Detection of porcine DNA in gelatine and gelatine-containing processed food products—Halal/Kosher authentication

Demirhan, Yasemin; Ulca, Pelin; Şenyuva, Hamide Z.

doi:10.1016/j.meatsci.2011.10.014

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“…Such methods are infrared spectroscopy coupled with chemometrics of Principal Component Analysis (PCA) for differentiation of porcine and bovine gelatins (Hashim et al, 2010) and those with fish gelatine (Cebi et al, 2016), high performance liquid chromatography coupled with fluorescence detector and chemometrics of PCA (Nemati et al, 2004;Raraswati et al, 2013) and with some types of mass-spectrometer detectors (Zhang et al, 2009;Yilmaz et al, 2013), electrophoretic analysis (Hermanto et al, 2013), Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) combined with PCA (Azira et al, 2014), Enzyme-Linked Immuno-Sorbent Assay (ELISA) (Doi et al, 2009;Venien and Levieux, 2005), conventional method using calcium phosphate precipitation test (Hidaka and Liu, 2003) and Polymerase Chain Reaction (PCR) (Demirhan et al, 2012;Cai et al, 2012). The PCR is an ideal technique to be used for fat and sensitive detection of porcine DNA in gelatin due to the higher stability of DNA compared to protein (Aida et al, 2007).…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Real-Time Polymerase Chain Reaction for Halal Authentication of Gelatin in Soft Candy

Sepminarti¹,

Sudjadi²,

Wardani³

et al. 2015

Asian J. of Biochemistry

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Currently, along with the development of science and technology, the diversification of food products occurs in the market. Food products can contain non-halal components like porcine gelatine. One of food suspected to use gelatine is soft candy. Gelatin can be made from pork or beef or other animal. The presence of porcine gelatine in any food products is not allowed for Moslem community, therefore an analytical method offering reliable results must be developed. This study is intended to use Real-Time Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for analysis of porcine gelatine in soft candy. Isolation of DNA was performed with mitochondrial DNA Isolation Kit K280-50 (Bio-Vision). The DNA was analyzed by RT-PCR using primer D-Loop 318. Analysis for the primer specificity was performed on fresh tissue (pig, cows, chickens, goats and rats) and gelatin sources (beef, pigs and catfish). Primer D-loop318 can amplify porcine DNA at the optimum temperature 61.4°C. Repeatability test demonstrated amplification of all positive response samples containing porcine DNA in serial dilution of 10000-1 pg). The Coefficient of Variation (CV) is 6.32%. The repeatability test was also performed on soft candy 100% having CV of 1.06%. The commercial soft candy samples evaluated do not contain porcine DNA.

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Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Real-Time Polymerase Chain Reaction for Halal Authentication of Gelatin in Soft Candy

Sepminarti¹,

Sudjadi²,

Wardani³

et al. 2015

Asian J. of Biochemistry

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“…Oleh karena itu, perlu diupayakan metode yang akurat untuk identifikasi gelatin sapi dan gelatin babi. Metode identifikasi gelatin sapi dan gelatin babi telah banyak dilakukan dan dikembangkan di antaranya dengan teknik presipitasi kimia [8], FTIR [9], LCMS [10], ELISA [11], dan analisis berbasis DNA dengan Real Time PCR [12,13].…”

Section: Pendahuluanunclassified

“…Selain itu, metode ini dapat mendeteksi campuran gelatin babi dan gelatin sapi dengan level kontaminasi 1% [12,13]. Dengan metode ini, kita dapat mengamati secara langsung hasil amplifikasi atau perbanyakan DNA fragmen.…”

Section: Pendahuluanunclassified

Perbandingan Metode SYBR Green dan Hydrolysis Probe dalam Analisis DNA Gelatin Sapi dan Gelatin Babi Menggunakan Real Time Polymerase Chain Reaction

