Cryopreservation of Multicellular Spheroids Derived from Primary Culture of Newborn Piglet Spinal Ganglion Cells

Abstract

Реферат: Спинальные ганглии (СГ) являются потенциальным источником нейральных стволовых клеток, поскольку содержат клетки-производные нервного гребня, способные дифференцироваться в нейроны и различные субпопуляции глиальных клеток. Известно, что при определенных условиях культивирования клетки СГ, полученные от неонатальных поросят, формируют флотирующие мультиклеточные сфероиды (МС), способные к выселению фибробластоподобных (ФбК), глиальных (ГлК) и нейроноподобных (НпК) клеток. В настоящей работе проведено криоконсервирование МС, которые были получены в условиях бессывоторочного культивирования, с использованием диметилсульфоксида (ДМСО) в концентрациях 5; 7,5; 10% и двухэтапного режима замораживания. Установлено, что после криоконсервирования МС сохраняют способность к адгезии, а также выселению из них трех типов клеток -ГлК, НпК и ФбК. Однако процесс выселения клеток из МС после криоконсервирования замедляется. Концентрация криопротектора влияет на тип клеток, преобладающий в культуре, полученной из размороженных МС. После криоконсервирования в присутствии 10% ДМСО монослой преимущественно состоит из ФбК, в то время как при концентрациях 5 и 7,5% -из ГлК.Ключевые слова: криоконсервирование, спинальные ганглии, мультиклеточные сфероиды, мантийные глиоциты, фибробластоподобные клетки, нейроноподобные клетки, неонатальные поросята.Реферат: Спінальні ганглії (СГ) є потенційним джерелом нейральних стовбурових клітин, оскільки містять клітини -похідні нервового гребеня, які здатні диференціюватися в нейрони і різні субпопуляції гліальних клітин. Відомо, що при певних умовах культивування клітини СГ, отримані від неонатальних поросят, утворюють флотуючі мультиклітинні сфероїди (МС), здатні до виселення фібробластоподібних (ФбК), гліальних (ГлК) i нейроноподібних (НпК) клітин. У даній роботі проведено кріоконсервування МС, які були отримані в умовах безсироваткового культивування, з використанням диметилсульфоксиду (ДМСО) в концентраціях 5; 7,5; 10% і двоетапного режиму заморожування. Встановлено, що після кріоконсервування МС зберігають здатність до адгезії, а також виселення iз них трьох типів клітин -ГлК, НпК і ФбК. Однак процес виселення клітин iз МС після кріоконсервування сповільнюється. Концентрація кріопротектору впливає на тип клітин, що спостерігається переважно в культурі, отриманій з розморожених МС. Після кріоконсервування у присутності 10% ДМСО моношар здебільшого складається з ФбК, у той час як при концентраціях 5 і 7,5% -із ГлК.Ключові слова: кріоконсервування, спінальні ганглії, мультиклітинні сфероїди, мантійні гліоцити, фібробластоподібні клітини, нейроноподібні клітини, неонатальні поросята.Abstract: Dorsal root ganglia (DRG) are a potential source of neural stem cells, since they contain the neural crest-derived cells capable to diff erentiate into neurons and diff erent subpopulations of glial cells. It is known that under certain culture conditions, the DRG cells, derived from neonatal piglets form the fl oating multicellular spheroids (MSs), capable to produce the fi broblast-like cells (FLCs...