Efeitos do 17-estradiol e da lâmina na regulação da expressão dos genes DDEF2 e PHLDA1 em linhagens de células derivadas de adenocarcinomas de mama MCF-7 e MDA-MB-231

Estudo da interação entre vias de sinalização dos estrógenos e fatores de crescimento no controle da transcrição dos genes HNRPK, PAWR e PHLDA1

“…Estudo prévio realizado por nosso grupo, mostrou que as células MCF-7 expostas ao 17β-estradiol (E2) apresentam um aumento de 2,0 vezes ou mais na expressão do PHLDA1 sendo que o tratamento destas células com ICI 182, 780 inibe completamente este efeito (Marchiori;Casolari;. No presente trabalho, o E2 induziu a expressão do PHLDA1, nas células ER-positivas MCF-7, em 2 h, 6 h e 24 h de tratamento enquanto o prétratamento das células com ICI 182,780 seguido pela adição do E2 manteve a expressão deste gene semelhante aos tratamentos com ICI 182,780 isoladamente.…”

“…Com o objetivo de analisar as diferenças de expressão gênica decorrentes da manutenção das células MCF-7 em ambiente pobre em esteróides e em outros fatores de soro por diferentes intervalos de tempo, realizou-se um experimento no qual estas células foram mantidas em 5 % de soro tratado (ST, soro tratado com carvão dextrana) ou 1 % de soro normal (SC, Soro Carenciado) por 24 h, 48 h, 72 h, 96 h e 120 h. No ponto de 120 h foram realizados tratamentos com 10 -8 M e 10 -9 M de E2 (17β-estradiol) por 6 h com o intuito de observar a resposta dessas células ao estradiol após um longo período de carenciamento de esteróides e de outros fatores de soro. Como descrito em Material e Métodos, as amostras de Em adição ao resultado obtido neste experimento, no qual o tratamento com 10 -8 M de E2 mostrou-se mais efetivo em relação ao tratamento com 10 -9 M, um ensaio prévio utilizando os tratamentos com 10 -7 , 10 -8 , 10 -9 , 10 -10 e 10 -11 M de E2 por 2 h, 6 h e 24 h nas células MCF-7 também mostrou que a concentração 10 -8 M de E2 é a mais eficiente em qualquer um dos intervalos de tempo testados (MARCHIORI, 2007). Assim, a concentração de 10 -8 M de E2 continuou a ser utilizada nos experimentos posteriores.…”