Development of alternative HPLC method for determination of tirofiban in rat serum

Abstract

Tirofiban hydrochloride is a reversible antagonist of fibrinogen binding to the GPIIb/IIIa receptor, used for the treatment of acute coronary syndrome. A novel RP-HPLC method has been developed and validated for the determination of Tirofiban in serum of Wistar rats with and without deep acute venous thrombosis. The chromatographic separation was carried out using a reverse-phase HPLC column Purospher® RP-18e (150 mm  4.6 mm i.d.; 5 μm) coupled with a guard column LiChrosorb® (4 mm  4 mm i.d.; 7 μm) and mobile phase consisting of the mixture of 1-octane sulfonic acid in water (pH 3.0, adjusted with orthophosphoric acid) and acetonitrile, with a ratio of 60 : 40 (v/v) and a flow rate of 1.0 ml/min, at a wavelength of 277 nm. The serum concentrations of Tirofiban in the group of rats with DVT were lower than those in the control group, and it could be explained with the binding of Tirofiban with the GPIIb/IIIa receptors.Keywords: Tirofiban; deep acute venous thrombosis (DVT); HPLC determination; rat serum РАЗВОЈ НА АЛТЕРНАТИВНA HPLC-МЕТОДA ЗА ОПРЕДЕЛУВАЊЕ ТИРОФИБАН ВО СЕРУМОТ НА СТАОРЕЦТирофибан хидрохлорид е реверзибилен антагонист на фибриногенот врзувајќи се за рецепторот GPIIb/IIIa, и се користи за третман на акутен коронарен синдром. Нова RP-HPLC-метода е развиена и валидирана за определување на тирофибанот во серумот на Wistar стаорци со и без длабока акутна венска тромбоза. Хроматографското раздвојување се врши со помош на реверзно фазна HPLC-колона Purospher ® RP-18E (150 mm  4.6 mm; 5 μm) во комбинација со претколона LiChrosorb ® (4 mm  4 mm; 7 μm) и мобилна фаза која се состои од смеса на 1-октанска сулфонска киселина во вода (pH 3.0, се регулира со ортофосфорна киселина) и ацетонитрил во сооднос 60 : 40 (v/v) и проток од 1,0 ml/min, на бранова должина од 277 nm. Серумските концентрации на тирофибанот во групата стаорци со ДВТ беа пониски од оние во контролната група, што би можело да се објасни со врзување на тирофибанот за рецепторите GPIIb/IIIa. Клучни зборови: тирофибан; длабока акутна венска тромбоза (ДВТ); HPLC-определување; серум на стаорец

Novel Copper Oxide-Integrated Carbon Paste Tirofiban Voltammetric Sensor

“…TIR is unofficial in pharmacopeia; moreover, only few chromatographic and spectrometric approaches were reported to monitor TIR residues in bulk, dosage forms, and biological fluids. Chromatographic methods based on HPLC-UV, RP-HPLC, − and liquid chromatographic-mass spectrometry (LC–MS) ,, were found in the literature. The chiral separation chromatographic method utilizing hydroxypropyl-γ-cyclodextrin (HP-γ-CD) as the chiral mobile phase was evaluated for selective separation of TIR enantiomers in samples with UV detection at 226 nm .…”