Crystallization of piratoxin I, a myotoxic Lys49-phospholipase A2 homologue isolated from the venom of Bothrops pirajai

Canduri, Fernanda; Mancuso, L.C.; Soares, Andreimar M.; Giglio, José Roberto; Ward, Richard J.; Arni, Raghuvir K.

doi:10.1016/s0041-0101(97)00120-7

Cited by 8 publications

(4 citation statements)

References 29 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…We have correlated these results with release studies of a liposomeentrapped marker, which suggests that the dimeric form of the protein is essential for the initiation of the membrane damaging process. The crystal structures of Lys49-PLA 2 s from several snake venoms have been solved in both the dimeric (12,15,16,38,39) and monomeric (11,41,42) forms. Analysis of the crystal structures of dimeric Lys49-PLA 2 s reveals a pattern of reciprocal intermolecular interactions between the Nterminal helix and β-wing regions which involve residues Glu12, Trp77, and Lys80 (see Figure 1) (12,15,16,39,42).…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A₂Abolishes Ca²⁺-Independent Membrane Damaging Activity

et al. 2001

View full text Add to dashboard Cite

The hydrolysis of phospholipids by class II phospholipase A2 (PLA2) involves a Ca2+ ion cofactor bound to the Asp49 residue in the active site region. In the lysine 49 phospholipase A2 homologues (Lys49-PLA2), the Asp49 residue is substituted by Lys, and consequently the Lys49-PLA2s show no Ca2+ binding and no detectable phospholipid hydrolysis. Nevertheless, the Lys49-PLA2s demonstrate membrane damaging activity by an incompletely understood Ca2+-independent mechanism of action. Using a combination of steady-state and time-resolved fluorescence techniques, we have examined the effect of pH on the monomer-dimer equilibrium of bothropstoxin I (BthTX-I), a Lys49-PLA2 from the venom of Bothrops jararacussu which contains a single Trp77 residue located at the dimer interface. At pH 5.0, we observe a decreased quantum yield, a decreased rotational correlation time, and an increased bimolecular quenching rate constant with iodide. These results are consistent with a pH-induced dissociation of the BthTX-I dimer, with the consequent exposure of the Trp77 residue to aqueous solvent. In the presence of liposomes, membrane damaging activity is observed only under conditions in which the dimeric form of the BthTX-I is favored. These results demonstrate that the dimeric form of the protein is essential for the initiation of the Ca2+-independent membrane damaging activity.

show abstract

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A₂Abolishes Ca²⁺-Independent Membrane Damaging Activity

et al. 2001

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…The crystals belong to the orthorhombic system space group P2 (1)2(1)2(1), and diffract X-rays to a resolution of 2.8 A. Preliminary analysis reveals the presence of two molecules in the crystallographic asymmetric unit [134]. A myotoxic PLA 2 , bothropstoxin II, which exhibits low hydrolytic activity, was crystallized and Xray diffraction data were collected to a resolution of 2.2 A.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Therapeutic application of natural inhibitors against snake venom phospholipase A2

Samy¹,

Gopalakrishnakone²,

Chow³

2012

Bioinformation

View full text Add to dashboard Cite

Natural inhibitors occupy an important place in the potential to neutralize the toxic effects caused by snake venom proteins and enzymes. It has been well recognized for several years that animal sera, some of the plant and marine extracts are the most potent in neutralizing snake venom phospholipase A2 (svPLA2). The implication of this review to update the latest research work which has been accomplished with svPLA2 inhibitors from various natural sources like animal, marine organisms presents a compilation of research in this field over the past decade and revisiting the previous research report including those found in plants. In addition to that the bioactive compounds/inhibitor molecules from diverse sources like aristolochic alkaloid, flavonoids and neoflavonoids from plants, hydrocarbones 2, 4 dimethyl hexane, 2 methylnonane, and 2, 6 dimethyl heptane obtained from traditional medicinal plants Tragia involucrata (Euphorbiaceae) member of natural products involved for the inhibitory potential of phospholipase A2 (PLA2) enzymes in vitro and also decrease both oedema induced by snake venom as well as human synovial fluid PLA2. Besides marine natural products that inhibit PLA2 are manoalide and its derivatives such as scalaradial and related compounds, pseudopterosins and vidalols, tetracylne from synthetic chemicals etc. There is an overview of the role of PLA2 in inflammation that provides a rationale for seeking inhibitors of PLA2 as anti-inflammatory agents. However, more studies should be considered to evaluate antivenom efficiency of sera and other agents against a variety of snake venoms found in various parts of the world. The implications of these new groups of svPLA2 toxin inhibitors in the context of our current understanding of snake biology as well as in the development of new novel antivenoms therapeutics agents in the efficient treatment of snake envenomations are discussed.

show abstract

“…Não estão determinados, ainda, se os eventos que acarretam a morte celular são decorrentes da lise da membrana plasmática ou da ação intracelular da toxina, após sua internalização (Gutierrez & Lomonte, 1995;Ownby et al, 1999). (Gutiérrez et al, 1985;Homsi-Brandeburgo et al, 1988;Canduri et al, 1998;Soares et al, 2000a;Soares et al, 2000b). Estudos de cristalografia demonstraram que o grupo ε-amino do resíduo Lys49 está localizado na posição ocupada pelo íon cálcio, cofator essencial para a estabilização do intermediário tetraédrico durante a reação de catálise pelas FLA 2 -Asp49 (Holland et al, 1990;Arni & Ward, 1996;Lee et al, 2001).…”

