Efeito da alteração na captação de sacarose ao metabolismo de Saccharomyces cerevisiae.

Dário, Marcelo Goulart

doi:10.11606/t.87.2012.tde-04062012-114632

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“…Although the disaccharides sucrose and cellobiose could be cleaved intracellularly either via hydrolysis or via phosphorolysis, the iSUCCELL strategy proposed here involves hydrolysis, since this route benefits from decreased free-energy conservation, which in turn results in higher ethanol yields on sugar (Basso et al 2011) (Figure 2). In order to achieve intracellular sucrose hydrolysis, the invertase-encoding SUC2 gene could be either modified to constitutively and exclusively express the intracellular form of invertase (Basso et al 2011), or be completely deleted, as this Δsuc2 strain would still hydrolyse sucrose via intracellular α-glucosidases (Dário 2012;Franken et al 2013;Bahia et al 2018). Since duplication of the AGT1 gene proved crucial for improved sucrose fermentation in the evolved iSUC2 strain developed by Basso et al (2011), overexpression of native AGT1 under a stronger, constitutive promoter or introduction of extra AGT1 copies might also be necessary.…”

Section: The Isuccell Chassismentioning

confidence: 99%

Neither 1G nor 2G fuel ethanol: setting the ground for a sugarcane-based biorefinery using an iSUCCELL yeast platform

Bermejo

Raghavendran

Gombert

2020

FEMS Yeast Research

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First-generation (1G) fuel ethanol production in sugarcane-based biorefineries is an established economic enterprise in Brazil. Second-generation (2G) fuel ethanol from lignocellulosic materials, though extensively investigated, is currently facing severe difficulties to become economically viable. Some of the challenges inherent to these processes could be resolved by efficiently separating and partially hydrolysing the cellulosic fraction of the lignocellulosic materials into the disaccharide cellobiose. Here, we propose an alternative biorefinery, where the sucrose-rich stream from the 1G process is mixed with a cellobiose-rich stream in the fermentation step. The advantages of mixing are 3-fold: (i) decreased concentrations of metabolic inhibitors that are typically produced during pretreatment and hydrolysis of lignocellulosic materials; (ii) decreased cooling times after enzymatic hydrolysis prior to fermentation; and (iii) decreased availability of free glucose for contaminating microorganisms and undesired glucose repression effects. The iSUCCELL platform will be built upon the robust Saccharomyces cerevisiae strains currently present in 1G biorefineries, which offer competitive advantage in non-aseptic environments, and into which intracellular hydrolyses of sucrose and cellobiose will be engineered. It is expected that high yields of ethanol can be achieved in a process with cell recycling, lower contamination levels and decreased antibiotic use, when compared to current 2G technologies.

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Section: The Isuccell Chassismentioning

confidence: 99%

Neither 1G nor 2G fuel ethanol: setting the ground for a sugarcane-based biorefinery using an iSUCCELL yeast platform

Bermejo

Raghavendran

Gombert

2020

FEMS Yeast Research

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“…A dosagem de açúcares redutores através de DNS requer, entretanto, mesmo nos protocolos (adaptações) mais econômicos, considerável volume de reagente e, em sua maioria, leituras individuais de amostras em espectrofotômetro, demandando dispêndio significativo de tempo e dinheiro em cada análise (SUMNER, 1921;SUMNER;SISLER, 1944;MILLER, 1959;LEUNG;THORPE, 1984;SADDLER, 1985;SCHWALD et al, 1988;HU et al, 2008;SAQIB;WHITNEY, 2011;DÁRIO, 2012;TEIXEIRA et al, 2012). Assim sendo, no intuito de diminuir os custos com a dosagem desses carboidratos e acelerar a análise de amostras em processos produtivos e/ou laboratórios de pesquisa, adaptamos a referida metodologia para leitura em microplacas de 96 poços.…”

Section: Dosagem De Açúcares Redutores Com O Reativo Dns Em Microplacaunclassified

“…A economia é percebida também após cada ensaio, haja vista que, (SUMNER, 1921;SUMNER;SISLER, 1944;MILLER, 1959;LEUNG;THORPE, 1984;SADDLER, 1985;SCHWALD et al, 1988;HU et al, 2008;SAQIB;WHITNEY, 2011;DÁRIO, 2012;TEIXEIRA et al, 2012); **Para um ensaio com 96 leituras; ***Corresponde ao tempo destinado à redução do ácido 3,5-dinitrosalisílico pelo açúcar, para geração da cor.…”

