Determination of thalidomide concentration in human plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry

Abstract

A rapid, sensitive and specific analytical method based on high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) has been developed for the determination of thalidomide concentration in human plasma. The analyte and internal standard were extracted by liquid-liquid extraction with ether-dichloromethane (3:2, v/v) and separated on a TC-C18 column using methanol-10 mM ammonium acetate-formic acid (60:40:0.04, v/v/v) as the mobile phase at a flow rate of 0.9 ml/min. The detection was performed using an API 4000 triple quadrupole mass spectrometer in the positive electrospray ionization (ESI) mode and completed within 3.0 min. The multiple reaction monitoring (MRM) transitions were m/z 259.1→84.0 for the analyte and m/z 195.9→138.9 for temozolomide. The calibration curve exhibited a linear dynamic range of 2–1500 ng/ml (r>0.9991). The intra-and inter-day precisions (as relative standard deviation; RSD) were 6.8–13.5% and 4.3–5.0% respectively and the accuracy (as relative error; RE) was 2.0–3.5%. The recoveries and matrix effects were satisfactory in all the biological matrices examined. This method was successfully used in a pharmacokinetic study of thalidomide in healthy male volunteers receiving an oral administration of a 200-mg dose.

Thalidomide promotes degradation of SALL4, a transcription factor implicated in Duane Radial Ray syndrome

“…Whether the phenotypes in zebrafish and chicken are a result of species-specific downstream pathways or the high dose (400 µM) and direct application of thalidomide to the limb buds ( Ito et al, 2010 ), which both could result in off-target effects, remains to be shown. The plasma concentration of thalidomide in humans is, however, unlikely to exceed 10 µM ( Bai et al, 2013 ; Dahut et al, 2009 ), a concentration that results in effective degradation of SALL4, but is 40 times below the dose found to be teratogenic in chicken and zebrafish embryos. While we do not observe degradation of mmSALL4 or drSALL4 upon high-dose exposure, we cannot rule out that such high doses will induce degradation of other ZnF targets in zebrafish or chicken, which could potentially result in the observed phenotypes.…”

Quantificação de talidomida em plasma e em dispositivo de plasma seco por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrometria de massas combinado com extração em fase sólida para monitoramento terapêutico

“…Poucos métodos de LC-MS/MS validados foram reportados para a quantificação de talidomida em fluidos biológicos (Bai et al, 2013;Li et al, 2021;Roche et al, 2012;Shu et al, 2016;Teo et al, 2002) e apenas três métodos reportaram a quantificação de talidomida no plasma por LC-MS/MS, principalmente usando extração líquido-líquido, que pode apresentar algumas limitações, incluindo baixa recuperação e necessidade de maiores volume de solventes e maior quantidade de amostras (Kole et al, 2011). Além disso, nenhum dos métodos reportados empregou a técnica de UHPLC, nem uma abordagem alternativa de obtenção de amostra.…”

“…Alguns métodos LC-MS/MS são reportados para a quantificação de THD em fluidos biológicos, incluindo plasma, soro e sêmen, mas nenhum em DS (Bai et al, 2013;Li et al, 2021;Roche et al, 2012;Shu et al, 2016;Teo et al, 2002). Para a preparação da amostra 100 μL de WP e 200 μL de DPS foram necessários no presente método.…”

“…O ajuste de pH ou evaporação durante a preparação da amostra não foi necessário. Por outro lado, os métodos reportados anteriormente aplicaram extração líquido-líquido (Bai et al, 2013;Li et al, 2021;Roche et al, 2012) ou extração em fase sólida convencional (Shu et al, 2016;Teo et al , 2002), como pré-tratamento da amostra. Ambas as técnicas de preparação de amostras normalmente requerem grandes quantidades de solvente orgânico e são demoradas, o que limita a rotina do laboratório quando um grande número de amostras é processado (Kole et al, 2011).…”

“…Ambas as técnicas de preparação de amostras normalmente requerem grandes quantidades de solvente orgânico e são demoradas, o que limita a rotina do laboratório quando um grande número de amostras é processado (Kole et al, 2011). A faixa de medição analítica de 50 a 2000 ng/mL observada no presente estudo foi semelhante à reportada em métodos anteriores (Bai et al, 2013;Li et al, 2021;Shu et al, 2016). Além disso, essa faixa é compatível com as faixas clínicas reportadas na literatura, permitindo identificar pacientes não aderentes e pacientes com provável risco de eventos tóxicos (Kakimoto et al, 2002;Yuki et al, 2021).…”