Demonstration ofListeria monocytogenesby Immunohistochemistry in Formalin‐Fixed Brain Tissues from Natural Cases of Ovine and Bovine Encephalitis

Abstract

In the present work, evidence of Listeria monocytogenes antigens based on the avidin-biotin complex (ABC) immunoperoxidase technique was performed on formalin-fixed central nervous system tissues (CNS) from a total of 23 natural cases of encephalitis (four ovine and 19 bovine). Listeria monocytogenes serotype 4 was isolated from 10 of 17 cultured specimens. Meningoencephalitis characterized by focal necrosis, microabscesses, perivascular cuffing, and gliosis with presence of macrophages and/or neutrophils was observed at histological examination. Positive L. monocytogenes antigens were successfully identified by immunohistochemistry (IHC) in the CNS of all 23 cases. Paraffin-embedded tissues assayed were stored up for 17 years. Morbidity of the outbreaks was between 0.3-3% and 0.1-1% for ovine and bovine cases, respectively. In all the ovine cases, flocks involved were under extensive grazing conditions. In nine of the 19 bovine cases (47.3%), supplementation with corn silage was used. The ABC test can help as a practical tool for the diagnosis of natural cases of L. monocytogenes encephalitis on formalin-fixed specimens from ovine and bovine.

Forma nervosa de listeriose em caprinos

“…A IHQ tem sido usada com sucesso para a detecção de antígenos de L. monocytogenes em tecidos emblocados em parafina de casos naturais de listeriose em ovinos, caprinos, bovinos, camelídeos (lhamas) e aves (Peixoto 1986, Johnson et al 1995, Weinstock et al 1995, Campero et al 2002, Loeb 2004, Schwab et al 2004. Em geral as bactérias são visualizadas nas áreas de microabscessos, no citoplasma de neutrófilos e macrófagos, mas também em neurônios normais ou degenerados.…”

“…Em geral as bactérias são visualizadas nas áreas de microabscessos, no citoplasma de neutrófilos e macrófagos, mas também em neurônios normais ou degenerados. Situações onde a coloração por IHQ apresenta superioridade no diagnóstico da listeriose incluem (1) lesões com número reduzido de bactérias ou pouca quantidade de antígeno, (2) quando o material a ser testado é enviado já fixado em formol para o laboratório e (3) quando o cultivo ou a coloração de Gram resultam negativos (Campero et al 2002, Loeb 2004. Isso ficou evidenciado neste trabalho.…”

“…A cultura bacteriológica foi positiva em 28,5% dos casos; a bactéria foi visualizada na coloração de Gram em 47,6% dos casos e na IHQ em 80,9% dos casos, o que indica que a IHQ é um método de diagnóstico mais sensível que o cultivo bacteriológico e coloração de Gram para o diagnóstico de listeriose. Além disso, o tempo de fixação em formol parece não interferir na sensibilidade do teste, pois positividade tem sido encontrada em casos de tecidos fixados por 10 (Weinstock et al 1995) e 17 anos (Campero et al 2002).…”

“…O diagnóstico pode ser confirmado pela cultura, detecção do microrganismo em colorações especiais (Gram), na imunofluorescência ou imunoistoquímica -IHQ (Peixoto 1986, Johnson et al 1995, Campero et al 2002, Loeb 2004, ou pela técnica de reação em cadeia de polimerase -PCR (Batt 1999).…”

Critical Roles of NK and CD8+ T Cells in Central Nervous System Listeriosis

“…In human and domestic animals, it is well known that encephalitis and meningitis but not ventriculitis are the major listeriosis-related brain pathologies (4,23). In our new i.pa.…”