Determination of amino acids using o-phthalaldehyde-2-mercaptoethanol derivatization effect of reaction conditions

Dorresteijn, R. C.; Berwald, L.G.; Zomer, G.; Gooijer, C.D. de; Wieten, G.; Beuvery, E. C.

doi:10.1016/0021-9673(95)00927-2

Cited by 71 publications

(39 citation statements)

References 13 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Effect of sample solvent Dorresteijn et al (1996) reported that the OPA derivatisation is a very complex reaction with three possible products: hydrolysis of OPA, stabilisation of OPA by 2-mercaptoethanol to yield an ortho-phthalaldehyde-2-mercaptoethanol complex and reaction of OPA with 2-mercaptoethanol and amino sugars yielding the isoindole- SD standard deviation, LOQ limit of quantification, defined as a signal ten times higher than blank. Limit of detection (LOD) defined as a signal three times higher than blank derivate needed for amino sugar analysis.…”

Section: Validation Parametersmentioning

confidence: 99%

See 1 more Smart Citation

Optimisation of amino sugar quantification by HPLC in soil and plant hydrolysates

et al. 2011

View full text Add to dashboard Cite

Amino sugars are increasingly used as indicators for the accumulation of microbial residues in soil and plant material. A reverse-phase high-performance liquid chromatography method was improved for the simultaneous determination of muramic acid, mannosamine, glucosamine and galactosamine in soil and plant hydrolysates via orthophthaldialdehyde (OPA) pre-column derivatisation and fluorescence detection. The retention time was reduced, and the separation of muramic acid and mannosamine was optimised by modifying the mobile phase. The effects of excitation wavelength, OPA reaction time, tetrahydrofuran concentration and pH value of the mobile phase on the amino sugar separation were tested. Quantification limits were in the range of 0.13 to 0.90 μg ml −1 . No interferences exist from amino acids or other primary amines, occurring in soil and plant hydrolysates.

show abstract

Section: Validation Parametersmentioning

confidence: 99%

“…The effect of the reaction time is discussed above. With regard to method accuracy, Dorresteijn et al (1996) suggested Milli-Q water to be best suited. Appuhn et al (2004) also used water as sample solvent in their study.…”

Section: Validation Parametersmentioning

confidence: 99%

Optimisation of amino sugar quantification by HPLC in soil and plant hydrolysates

et al. 2011

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…A formação de aminas primárias foi usada como indicador da reação de desacetilação, 40 usando um método desenvolvido em nosso laboratório. À mistura reacional era adicionada 1,0 mL de uma solução contendo 0,005% de OPA (o-ftalaldeído -Invitrogen Life Technologies), 0,1% de etanol absoluto, 7 nmol L -1 de β-mercaptoetanol e 10 mL de tampão Na 2 HCO 3 50 nmol L -1 , pH 10,5.…”

Section: Desacetilação Da Quitina De Camarãounclassified

Purificação e caracterização da quitinase de uva (Vitis vinífera L. cv Red Globe) para a produção de quitosana a partir de quitina de camarão