Zilhadia¹,

Izzah²,

Betha³

2017

J.Sains.Far.Klin

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Gelatin has a large application in the food, pharmaceutical and cosmetics industries. Gelatin is mostly derived from the skin or bone of porcine and bovine. Porcine gelatin is forbidden for Muslim and Jews. For this reason, analytical methods to detect gelatin are needed to make sure the source of gelatin. One of the analytical techniques that can differentiate bovine and porcine gelatin is Real Time Polymerase Chain Reaction (PCR). There are two popular methods of fluorescence dye, namely SYBR green and hydrolysis probe. This study was conducted to compare SYBR green and hydrolysis probe method in analyzing porcine and bovine gelatin DNA using Real Time PCR. The DNA was isolated by commercial kit. The obtained porcine and bovine gelatin DNA were 19.38 ng/μl and 13.63 ng/μl with purity were 1,566 and 1,573, respectively. Then, isolated DNA was analyzed by SYBR green and hydrolysis methods. SYBR green methods was done by annealing temperature of 65 o C for bovine primer and 60 o C for porcine primer. Therefore, hydrolysis probe methods were analyzed by annealing temperature of 60 o C for both porcine primer and bovine primer. The result showed that the hydrolysis probe was higher specificity to identify of porcine and bovine gelatin DNA than SYBR green method. ABSTRAK:Pemanfaatan gelatin secara luas menimbulkan kontroversi dan kekhawatiran bagi masyarakat muslim karena pada umumnya gelatin terbuat dari kulit babi dan sapi. Salah satu teknik analisis yang dapat membedakan gelatin sapi dan gelatin babi adalah Real Time Polymerase Chain Reaction (PCR). Real Time PCR merupakan metode analisis berbasis DNA yang handal, efektif, dan terpecaya. Dalam analisis kualitatif dan kuantitatif, Real Time PCR membutuhkan pewarna fluoresens. Pewarna fluoresens yang umum digunakan adalah SYBR green dan hydrolysis probe. Telah dilakukan perbandingan antara metode SYBR green dan hydrolysis probe dalam analisis DNA gelatin menggunakan Real Time PCR. DNA pada gelatin diisolasi menggunakan kit komersial. Isolat DNA gelatin sapi dan DNA gelatin babi didapatkan sebanyak 19,38 ng/μl dan 13,63 ng/μl dengan kemurnian 1,566 dan 1,573. Isolat DNA yang dianalisis dengan metode SYBR green menggunakan suhu annealing 65 o C untuk primer sapi dan suhu annealing 60 o C untuk primer babi. Isolat DNA yang dianalisis dengan metode hydrolysis probe menggunakan suhu annealing 60 o C untuk primer babi dan primer sapi. Hasil analisis dari kedua metode menunjukkan bahwa metode hydrolysis probe lebih spesifik dalam mengidentifikasi DNA pada gelatin dibandingkan menggunakan metode SYBR green. Keywords PENDAHULUANGelatin adalah polipeptida larut air hasil hidrolisis parsial kolagen dari kulit, tulang dan tulang rawan hewan [1]. Gelatin memiliki sifat yang unik dan berfungsi sebagai zat pembentuk gel, zat pengental, zat pembentuk film, zat pengemulsi, dan zat pensuspensi [2]. Oleh karena itu gelatin digunakan secara luas dalam berbagai sektor industri yaitu industri farmasi, makanan, kosmetik, produk kedokteran dan fotografi. Dalam industri makanan,...

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“…Es cierto que las carnes con marcas DOP/IGP ofrecen una mayor protección del nombre y la importancia de la certificación de terceros que otras carnes, lo cual es visto como una forma de reforzar la credibilidad del promás de la calidad tecnológica de la carne, determinada por la medida del pH, de la capacidad de retención de agua, actividad del agua, textura, color o hasta de análisis sensorial, es posible hoy en día utilizar otras técnicas: la inmunodifusión, inmunoelectroforesis o ensayos de inmunoabsorción enzimática (ELISAs) bien como métodos basados en la caracterización del DNA (PCR) y análisis de isótopos estables en esquemas de rastreabilidad y verificación de la autenticidad de carne y productos cárnicos (Ayaz et al, 2006;Ballin et al, 2009;Ballin, 2010;Ali et al, 2014), la discriminación de carnes por infrarrojo en campo cercano (NIRS) (Alomar et al, 2003), la autenticación de productos halal/kocher (Demirhan et al, 2012), la discriminación entre carnes frescas y descongeladas (Ballin y Lametsch, 2008) o bien la autenticación geográfica del origen de la carne (Franke, et al, 2008;Dalvit et al, 2008).…”