Section: Conclusãounclassified

“…A. et al são a glicose e a frutose. Esses carboidratos são dois dos principais monossacarídeos presentes em processos fermentativos, dentre os quais se destacam a produção de vinho, cachaça e etanol combustível (BASSO et al, 2008;STAMBUK et al, 2008;TRONCHONI et al, 2009;BADOTTI et al, 2010;CORTÉS et al, 2010;SANTOS et al, 2011;DÁRIO, 2012;DELLA-BIANCA et al, 2013). A glicose e a frutose são monossacarídeos de seis carbonos (hexoses) que se diferenciam pela forma cíclica e pela posição do grupo carbonila presente em suas estruturas.…”

Section: Introductionunclassified

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Dosagem de açúcares redutores com o reativo DNS em microplaca

Santos

Deoti

Müller

et al. 2017

Braz. J. Food Technol.

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Este é um artigo publicado em acesso aberto (Open Access) sob a licença Creative Commons Attribution, que permite uso, distribuição e reprodução em qualquer meio, sem restrições desde que o trabalho original seja corretamente citado. Dosagem de açúcares redutores com o reativo DNS em microplaca Microwell plate-based method for the determination of reducing sugars with the DNS reagent ResumoO método colorimétrico mais amplamente empregado para a determinação de açúcares redutores utiliza o ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS) como agente oxidante. No entanto, essa metodologia clássica demanda grande quantidade de reagente (DNS), amostra e tempo. No intuito de reduzir custo e tempo empregados nos ensaios, adaptamos o método clássico de DNS, realizado em tubos, a um rápido e econômico experimento em microplacas de 96 poços. Os resultados obtidos com essa nova metodologia foram comparados a análises por HPLC em 60 amostras, oriundas de cultivos laboratoriais de leveduras vinícolas, e diferiram em menos de 10%. Assim sendo, esse novo método, que pode ser considerado validado em relação ao método padrão e a análises cromatográficas, revela-se um ensaio rápido e de baixo custo para a determinação de açúcares redutores.Palavras-chave: Açúcar redutor; Frutose; Glicose; Leitor de microplaca; Levedura. SummaryThe most used colorimetric method for the determination of reducing sugars uses 3,5-dinitrosalicylic acid (DNS) as the oxidizing agent. Nevertheless, this classic method expends significant amounts of the reagent (DNS), sample and time. Aiming to reduce costs and time, we adapted the classic DNS method, assayed in tubes, into a rapid and economic experiment in 96-well microplates. The results obtained with this new method were compared with HPLC analyses in sixty samples, obtained from laboratory cultures of wine yeasts and the data differed by less than 10%. Thus, this new method can be considered to be validated in relation to the standard method and chromatographic analyses, and reveals itself as a rapid and low cost assay for the determination of reducing sugars. Food Technol., v. 20, e2015113, 2017. Received: Dec. 28, 2015 Accepted: Dec. 15, 2016 1 Introdução KeywordsAçúcares redutores são carboidratos que possuem seu grupo carbonílico livre, capazes de se oxidar na presença de agentes oxidantes em solução alcalina. Essa oxidação ocorre apenas com o monossacarídeo em sua forma linear -que está em equilíbrio com sua estrutura cíclica. Assim, o carbono carbonílico, denominado anomérico quando na estrutura cíclica, é oxidado a um grupo carboxílico. Por outro lado, os carboidratos cujos carbonos anoméricos estão envolvidos em ligações glicosídicas, sendo incapazes de assumirem a sua forma linear e, portanto, de se oxidarem em solução alcalina, são denominados açúcares não redutores, como exemplo, a sacarose (SILVA et al., 2003;NELSON; COX, 2014).Dentre os açúcares redutores, duas hexoses particularmente importantes para a indústria, especialmente a de alimentos,