Section: Fosfolipases a 2 Miotóxicasunclassified

Efeito nociceptivo induzido por fosfolipases A2 (FLA2 variantes Lys49 e Asp49) isoladas do veneno de serpentes Bothrops asper: caracterização dos mecanismos centrais e determinantes moleculares

Chacur¹

View full text Add to dashboard Cite

Tese apresentada ao Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo para obtenção do título de Doutor em Ciências. São Paulo, 2004 EFEITO NOCICEPTIVO INDUZIDO POR FOSFOLIPASES A 2 (variantes Lys49 e Asp49) ISOLADAS DO VENENO DE SERPENTES Bothrops asper: CARACTERIZAÇÃO DOS MECANISMOS CENTRAIS E DETERMINANTES MOLECULARES MARUCIA CHACUR Tese apresentada ao Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo para obtenção do título de Doutor em Ciências. Área de concentração: Farmacologia Orientador: Dra. Yara Cury São Paulo, 2004 Dedicatória DEDICATÓRIA Dedico este trabalho, Ao Lui, nem tenho palavras, acho que nosso convívio já explica tudo! enfim....por você fazer parte do meu caminho...TE AMO! "O amor não consiste em olhar um para o outro, mas sim em olhar juntos para a mesma direção." (Antoine de Saint-Exupéry) Aos meus queridos pais, Margarida e Roberto pelo apoio, carinho e ensinamento dedicado todos estes anos "A maior recompensa do nosso trabalho não é o que nos pagam por ele, mas aquilo em que ele nos transforma" (John Ruskin) Aos meus maravilhosos irmãos, Cláudia, Lida e Beto pela grande amizade e apoio mesmo que a distância! " Brincar é condição fundamental para ser sério". (Arquimedes) Agradecimentos AGRADECIMENTOS Agradeço em especial, A Yara, por iniciar meu caminho na "Ciência", pela orientação e pela oportunidade de trabalhar em seu Laboratório, um dos melhores que eu já conheci !! "Conhecimento vem de teu instrutor, sabedoria vem de teu interior" Aos amigos do Laboratório de Fisiopatologia, "A amizade é como uma gota de mercúrio: é preciso manter a mão aberta para retê-la. Se a fecharmos, ela escapa" Gisele, por toda ajuda nestes anos de convívio Vâ Guti, pela pessoa maravilhosa que vc é Vanessinha,pela amizade e pelas madrugadas na raia! Pat, só existe uma Você! Rosana, amigona como vc não existe! Samy(PKCy), pela empolgação que a faz tão especial Lilit's, pelas discussões e amizade apesar da distância! Ingrid,como poderia esquecer, pelo carinho e amizade Kiko, apesar de novo no Lab, já fez parte da família desde o primeiro dia! Camis, pela amizade e ajuda Neco,vc já faz parte desta família!! Renata (Rê), pelas idéias e amizade Flavio, pelas festas e pelas músicas! Agradecimentos Agradeço a todos que de alguma forma participaram na realização deste trabalho! A Carla, Júnior, Carina, Tati, Marcos, Cintia, Fê Faria, Ana e Maria Eliza pela amizade e ajuda todos estes anos. Ao Dr. José Maria Gutiérrez e Dr. Bruno Lomonte, pelas fosfolipases e peptídeos sintéticos, sem eles não seria possível a realização deste trabalho. Ao Prof. Dr. Luiz R.G. Britto, por abrir as portas de seu laboratório e pela confiança em mim depositada. Pela ajuda que seus alunos e técnico, me deram durante todo o tempo em que passei no seu laboratório, enfim, meu muito obrigada! Ao Prof. Dr. J. A. Bauer, pela ajuda nos experimentos, pelas discussões e pela amizade. A Margot e ao Edilson, pela ajuda na preparação das lâminas e nos experimentos. A Dra. Linda R. Watkins, pela co-orientação, pela ajuda e discus...

show abstract

Crystallization of piratoxin I, a myotoxic Lys49-phospholipase A2 homologue isolated from the venom of Bothrops pirajai

Cited by 8 publications

References 29 publications

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A₂Abolishes Ca²⁺-Independent Membrane Damaging Activity

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A₂Abolishes Ca²⁺-Independent Membrane Damaging Activity

Therapeutic application of natural inhibitors against snake venom phospholipase A2

Efeito nociceptivo induzido por fosfolipases A2 (FLA2 variantes Lys49 e Asp49) isoladas do veneno de serpentes Bothrops asper: caracterização dos mecanismos centrais e determinantes moleculares

Contact Info

Product

Resources

About

Crystallization of piratoxin I, a myotoxic Lys49-phospholipase A2 homologue isolated from the venom of Bothrops pirajai

Cited by 8 publications

References 29 publications

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A2Abolishes Ca2+-Independent Membrane Damaging Activity

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A2Abolishes Ca2+-Independent Membrane Damaging Activity

Therapeutic application of natural inhibitors against snake venom phospholipase A2

Efeito nociceptivo induzido por fosfolipases A2 (FLA2 variantes Lys49 e Asp49) isoladas do veneno de serpentes Bothrops asper: caracterização dos mecanismos centrais e determinantes moleculares

Contact Info

Product

Resources

About

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A₂Abolishes Ca²⁺-Independent Membrane Damaging Activity

A pH-Induced Dissociation of the Dimeric Form of a Lysine 49-Phospholipase A₂Abolishes Ca²⁺-Independent Membrane Damaging Activity