Section: Una Ficciónunclassified

Marcas de calidad de carne de ovino y caprino ¿Un hecho o una ficción?

Teixeira

2016

ARCH ZOOTEC

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RESUMENSe hace un análisis crítico de la importancia de las marcas de calidad de carne de ovino y caprino (DOP e IGP) en Portugal y España como un elemento diferenciador en un mercado globalizado, una forma de dinamizar la producción en áreas geográficas, algunas de ellas social y económicamente deprimidas, y como una manera de preservar los patrimonios genético y cultural. Se discute la necesidad de encontrar estrategias basadas en métodos analíticos que comprueben la individualidad, especificidad y garanticen la autenticidad de productos DOP e IGP, como un tipo de protección adicional basada en métodos objetivos comprobados científicamente.Quality labels of sheep and goats meat. A fact or a fiction? SUMMARYA critical analysis of the importance of quality brands (PDO and PGI) of sheep and goat meat in Portugal and Spain as an element differentiator in a globalize market was made as a way to support the animal production, revitalize socially and economically depressed areas and to preserve a genetic and cultural patrimony. The need to find strategies based on analytical methods to check the individuality, the specificity was discussed as well to ensure the authenticity of products, as a kind of an extra protection based on scientifically checked methods. INTRODUCCIÓNLa globalización ha dado lugar a un aumento de la competitividad, a la cual la producción de carne y de productos cárnicos no es una excepción, por ello se requiere un aumento de la eficiencia en la forma de producción, transformación y comercialización. Por otro lado, la globalización conlleva la necesidad de una producción en escala, lo que limita la accesibilidad a los mercados de los pequeños y medianos productores, que son excluidos de los principales circuitos comerciales. En España y Portugal, el camino iniciado ya hace algún tiempo, con la apuesta del sector cárnico a los sistemas de calidad diferenciada, ha propiciado un incremento de marcas de calidad con denominación de origen protegida, indicación geográfica protegida o de especialidad tradicional garantizad (DOP, IGP y ETG) registradas por la Unión Europea. En el caso particular de los ovinos y caprinos, en la península Ibérica la gran mayoría de las marcas están asociadas a razas autóctonas y totalizan, en conjunto, 15 marcas DOP e IGP de ovinos y 5 de caprinos (figuras 1, 2 y 3). Estas marcas de calidad constituyen hoy un elemento diferenciador en el mercado, dinamizador de la producción con revitalización de áreas o regiones geográficas, que proporciona una mayor confianza al consumidor y ayuda a conquistar nuevos mercados, más allá de ser un apoyo para preservar un patrimonio cultural y genético importante. ¿DOP E IGP, UN HECHO O UNA FICCIÓN?UN HECHO: -Las marcas DOP e IGP de carne de ovino y caprino

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Detection of porcine DNA in gelatine and gelatine-containing processed food products—Halal/Kosher authentication

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Real-Time Polymerase Chain Reaction for Halal Authentication of Gelatin in Soft Candy

Real-Time Polymerase Chain Reaction for Halal Authentication of Gelatin in Soft Candy

Perbandingan Metode SYBR Green dan Hydrolysis Probe dalam Analisis DNA Gelatin Sapi dan Gelatin Babi Menggunakan Real Time Polymerase Chain Reaction

Marcas de calidad de carne de ovino y caprino ¿Un hecho o una ficción?

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