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“…Although the disaccharides sucrose and cellobiose could be cleaved intracellularly either via hydrolysis or via phosphorolysis, the iSUCCELL strategy proposed here involves hydrolysis, since this route benefits from decreased free-energy conservation, which in turn results in higher ethanol yields on sugar ) (Figure 2.2). In order to achieve intracellular sucrose hydrolysis, the invertase-encoding SUC2 gene could be either modified to constitutively and exclusively express the intracellular form of invertase , or be completely deleted, as this Δsuc2 strain would still hydrolyse sucrose via intracellular α-glucosidases (Dário 2012;Franken et al 2013;Bahia et al 2018). Since duplication of the AGT1 gene proved crucial for improved sucrose fermentation in the evolved iSUC2 strain developed by , overexpression of native AGT1 under a stronger, constitutive promoter or introduction of extra AGT1 copies might also be necessary.…”

Section: The Isuccell Chassismentioning

confidence: 99%

Towards an iSUCCELL Saccharomyces cerevisiae platform for fuel ethanol production

Magalí Bermejo

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I have envisioned myself writing this section for so many times, and every time I ended up in a very emotional state. This moment is like watching a movie for the second time, you know what is going to happen, but you focus on the details and on the performance of the supporting actors and actresses that contribute to the story in different ways. No one achieves anything alone, and here I would like to thank all the people and Institutions that helped me make this accomplishment possible.In the following lines, I will switch between English, Portuguese, and Spanish.Andreas, meu chefe querido, como costumo te dizer. Minha gratidão por você é ENORME, e é difícil escrever estas linhas sem me emocionar. Jamais esquecerei aquela primeira conversa que tivemos na sua sala, em um absoluto espanhol porque meu português era inexistente na época. Mal sabia eu que aquela pessoa com aspecto um tanto sério e rígido, ia me demonstrar que as primeiras impressões podem estar muito enganadas. Obrigada por ter confiado em mim quando nem eu mesma conseguia, por ter me dado os espaços para eu expor meus sentimentos com total liberdade, pelo trato que sempre recebi de você, e por me dizer aquelas palavras de força em meus momentos de fraqueza. Por fim, e não menos importante, obrigada por tudo o que aprendi com você e por estar sempre disposto a me apresentar oportunidades profissionais.Ronald, thank you so much for giving me the opportunity of experiencing one of the most unforgettable and wonderful times of my lifemy stay in The Netherlands. Your kindness, sense of humour, and positivity made my experience at CBS even more special. Adiphol, my sweet Adi, you have the ability to make everything around you colourful. Thank you so much for your endless patience, for your continuous support and sensitivity, and for being the sweetest mentor I could ever have. P.S.: Lunch time! Glei, você é certamente o responsável pela maior parcela do conhecimento que adquiri em biologia molecular. Você é O CARA de genética de leveduras, minha maior referência. Obrigada por tudo o que me ensinou!! Trabalhar com você durante o meu doutorado e o projeto "CoronaYeast" foi espetacular. Aqui também quero agradecer ao Prof. Gonçalo por me permitir trabalhar no LGE durante parte do processo de doutoramento. Rô e Marquinhos, obrigada pelos questionamentos e colocações nas reuniões de grupo que foram importantes para meu desenvolvimento profissional, assim como as experiências de PED que realizei com vocês como docentes. Sem tirar mérito ao aspecto profissional, o que mais levo comigo é a qualidade de pessoa que vocês são, e o trato carinhoso e respeitoso que sempre tiveram comigo. Obrigada, queridos!! Chico e Fifa, o LEMeB nasceu com vocês. Obrigada por terem contribuído para o crescimento do lab, tanto em formação de recursos humanos quanto em conhecimento. Vocês são pessoas queridas para todos os Lemébios! Pri, a rainha dos abraços!! Obrigada por esse dom que você tem, que com um simples olhar consegue enxergar quando eu preciso de um abraço. E nossa como é ...

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Efeito da alteração na captação de sacarose ao metabolismo de Saccharomyces cerevisiae.

Abstract: Título da Tese: Efeito da alteração na captação de sacarose ao metabolismo de Saccharomyces cerevisiae.

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Neither 1G nor 2G fuel ethanol: setting the ground for a sugarcane-based biorefinery using an iSUCCELL yeast platform

Neither 1G nor 2G fuel ethanol: setting the ground for a sugarcane-based biorefinery using an iSUCCELL yeast platform

Dosagem de açúcares redutores com o reativo DNS em microplaca

Towards an iSUCCELL Saccharomyces cerevisiae platform for fuel ethanol production

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