Gomes¹,

Oliveira²,

Silva³

et al. 2010

Quím. Nova

View full text Add to dashboard Cite

Chitinase is produced by a wide variety of plants as a defense against peste attacks. In this study, grape chitinases were purified 16 times by fractionation in 80% ammonium sulfate followed by dialysis and filtration. Purified chitinases exhibited enzymatic activity toward chitin azure. The yield of purified chitinase was 229 mg/L with chitinase activity of 563 U/g. Chitinases had molecular masses of 24 and 30 kDa, as evaluated by SDS-PAGE 12.5%. Two pH optima were determined 3.0 and 6.0. The optimal temperature was 42 o C. Pre hydrolysis of crystalline shrimp chitin by chitinases caused in an increase in the deacetylation ratio triggered by chitin deacetylase producing chitooligosaccharides with DA (degree acetylation) of 58.8%.Keywords: grape chitinases; purification and characterization; chitin deacetylation. INTRODUÇÃOOs monossacarídeos formam uma grande variedade de estruturas poliméricas (oligossacarídeos e polissacarídeos), diferenciadas pelo tipo de monômero constituinte e pela forma como eles estão ligados ao longo do polímero, que desempenham funções como componentes estruturais, compostos de reserva e de reconhecimento e sinalização celular, por exemplo. As ligações glicosídicas presentes nestes polímeros podem ser clivadas por um grande número de enzimas pertencentes à superfamília de glicosil-hidrolases, composta por 115 famílias de hidrolases que atuam tanto sobre as ligações glicosídicas que unem monossacarídeos, quanto sobre as que unem carboidratos a outras biomoléculas. 1,2As quitinases (E.C. 3.2.1.14) são endoglicosil-hidrolases que clivam de forma específica as ligações glicosídicas da quitina, um homopolissacarídeo linear formado por unidades de 2-acetamida-2-desoxi-D-glicose (N-acetil-D-glucosamina) unidas por ligações do tipo β-[1-4], encontradas principalmente nas carapaças de crustáceos, cutículas de insetos e na parede celular de fungos, sendo, depois da celulose, o biopolímero mais abundante na natureza.3 As quitinases estão distribuídas por entre duas númerosas famílias de glicosil-hidrolases (famílias 18 e 19), que diferem em relação às suas estruturas primárias e terciárias 1 e ao mecanismo de catálise. 4As quitinases da família 18 formam produtos β-anoméricos, através de um mecanismo de retenção, enquanto as enzimas da família 19 formam produtos α-anoméricos, por um mecanismo de inversão. 5,6As quitinases (Chase) de planta são independentemente classificadas, com base na presença de um domínio de ligação à quitina e na homologia de suas sequências de aminoácidos, em sete classes, nomeadas de I a VII.7 A maioria destas quitinases pertence à família 19, (classes I, II IV, VI e VII), com um pequeno número pertencente à família 18 (classes III e V), junto como as quitinases de fungos, animais e bactérias. 8 As quitinases são expressas constitutivamente em níveis relativamente baixos em todos os órgãos e tecidos das plantas, compartimentalizadas no vacúolo e apoplasto. 9 As quitinases de plantas fazem parte do grupo de proteínas denominadas PR (proteínas relacionadas à patogenesis), ca...

show abstract

“…[27,75] O o-ftalaldeído (OPA) é o reagente de derivatização mais empregado na análise de aminoglicosídeos, por apresentar várias vantagens: não possui fluorescência intrínseca, o que permite que seja empregado tanto nas reações de pré quanto de pós-coluna sem a necessidade de extração dos derivados formados; a reação de derivatização é razoavelmente rápida à temperatura ambiente; não é perigoso, é de baixo custo e é estável em solução aquosa em pH < 11.5. [51,62,86] O método proposto por SWEENEY e COLEMAN [75] para determinação do teor de apramicina em amostras biológicas emprega fase reversa utilizando uma coluna de recheio apolar (C18), fase móvel predominantemente polar (60% de água e 2 mL de ác. acético) e um pareador iônico, o octanossulfonato de sódio; emprega também derivatização pré-coluna com OPA e a detecção é feita por fluorescência com comprimento de onda de excitação de 289 nm e comprimento de onda de emissão de 390 nm.…”

Section: Estabelecimento Das Condições Cromatográficas Preliminaresunclassified

“…Optou-se, então, por trabalhar com um excesso de OPA de 5 vezes mais a quantidade necessária para reagir com a quantidade de apramicina contida na amostra a ser derivatizada. Entretanto, considerando-se que os derivados isoindóis se degradam mais rapidamente quando na presença de um excesso de OPA conforme consultado nos trabalhos de JACOBS [90] et al, STOBAUGH [91] et al e DORRESTEIJN [86] et al, havia ainda que se considerar se a concentração de OPA que estava sendo utilizada era apropriada.…”

Section: Definição Da Concentração De Opa Em Relação à Concentração Dunclassified

Teor de apramicina: desenvolvimento e validação de método empregando cromatografia líquida de alta eficiência comparativamente a um doseamento microbiológico

Barbosa¹,

Pinto²

View full text Add to dashboard Cite

Determination of amino acids using o-phthalaldehyde-2-mercaptoethanol derivatization effect of reaction conditions

Cited by 71 publications

References 13 publications

Optimisation of amino sugar quantification by HPLC in soil and plant hydrolysates

Optimisation of amino sugar quantification by HPLC in soil and plant hydrolysates

Purificação e caracterização da quitinase de uva (Vitis vinífera L. cv Red Globe) para a produção de quitosana a partir de quitina de camarão

Teor de apramicina: desenvolvimento e validação de método empregando cromatografia líquida de alta eficiência comparativamente a um doseamento microbiológico

Contact Info

Product

Resources

About