Desenvolvimento de um dispositivo de baixo custo para medidas por quimiluminescência

Borges, Eduardo P.; Fernandes, Elizabeth Nogueira; Rocha, Fábio R.P.; Reis, Boaventura F.

doi:10.1590/s0100-40422002000700021

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“…The equipment set up comprised a IPC-8 Ismatect peristaltic pump equipped with tygon pumping tubes, a homemade computer-controlled sliding-bar injector, 14 a 71608 silicon photodiode (Oriel Instruments), a homemade laminar flow cell (78 µL inner volume) machined in acrylic as described elsewhere, 15 two columns (15 mm long and 5 mm i.d.) machined in acrylic, one to pack the ion exchange resin (AG1-X8) and the other for the glass beads.…”

Section: Apparatusmentioning

confidence: 99%

An enzymatic flow-injection procedure with chemiluminescence detection for on-site determination of L-alanine in synthesis process

Borges¹,

Reis²

2005

J. Braz. Chem. Soc.

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Neste trabalho é descrito um procedimento automático em fluxo, para a determinação de L-alanina em meio de síntese. O método é baseado na oxidação do aminoácido pela L-aminoacido oxidise, seguida da detecção do H 2 O 2 formado, pela reação de quimiluminescência com o luminol. Para condicionamento da amostra, como diluição e ajuste do pH, foi utilizada a estratégia da reamostragem. Pelo procedimento foi possível a determinação de L-alanina na faixa de 0,5 a 25,0 mmol L -1 , com um limite de detecção de 0,08 mmol L -1 e um coeficiente de variação menor que 4% (n = 10). Outras características vantajosas foram uma freqüência analítica de 44 determinações por hora e um baixo consumo de reagente: 0,2 mg de luminol e 16,4 mg de hexacinoferrato(III) por determinação.In this work an automatic flow procedure for L-alanine determination in the synthesis medium without a prior sample treatment is described. The method was based on oxidation of L-alanine by L-amino acid oxidize followed by the reaction of the H 2 O 2 with luminol and chemiluminescence detection. In order to overcome the severe alkaline condition of the synthesis medium, a zone sampling strategy was employed for automatic sample dilution and pH adjustment. The procedure allows L-alanine determination in the range of 0.5 to 25.0 mmol L -1 , a limit of detection of 0.08 mmol L -1 and a variation coefficient lower than 4% (n = 10). Other advantageous feature such as a sampling throughput of 44 determination per hour and low reagent consumption, 0.2 mg luminol and 16.4 mg hexacinoferrate(III) per determination, respectively, were also achieved.

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Section: Apparatusmentioning

confidence: 99%

An enzymatic flow-injection procedure with chemiluminescence detection for on-site determination of L-alanine in synthesis process

Borges¹,

Reis²

2005

J. Braz. Chem. Soc.

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“…Embora pudesse ser alcançada sensibilidade superior empregando uma fotomultiplicadora, o desempenho desse detector de menor custo é bastante satisfatório. Alternativamente, fotodetectores de custo relativamente baixo poderiam ser empregados para a medida dos sinais 16 , permitindo também a introdução de conceitos relacionados à instrumentação e eletrônica. Na Tabela 1, são apresentados resultados obtidos variando-se o comprimento do tubo de polietileno empregado na construção da cela de medida.…”

Section: Medida De Quimiluminescênciaunclassified

Um experimento de análise em fluxo envolvendo reações enzimáticas e quimiluminescência

Leite¹,

Fatibello‐Filho²,

Rocha³

2004

Quím. Nova

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Recebido em 7/3/03; aceito em 13/8/03A FLOW ANALYSIS EXPERIMENT INVOLVING ENZYMATIC REACTIONS AND CHEMILUMINESCENCE. An experiment is proposed to introduce some fundamentals of flow analysis, chemiluminescence and kinetic monitoring of enzymatic reactions in undergraduate courses. Chemiluminescence detection is performed with a simple spectrophotometer equipped with a lab-made spiral flow cell constructed from a polyethylene tube. The hydrogen peroxide produced by the glucose oxidation in the presence of glucose oxidase is continuously monitored by the reaction with luminol in alkaline media in a flow injection system. The exercise allows also the discussion of important analytical features and the comparison with different optical methods of analysis.Keywords: chemiluminescence; flow analysis; enzymatic reactions. INTRODUÇÃOO desenvolvimento da Química e os trabalhos de interface com áreas correlatas têm gerado grandes desafios para o ensino desta ciên-cia. Um deles é a necessidade de incluir uma quantidade cada vez maior de conceitos, técnicas e informações importantes, sem que haja aumento do tempo dedicado às diferentes disciplinas. Uma alternativa para este problema é a proposição de experimentos que associem diferentes informações, permitindo explorar melhor o tempo disponível e, ao mesmo tempo, reduzir gastos. Essa estratégia também permite demonstrar que a compartimentalização da Química em diferentes áreas é artificial 1 , visto que a interpretação dos fenômenos com que o aluno se depara no dia-a-dia requer uma abordagem diferente, que utilize os conceitos químicos de maneira unificada e associada para seu entendimento. Os diferentes conceitos e técnicas introduzidos nas disciplinas de Química Analítica, por exemplo, são indispensáveis para a obtenção de informações relacionadas às outras disciplinas.Neste contexto, é proposto um experimento para alunos de graduação em Química e áreas correlatas, que permite introduzir conceitos relacionados à análise em fluxo, quimiluminescência, reações enzimáticas e cinética química. A reação de oxidação da glicose na presença de glicose oxidase (GOD) foi estudada através do monitoramento da quimiluminescência da oxidação do luminol pelo peróxido de hidrogênio produzido. Uma cela em espiral construída com tubo de polietileno e adaptada a um espectrofotômetro simples permite efetuar medidas por quimiluminescência com equipamentos usuais em laboratórios de ensino. QUIMILUMINESCÊNCIALuminescência é um termo empregado para descrever a emissão de radiação quando uma molécula ou átomo no estado excitado decai para o seu estado fundamental 2 . Os vários tipos de luminescência são caracterizados em função da fonte de energia empregada para se obter o estado excitado. Na quimiluminescência, a energia de excitação é proporcionada por uma reação química, sendo a emissão de radiação observada geralmente nas regiões do visível ou infravermelho próximo 3,4 . Esse processo pode ser simplificadamente representado pela Equação 1, onde A e B representam os reagentes, AB* o intermediár...

