Development of real-time RT-PCR assays for eel gonadotropins and their application to the comparison of in vivo and in vitro effects of sex steroids

Aroua, Salima; Weltzien, Finn‐Arne; Belle, Nadine Le; Dufour, Sylvie

doi:10.1016/j.ygcen.2007.02.027

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“…T on the other hand, has been shown to strongly induce pituitary lhb mRNA levels in vitro, but no effect was observed in vivo (Aroua et al, 2007). The lack of in vivo effect from T can be explained by T having a positive effect on the d2rb receptor and tyrosine hydroxylase gene expression in the eel forebrain (Weltzien et al, 2006;.…”

Section: Aa-cyp19a1 and Aa-ars Expression Levels In The Pituitarymentioning

confidence: 97%

“…Eel acidic ribosomal phosphoprotein P0, aa-arp (Table 1, Weltzien et al, 2005b;Aroua et al, 2007;Peñaranda et al, 2010) was used as a reference gene in the qPCR analysis because its mRNA expression is stable throughout hormonal treatment (Weltzien et al, 2005b).…”

Section: Primer Designmentioning

confidence: 99%

“…The lack of in vivo effect from T can be explained by T having a positive effect on the d2rb receptor and tyrosine hydroxylase gene expression in the eel forebrain (Weltzien et al, 2006;. In addition, it should be noted that the female eels used in the in vivo experiment by Aroua et al (2007) were juvenile silver eels, and therefore aa-ara, aa-arb, and aa-cyp19a1 transcript levels …”

Section: Aa-cyp19a1 and Aa-ars Expression Levels In The Pituitarymentioning

confidence: 99%

“…Acidic ribosomal phosphoprotein P0, ARP (Table 1; Weltzien et al, 2005b;Aroua et al, 2007;Peñaranda et al, 2010) was used as reference gene in the quantitative real-time reverse trancriptase polymerase chain reaction (qPCR), because its mRNA expression has been shown to be stable also during experimental treatment (Weltzien et al, 2005b). The Primer3 program (http:// frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/primer3) was used to design specific primers to quantify the aa-gnrhr gene expression (Table 1).…”

Section: Primer Designmentioning

confidence: 99%

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Effect of thermal regime on the expression of key reproductive genes during hormonally-induced vitellogenesis in female European eels

Mazzeo¹

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RESUMENLa población de anguilla europea (Anguilla anguilla L., 1758) está sufriendo una drástica reducción. A su vez se trata de una especie muy apreciada por el mercado y su ciclo reproductivo no se ha podido cerrar puesto que esta especie no madura en cautividad. Por estas razones, hasta el momento, la producción global de anguila recae sobre las poblaciones naturales. Todos estos factores hacen urgente el cierre del ciclo productivo y para ello es necesario comprender la fisiología reproductiva y las razones de su imposibilidad de madurar en cautividad.Con la presente tesis, se pretende aportar mayores conocimientos sobre la fisiología reproductiva en hembras de anguila europea maduradas hormonalmente Para alcanzar este objetivo, se analizó la expresión de los genes: cyp19a1, ara, arb, gnrhr1a, gnrhr1b, gnrhr2, zpb and zpc, en animales bajo el regimen térmico comunemente utilizado. Por último se quiso evaluar el efecto de la temperatura sobre la vitelogenesis tanto sobre la expresión génica como en el perfil de esteroides (T,. De hecho, la anguila europea cuando migra al mar de los Sargazos para reproducirse experimenta un regimen térmico desde temperaturas más bajas a más altas.Tradicionalmente en acuicultura las anguilas se han madurado a temperatura constante y relativamente alta lo que podría afectar a la vitelogenesis y la calidad final de los oocitos.Para este estudio fue necesario la clonación y caracterización de nuevos genes. Su expresion genica fue estudiada por qPCR tras el diseño de los primers. El perfil esteroidogénico fue analizado por immunoensayos y los estados de desarrollo gonadal se calsificaron histológicamente.Como primer resultado se obtuvieron la secuencia para 6 genes en anguila europea. El análisis de la expresión génica permitió comprender la función de algunos de los genes estudiados a lo largo de la vitelogénesis (arb, gnrhr1b and gnrhr2) en diferentes regiones del cerebro.La temperatura se confirmó como un factor crucial durante la vitelogénesis. Por un lado, las anguilas sometidas a bajas temperaturas al inicio de la vitelogenésis mostraron mejores parámetros reproductivos, los cuales podrían tener un efecto en la calidad final de los oocitos. Por otra parte, temperaturas más altas son indispensables para alcanzar los estadios más avanzados de la vitelogenesis. ABSTRACTEuropean eel (Anguilla anguilla, L., 1758) is suffering a strong population decrease and at the same time it is a very appreciated species and by now it has not been possible closing its cycle life. In fact, this species does not mature in captivity unless hormonally induced. So all the production is up to the natural population. All these factors together make urgent achieving the closing of the productive cycle and for this aim it is important to understand the reproductive physiology and the reasons of this development blockage.The present thesis wants to be a new contribution to the knowledge of reproductive physiology in female European eel submitted at hormonal treatment. To achieve this goal, expressio...

