Differentiation of an adult neuron cell line increases susceptibility to rabies infection.

Abstract

Una gran variedad de modelos in vitro se usan para estudiar la infección por virus de rabia, pero hasta el momento no se dispone de una línea neuronal adulta del sistema nervioso central (SNC) para dichos estudios. Por esta razón, nuestro objetivo fue determinar la susceptibilidad de una línea neuronal adulta del SNC (CAD-R1) a la infección por virus de rabia. Para ello, los cultivos se mantuvieron por 5 días en medio con suero (células CAD-R1 indiferenciadas) o sin suero (células CAD-R1 diferenciadas). Luego, se infectaron con una cepa de virus de rabia altamente neurotrópica (CVS) mantenida en células de tipo fibroblástico (CVS-BHK) o en cerebro de ratón (CVS-CR). Los dos tipos de células (indiferenciadas y diferenciadas) se infectaron con ambas cepas de virus de rabia; la proporción de células infectadas en los cultivos diferenciados fue mucho mayor (porcentajes de infección de 83,2% y 78,7% para CVS-BHK y CVS-CR, respectivamente) que en las células indiferenciadas (51,4% y 60,4%) (prueba t de Student<0,05). Estos datos indican que la susceptibilidad a la infección es dependiente del estado de diferenciación celular, posiblemente debido a que estas células adquieren características morfológicas y bioquímicas durante el proceso de diferenciación, que las hace más susceptibles a la infección por el virus de rabia. Con estos resultados, se puede concluir que las células CAD R1 son un buen modelo de infección para el virus de rabia, lo que las convierte en una excelente herramienta para estudiar el neurotropismo del virus de rabia, la patogenia de la infección, el aislamiento de virus o la producción de vacunas más seguras y potentes.Palabras clave: virus de rabia, cultivo celular, líneas neuronales, inmunocitoquímica Diffrentiation of an adult neuron cell line increases susceptibility to rabies infectionA wide variety of in vitro models have been used for studying rabies infection, however, currently, no central nervous system (CNS) adult neuron cultures are available. The current study determined the susceptibility to rabies infection in an adult CNS neuron cell line (CAD-R1). Cultures of CAD-R1 cells were held for 5 days in medium containing serum (undifferentiated CAD-R1 cells) or in serum-free medium (differentiated CAD-R1 cells). They were then infected with highly neurotropic rabies virus (RV) strain (CVS), obtained from fibroblastic cells (CVS-BHK) or from adult mouse brain (CVS-MB). Undifferentiated and differentiated cells were infected with the two RV strains, but the percentage of infected cells in differentiated cultures was significantly greater (83% and 79%, respectively) than in undifferentiated cells (51% and 60%) (Student's t test<0.05). Susceptibility to infection apparently depended on cellular differentiation state, possibly due to acquisition of additional morphological and biochemical characteristics during the differentiation process that made them more susceptible to RV infection. Therefore, CAD R1 cells may represent a good model for RV infection, making them a useful tool for studying R...

Studies of the central nervous system‐derived CAD cell line, a suitable model for intraneuronal transport studies?

“…The CAD cell line has also been used for the study of cAMP signaling pathways by transfecting the cells with different agents (Johnston et al, 2002(Johnston et al, , 2004Chen et al, 2005). Moreover, the CAD cell line has become a useful tool for studying rabies infection (Martinez-Gutierrez et al, 2004). Thus, the CAD cell line, undifferentiated, and especially differentiated with long processes, may constitute an important resource for studying intracellular dynamics and molecular regulation of peptides and receptors.…”