Determination of ionisation constants of organic bases in aqueous methanol solutions using capillary electrophoresis

O desafio de analisar solutos básicos por cromatografia líquida em modo reverso: algumas alternativas para melhorar as separações

“…65,66 O pH da fase móvel após a adição de modificador orgânico varia em função do tipo de tampão (fosfato, carbonato, borato, tris, citrato etc. ), do tipo de modificador orgânico e da percentagem de modificador orgânico.…”

“…[62][63][64] Por sua vez, o aumento da percentagem de modificador orgânico na fase móvel reduz o pKa dos solutos (Tabela 1S, material suplementar). 65,66 Desta forma, quando se troca tampão fosfato por tampão amônia, para tornar o método compatível com LC-MS/MS, a fase móvel preparada com tampão amônia possui menor w Um comportamento ideal semelhante ao da Figura 1a dificilmente é observado para bases com pKa > 7, devido a interações secundárias dos silanóis residuais com os solutos básicos. Por sua vez, os solutos ácidos não realizam interações secundárias com os silanóis residuais e um comportamento semelhante ao descrito na Figura 1b é comumente observado.…”

“…Para os solutos básicos, a região B e o ponto em que a retenção dos solutos se torna constante foram observados em valores de pH cerca de uma unidade a menos que o pKa dos solutos (lidocaína ~7,9; nortriptilina ~10,2; doxepina e imipramina ~ 9,5). 65,66 Portanto, para maximizar a retenção dos solutos básicos não é necessário realizar a análise em valores extremos de pH, por exemplo, a nortriptilina tem pKa ~10,2, mas a retenção deste soluto se torna constante em pH 9, porque o w s pH da fase móvel é maior que o pH da fase aquosa e o pKa dos solutos na fase móvel ( w s pKa) é menor que o pKa em água. Walter et al 67 também demonstraram como o pH da fase móvel pode ser utilizado para manipular a seletividade, sendo que em pH ≤ 6 a separação da nortriptilina e da imipramina é pobre, enquanto a separação entre estes solutos é fácil em pH > 6.…”

Determination of Dissociation Constants of Strychnos Alkaloids from Strychnos nux-vomica L. by Capillary Electrophoresis

“…Intermediate mobility is a function of the dissociation equilibrium of the base [16,34,35]. The electrophoretic mobility of the base is expressed by [36] …”

“…The dissociation constant can also be used to theoretically predict the behavior of solutes in HPLC [6,7] and electromigration methods [8,9]. Capillary electrophoresis (CE) [10][11][12][13][14][15][16] has been introduced as a new micro-analytical technique for convenient and precise aqueous dissociation constant determination because of its advantages over other commonly used methods such as potentiometry [17][18][19], liquid chromatography (LC) [20][21][22], spectrophotometry [23][24][25][26], and nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR) [27,28]. CE relies on the principle that the solute exhibits an electrophoretic mobility continuum versus pH, which allows calculations independent of solute purity, since impurities can be effectively separated from the solutes of interest.…”