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Section: Aa-cyp19a1 and Aa-ars Expression Levels In The Pituitarymentioning

confidence: 97%

Section: Primer Designmentioning

confidence: 99%

Section: Aa-cyp19a1 and Aa-ars Expression Levels In The Pituitarymentioning

confidence: 99%

Section: Primer Designmentioning

confidence: 99%

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Effect of thermal regime on the expression of key reproductive genes during hormonally-induced vitellogenesis in female European eels

Mazzeo¹

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“…Acidic ribosomal phosphoprotein P0 (ARP): ARPfw: GTG CCA GCT CAG AAC ACT G; ARPrv: ACA TCG CTC AAG ACT TCA ATG G (Aroua et al, 2007;Weltzien et al, 2006) was used as reference gene in the quantitative real-time Reverse Transcriptase-Polymerase chain reaction (qPCR) because its mRNA expression has been shown to be stable during experimental maturation . The qPCR expression stability of the reference gene was determined using the BestKeeper program (Pfaffl et al, 2004) Genes with a SD value higher than 1 are defined as unstable.…”

Section: Primers and Reference Genementioning

confidence: 99%

Molecular approaches related to the European eel (Anguilla anguilla) reproductive process

Morini¹

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ACKNOWLEDGEMENTSEn primer lugar quiero dar las gracias a Johnny por haberme dado la oportunidad de realizar este doctorado. Muchas gracias por la ayuda y los buenos consejos prestados. Agradezco mucho tu comprensión y empatía cada vez que he estado malita.Gracias también a Luz, por tu buen humor y tu gran simpatía. Me has hecho sentir muy cómoda desde el principio y además me has convertido en fanática gatuna.David, muchas gracias por haber confiado en mi desde el principio, darme libertad en la realización de los experimentos y haber resuelto todas las dudas que iban surgiendo.Por otra parte quería dedicar un párrafo muy especial a mis primeros amigos españoles, mis preferidos y que a la vez eran mis compañeros de trabajo.Como podéis imaginar siempre es difícil llegar a otro país, lejos de la familia, de los amigos de la infancia y sin hablar el idioma. Vosotros me lo habéis hecho todo más fácil. He aprendido mucho a vuestro lado y he evolucionado mucho gracias a vosotros, de ser sepia (gracias Vic) a casi valenciana con acento francés. Me lo he pasado fenomenal entre las cervecitas del viernes, las excursiones del sábado, las inumerables comidas y cenas, nocheviejas, etc… Rosa, nunca olvidaré nuestra primera salida "Alcampo", tu cara mirándome fijamente mientras cojeabas y sonaba la música de tu móvil!!! Toda una historia… Y en nochevieja, que bien me lo pasé con mi compañera de cubatas y de "baño que pincha", mis vaqueros aún se acuerdan de aquella noche!! Pablo, mi traductor oficial de los Mojinos!! A ver si podemos ir a otro concierto pronto! Y volver a comer crêpes en Paris! Cara-crêpes! Vic, nada más volver de Japón me iniciaste a tu pasión… los pajaritos!! Las orejas de cerdo vinieron mucho más tarde ;-) Me descubriste este mundo y ahora veo los pajaritos con otro ojo (y otra oreja). Tú crees que otro petirrojo nos dará un concierto privado como el de Cazorla??Mamen, no sé ni por dónde empezar… Nunca olvidaré todo lo que has hecho por mí. Recuerdo al principio cuando casi sin conocernos me invitaste a tu cumpleaños junto a toda tu familia!. He disfrutado mucho todos los momentos que hemos pasado juntas estos años (entre las anguilas, el laboratorio, las vacaciones, las fallas, las nocheviejas, los fin des, paseos con bolt, cenas improvisadas...) Creo que he pasado más tiempo contigo que con Richard. Gracias por todo!!! También quiero dar las gracias a una gran cocinera y amiga, llamada Aquagamete, o Pepa, para los íntimos! Me han encantado nuestras comiditas y me ha ayudado mucho tenerte aquí. Además, gracias a ti he podido probar y disfrutar el mejor jamón del mundo! No olvido a los 2 últimos fichados: los vecinos alborayenses Chris y German. Continuaremos disfrutando de nuestras cervecitas y horchatitas después de una partida de volley-playa.Gracias al grupo de nutrición, Miguel, Ana, Silvia, Raquel, Sergio… con mención especial a Guillem por tu ayuda y tu valenciano perfecto (yo tenía complicado el resum en valenciá); y a Nacho, por tu ayuda con la portada y tu paciencia durante el final de mi tesis, ...

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The Gonadoliberin(S)-Gonadotropin(S) Axis in the Eel: Expression and Regulation Under Induced Maturation and Sex Steroid Feedbacks

Aroua¹,

Rousseau²,

Schmitz

et al. 2009

Spawning Migration of the European Eel

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Development of real-time RT-PCR assays for eel gonadotropins and their application to the comparison of in vivo and in vitro effects of sex steroids

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Effect of thermal regime on the expression of key reproductive genes during hormonally-induced vitellogenesis in female European eels

Effect of thermal regime on the expression of key reproductive genes during hormonally-induced vitellogenesis in female European eels

Molecular approaches related to the European eel (Anguilla anguilla) reproductive process

The Gonadoliberin(S)-Gonadotropin(S) Axis in the Eel: Expression and Regulation Under Induced Maturation and Sex Steroid Feedbacks

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