Detection of Autoantibodies to Thyroid Peroxidase in Autoimmune Thyroid Diseases by Micro-ELISA and Immunoblotting*

Abstract

Serum autoantibodies to thyroid peroxidase (TPO) in patients with thyroid autoimmune diseases were studied by micro-ELISA and immunoblotting. Twenty-four patients, 15 with Graves' disease and 9 with Hashimoto's thyroiditis, whose serum titers were greater than 3200 on the microsomal hemagglutination test (except for 1 patient with a titer of 800) had autoantibodies to TPO. Both immunoglobulin G and M classes of autoantibodies were detected, with the former being more prominent. When TPO and thyroid microsomes were used as a target in a competitive binding inhibition test, the results suggested that TPO was a major thyroid microsomal antigen. On the other hand, immunoblotting analysis showed 3-4 bands in the 45-60K region stained by patients' sera in addition to human TPO with mol wt of 100K and 107K; only the latter 2 bands stained with antiporcine TPO antibody. In the majority of sera, TPO bands were clearer than others, although some sera showed the clearest band with a mol wt of 55K. These results indicate that patients with autoimmune thyroid disease often have autoantibodies to TPO that can be detected by micro-ELISA and immunoblotting, and that TPO is a major component of the thyroid microsomal antigen.

cDNA‐directed expression of human thyroid peroxidase

“…Human TPO was purified as in [8] and rabbit antiporcine TPO antibody has been produced [11]. Phosphataseconjugated goat anti-rabbit IgG antibody was purchased from KPL Laboratories (Gaithersburg, MD).…”

“…The prosthetic group is probably protoporphyrin IX [1,8,9]. Several reports have established that TPO is a major component of the thyroid microsomal antigen, one of the autoimmune antigens against which patients having thyroid autoimmune disorders develop antibodies [4,[10][11][12].…”

Thyroid peroxidase as an antigen in autoimmune thyroiditis

“…SubCorrespondence: A. P. Weetman, Department of Medicine, University of Cambridge Clinical School, Addenbrooke's Hospital, Level 5, Cambridge CB2 2QQ, UK. sequent studies have verified that TPO accounts for virtually all of the antigenic determinants recognized by microsomal antibodies in autoimmune thyroiditis (Kotani et al, 1986;Mariotti et al, 1987).…”

New bioaffine sorbents for selective elimination of autoantibodies against human thyroperoxidase in autoimmune thyroid diseases

“…Установлено, что данные заболевания развиваются в результате реакции иммунной системы на собственные белки щитовидной железы (тиреопероксидазу (ТПО), тиреоглобулин и рецептор тиреотропного гормона [1]), которая характеризуется появлением высоких концентраций специфических аутоантител к указанным тиреоидным аутоантигенам в сыворотке крови больных. Так, аутоантитела (ААТ) к ТПО присутствуют в сыворотке у большинства пациентов с болезнью Грейвса, тиреоидитом Хашимото, послеродовым тиреоидитом и являются диагностическим маркером аутоиммунных заболеваний щитовидной железы [2][3][4][5][6].ТПО человека является мембраносвязанным гликозилированным гемопротеином, который играет ключевую роль в синтезе тиреоидных гормонов, катализируя йодирование тирозильных остатков тиреоглобулина и их последующую конденсацию с образованием Т 3 и Т 4 . При аутокринных патологиях щитовидной железы аутоантитела к ТПО индуцируют комплементзависимую цитотоксичность и вызывают цитотоксические изменения в структурных элементах фолликулов щитовидной железы, играя важную роль в патогенезе заболеваний данного органа.…”

“…Установлено, что данные заболевания развиваются в результате реакции иммунной системы на собственные белки щитовидной железы (тиреопероксидазу (ТПО), тиреоглобулин и рецептор тиреотропного гормона [1]), которая характеризуется появлением высоких концентраций специфических аутоантител к указанным тиреоидным аутоантигенам в сыворотке крови больных. Так, аутоантитела (ААТ) к ТПО присутствуют в сыворотке у большинства пациентов с болезнью Грейвса, тиреоидитом Хашимото, послеродовым тиреоидитом и являются диагностическим маркером аутоиммунных заболеваний щитовидной железы [2][3][4][5][6].…”