Efeito do sistema ácido indol-3-acético/peroxidase de raiz forte sobre a viabilidade de Staphylococcus aureus

Pugine, Silvana Marina Piccoli

doi:10.11606/d.74.2008.tde-29042008-105235

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“…Na Figura 5 pode ser observado o ciclo da oxidação da HRP com a formação das suas diferentes formas: nativa, HRP-I, HRP-II, HRP-III e forma ferrosa (PUGINE, 2008;RODRIGUES, 2007;BERGLUND et al, 2002;DUNFORD, 1991;DUNFORD, 1999). Na estrutura da HRP é encontrado um grupamento heme, a ferriprotoporfirina IX, com quatro nitrogênios pirrólicos ligados ao ferro (FOLKES; WARDMAN, 2001).…”

Section: Sensibilidade Da P Zopfii Aos Antimicrobianosunclassified

Estudo da interação da alga Prototheca zopfii com neutrófilos recuperados de leite bovino e ação do sistema AIA/HRP sobre este patógeno

Cunha¹

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Estudo da interação da algaexponencial ao longo do tempo de incubação em que não foi possível determinar o início da fase de morte. Ainda, foram encontrados os genótipos 1, 2 e 3 nos isolados em estudo. A produção de peróxido de hidrogênio pelos neutrófilos na presença da alga foi estimulada 5 vezes em relação ao controle, estimulou a atividade das enzimas catalase (CAT) em 21% e glutationa redutase (GR) em 27% e não houve diferença significativa quanto à atividade de CAT, GR e superóxido dismutase (SOD) produzido pela P. zopfii. Também foi verificado que a P. zopfii não foi englobada pelo neutrófilo. O sistema AIA/HRP inibiu o crescimento do microrganismo em 45, 82 e 88% nos tempos de 4, 6 e 9 horas de incubação; a atividade da SOD, CAT, Glutationa Peroxidase (GPx) e GR aumentou respectivamente em 90, 120, 150% e 3,4 vezes; houve redução da viabilidade da P. zopfii em 10, 15, 20, 25 e 32% após os tempos de 4, 6, 8, 10 e 12 horas de incubação; e não afetou a integridade do DNA após 6 horas de incubação. Conclui-se que a P. zopfii é altamente resistente frente aos neutrófilos e demonstrou ser susceptível quanto ao efeito microbicida do sistema AIA/HRP. Palavras-chave: ácido indol-3-acético; peroxidase de raiz forte; mastite; microbicida; P. zopfii. Studies have shown the incidence of bovine mastitis associated with the algae Prototheca zopfii. The objective of this work was to study the interaction of P. zopfii with neutrophils recovered from bovine milk and to evaluate the effect of system indole-3-acetic acid/horseradish peroxidase (IAA/HRP) on the viability of this microorganism in vitro experiment. P. zopfii was recovered from cows with clinical mastitis and both the molecular and morphological characterization were performed besides the evaluation of exponential growth of the microorganism in the laboratory. Next, neutrophils recovered from bovine milk were incubated in the absence and presence of opsonized P. zopfii and were evaluated the production of hydrogen peroxide, antioxidant enzymes on neutrophils and microorganism, and phagocytic capacity. In another study, P. zopfii was incubated with the system IAA/HRP and the viability assessed by colony forming units (CFU), antioxidant enzymes activity, membrane integrity by exclusion with Trypan blue and DNA integrity. The results were analyzed by analysis of variance with a 5% significance using the Tukey test. Results from P. zopfii characterization showed various cellular sizes, presence of autofluorescence, exponential microorganism growth throughout the incubation time and was not possible to determine the beginning of the death. Moreover it was found genotypes 1, 2 and 3 in the isolates in study. The production of hydrogen peroxide by neutrophils in the presence of algae was stimulated 5 times compared to the control, increase the activity of catalase (CAT) in 21% and glutathione reductase (GR) in 27% was seen in neutrophils; and there was no significant difference in CAT, GR and superoxide dismutase (SOD) activity produced by P.zopfii. P. zopfii was not...

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Section: Sensibilidade Da P Zopfii Aos Antimicrobianosunclassified

Estudo da interação da alga Prototheca zopfii com neutrófilos recuperados de leite bovino e ação do sistema AIA/HRP sobre este patógeno

Cunha¹

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“…Para a cepa ATCC 6538, a concentração de AIA considerada como CIM foi de 40 mM e para a cepa ATCC 43300, foi de 60 mM. A ação bacteriostática do AIA, combinado com HRP, também foi observada por Pugine (2008) ao estudar S. aureus e por Cunha et al (2010), estudando a alga Prototheca zopfii, ambos em meio mínimo (PBS). Nestes estudos a concentração de AIA foi de 1 mM e HRP 1µM, sendo que a concentração de HRP é idêntica a utilizada no estudo aqui apresentado; sem, entretanto, observar efeito antimicrobiano do AIA isoladamente.…”

Section: Teste De Sensibilidade a Antimicrobianos (Antibiograma)unclassified

“…aureus (PUGINE, 2008). Neste estudo, observou-se que o sistema AIA/HRP inibe a formação de colônias e reduz drasticamente a integridade e polaridade da membrana celular de S.…”

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Vaz¹

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Aç çã ão o d do o á ác ci id do o i in nd do ol l--3 3--a ac cé ét ti ic co o s so ob br re e S St ta ap ph hy yl lo oc co oc cc cu us s a au ur re eu us s Pirassununga 2012 Andréia Cristina Nakashima Vaz A Aç çã ão o d do o á ác ci id do o i in nd do ol l--3 3--a ac cé ét ti ic co o s so ob br re e S St ta ap ph hy yl lo oc co oc cc cu us s a au ur re eu us s vi AGRADECIMENTOS À Deus, por ter me dado a graça de viver... por ter me dado a força de lutar pelos meus desejos... por ter colocado pessoas tão especiais em minha vida ... por ter me dado oportunidades de viver e crescer! À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo -FAPESP, pelo financiamento do projeto de pesquisa e incentivo à experimentação acadêmica.À CAPES, pela bolsa de estudos.À Profa. Dra. Mariza Pires de Melo, pela oportunidade de trabalhar com pessoas tão queridas.Aos professores da Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, pelos ensinamentos.Ao Prof. Dr. Heidge Fukumasu, pelos ensinamentos, apoio e, claro, pela paciência de ter que me aturar batendo repetidas vezes na porta de sua sala.

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