Development and validation of method for quantitative determination of sildenafil and n-desmethyl sildenafil by HPLC-MS/MS in human blood plasma

Abstract

Цель. Для изучения биоэквивалентности таблетированной формы силденафила (таблетки «Тегрум» 100 мг), производства ООО «НПФ «Микрохим» (г. Рубежное, Украина) 475,30; 483,20; 461,20; 469,20 ВведениеРанее в биоаналитической лаборатории ООО «КДЦ «Фармбиотест» для изучения фармако-кинетики спреевой формы силденафила был разрабо-тан метод количественного определения концентра-ции силденафила в плазме крови человека с помо-щью тандемной высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрическим детекти-рованием (ВЭЖХ-МС/МС) [1]. Особенностью данно-го метода было использование дейтерированного внутреннего стандарта. Этот метод был успешно ва-лидирован и применен в ходе открытого исследова-ния І фазы орального спрея «Тегрум» производства ООО «НПФ «МИКРОХИМ» (код исследования: SilS/PhI-РК), выполненного в 2013 г.Следующим шагом в фармакокинетических исследований этой группы препаратов, к которым была привлечена биоаналитическая лаборатория ООО «КДЦ «Фармбиотест», стала оценка биоэквива-лентности таблетированных форм силденафила -таблетки «Тегрум», производства ООО «НПФ «Мик-рохим» (г. Рубежное, Украина) и таблетки «Виагра», производства Pfizer PGM, Франция, путем сравни-тельного изучения их биодоступности при однократ-ном приеме натощак здоровыми добровольцами, что позволит представить фармакокинетические данные, подтверждающие терапевтическую эквивалентность воспроизведенного и референтного препаратов. 2.Постановка проблемы в общем виде, ак-туальность темы и ее связь с важными научными или практическими вопросами Соответственно, возник вопрос разработки ме-тодики количественного определения не только сил-денафила, но и его фармакологически активного ме-таболита -N-десметил силденафила в плазме крови человека. Поскольку к этому моменту имелась разра-ботанная и валидированная в нашей лаборатории методика количественного определения силденафи-ла, данную методику было необходимо доработать для одновременного определения силденафила и N-десметил силденафила.