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“…The light intensity is usually measured by a photomultiplier tube (PMT), 13 but simpler and cheaper detectors like a photodiode can be used as well. 18,19 The use of a photodiode detector and immobilized enzymes in flow systems present some relevant advantages such as simplicity, reliability, low-cost and lower reagent consumption. 18,20 Multicommutation is a powerful alternative to increase the versatility of flow-based procedures, in which discrete commuting devices are employed for solution handling.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

A multicommuted flow procedure for the determination of total and free cholesterol in eggs and human blood serum by chemiluminescence

Leite¹,

Vieira²,

Fatibello‐Filho³

et al. 2010

J. Braz. Chem. Soc.

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Um sistema de análises em fluxo com multicomutação com detecção por quimiluminescência foi desenvolvido para a determinação de colesterol livre e total sem alterações no módulo de análises. Colesterol estearase e colesterol oxidase foram imobilizadas em esferas de vidro via glutaraldeído/3-aminopropiletoxisilano e mini-colunas contendo as enzimas foram usadas para tratamento das amostras em linha. Ésteres de colesterol foram clivados a colesterol e ácidos graxos na coluna empacotada com colesterol estearase. No reator contendo colesterol oxidase, o analito foi convertido a 4-colesten-3-ona e peróxido de hidrogênio. A detecção foi baseada na quimiluminescência produzida por H 2 O 2 no sistema hexacianoferrato(III)-luminol. Os efeitos de variáveis químicas e hidrodinâmicas sobre o sinal de quimiluminescência foram avaliados. As curvas analíticas foram lineares entre 250 e 2500 mg L -1 e 500 e 4000 mg L -1 , para colesterol livre e total, respectivamente. Limites de detecção para ambos os analitos foram estimados em 60 mg L -1 (99,7% de confiança). A frequência de amostragem foi de 55 h -1 e o consumo de reagentes foi de 350 mg de luminol e 2,6 mg de hexacianoferrato(III) de potássio por determinação. O procedimento desenvolvido foi aplicado à determinação de colesterol em ovos e soro sanguíneo humano gerando resultados concordantes com o procedimento espectrofotométrico de referência com nível de confiança de 95%.A multicommuted flow-based procedure with detection by chemiluminescence for the determination of total and free cholesterol without changes in the flow manifold is proposed. Cholesterol esterase and cholesterol oxidase were both immobilized on glass beads via glutaraldehyde/(3-aminopropyl)-triethoxysilane and mini-columns containing the enzymes were used for online sample treatment. Cholesterol esters were cleaved to cholesterol and fatty acids at the packed reactor containing cholesterol esterase. The reactor containing cholesterol oxidase converted cholesterol to cholest-4-en-3-one also yielding hydrogen peroxide. Detection was based on the chemiluminescence produced by H 2 O 2 in the hexacyanoferrate(III)-luminol system. Influence of both chemical and hydrodynamic variables on the chemiluminescence signals were investigated. The analytical curves were linear from 250 to 2500 mg L -1 and from 500 to 4000 mg L -1 , for free and total cholesterol, respectively. Detection limits for both analytes were estimated as 60 mg L -1 at 99.7% confidence level. The sampling rate was 55 h -1 and reagent consumption was 350 mg of luminol and 2.6 mg of potassium hexacyanoferrate(III) per determination. The procedure developed was successfully applied for determination of cholesterol in eggs and in human blood serum with results in agreement with the reference spectrophotometric method at the 95% confidence level.

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Desenvolvimento de um dispositivo de baixo custo para medidas por quimiluminescência

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An enzymatic flow-injection procedure with chemiluminescence detection for on-site determination of L-alanine in synthesis process

An enzymatic flow-injection procedure with chemiluminescence detection for on-site determination of L-alanine in synthesis process

Um experimento de análise em fluxo envolvendo reações enzimáticas e quimiluminescência

A multicommuted flow procedure for the determination of total and free cholesterol in eggs and human blood serum by chemiluminescence

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