecto de zona dentro de la cámara de recuento se mantuvo constante entre las dos alturas, y las variaciones observadas en los parámetros cinéticos se debieron a un efecto aleatorio del verraco. Al analizar el efecto de zona dentro de la cámara de recuento, los primeros tres campos de análisis mostraron mayor velocidad curvilínea y rectilínea (p<0,05) que los siguientes campos, lo que se atribuye a la presencia de movimiento pasivo (drifting). Conclusión. La mayor amplitud y capacidad de volumen dentro de la cámara de recuento (20 μm versus 16 μm), podría favorecer el desplazamiento sin restricciones de las células, lo que explicaría el incremento en los valores cinéticos conforme aumentó la altura de la cámara. Deben continuarse los estudios sobre las condiciones técnicas del análisis seminal para estandarizar los métodos de valoración con los sistemas CASA.