Cryopreservation of European eel (Anguilla anguilla) spermatozoa: Effect of dilution ratio, foetal bovine serum supplementation, and cryoprotectants

Marco‐Jiménez, Francisco; Garzón, D.L.; Peñaranda, David S.; Pérez, Luz; Viudes-de-Castro, M.P.; Vicente, J.S.; Jover, M.; Asturiano, Juan F.

doi:10.1016/j.cryobiol.2006.03.011

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“…As MeOH and glycerol showed good results, reason for which, these three cryoprotectants, were chosen to make the third experiment. The experiment in turn verified the protective effect of FBS as described by in Japanese eel and by Marco-Jime´nez et al (2006a) in European eel.…”

Section: Discussionsupporting

confidence: 73%

“…En estudios ultraestructurales realizados con microscopía electrónica en espermatozoides de peces del orden Anguilliformes, se han definido las siguientes ultraestructuras: una cabeza en forma de media luna, una radícula (pieza media) conectada a la región del cuello, un flagelo con un patrón 9+0, y pseudoflagelos extendiéndose desde el centriolo proximal (Billard y Ginsburg, 1973;Gwo y Arnold, 1992;Okamura y Motonobu, 1999;Marco-Jiménez et al 2006a). …”

Section: Nuevas Técnicas Para La Evaluación De La Calidad Espermáticaunclassified

“…El perímetro y el área de la cabeza de los espermatozoides de anguila han sido medidos por primera vez en el estudio de Marco-Jiménez et al (2006a). En este trabajo, se estudiaron 100 espermatozoides de anguila europea por la técnica de SEM y 14.898 usando la técnica informática ASMA.…”

Section: Análisis Morfológicos Asistidos Por Ordenador (Asma)unclassified

“…El método de análisis ASMA también se emplea en el campo de la criopreservación, evaluando los efectos causados por los crioprotectores durante los procesos de congelación-descongelación (Billard, 1983;Billard et al 2000), además de estudiar los cambios morfológicos de los espermatozoides durante la maduración celular (Davis y Gravance, 1993;Marco-Jiménez et al, 2006a). …”

Section: Análisis Morfológicos Asistidos Por Ordenador (Asma)unclassified

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Inducción hormonal de la espermiación y criopreservación de esperma en anguila europea (Anguilla anguilla).

Cortés¹,

Ladislao²

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4 RESUMEN La producción de anguilas se basa en la captura de angulas, pero la captura de éstas no se ha podido incrementar al mismo ritmo que su demanda para el engorde en piscifactorías. La caída de las capturas de angulas llevó a la búsqueda por todo el mundo de nuevos suministros, planteándose la reproducción en cautividad como una de las alternativas de mayor importancia.Debido a que las anguilas no maduran sexualmente en cautividad se han desarrollado métodos de inducción hormonal que logran la producción de volúmenes importantes de esperma de buena calidad (Pérez et al. 2000;Müller et al. 2004). Este hecho ha motivado el interés por desarrollar técnicas para la recolección y manejo apropiado del esperma de esta especie. En este sentido se decidió realizar una serie de experimentos con la finalidad de desarrollar técnicas de congelación y estudios sobre la calidad del esperma de anguila europea.El primero de ellos trató de optimizar los tratamientos de inducción hormonal en machos de anguila europea (procedentes de piscifactoría) para obtención de esperma.Fueron probados cinco tratamientos hormonales (A-E) con gonadotropina coriónica humana (hCG) para inducir la maduración gonadal y la espermiación en machos de anguilas procedentes de piscifactoría. Se vio que una dosis semanal de 1.5 UI hCG/g pez, es la que permite obtener un mayor porcentaje de machos espermiantes, un periodo de espermiación más largo y un mayor volumen de esperma.A continuación se estudiaron protocolos de criopreservación utilizando como base medios diluyentes descritos para anguila japonesa (K15, K30, TNK) y dos descritos anteriormente para anguila europea (P1 y P2). A los espermatozoides congelados en estos medios se les realizaron análisis de movilidad (pre y postcongelación): la velocidad angular (VAP), velocidad curvilínea (VCL), velocidad de línea directa (VSL) y frecuencia de batido del flagelo (BCF). Estos parámetros se analizaron con un programa informático para análisis de esperma (CASA). Los espermatozoides congelados en los medios de congelación TNK y P1, conteniendo dimetilsulfóxido (DMSO) y lecitina, mostraron los mayores resultados de supervivencia postcongelación. 5Una vez definido el diluyente de mejores características se procedió a probar una batería de crioprotectores (DMSO, acetamida, etilenglicol, propanol, glicerol y metanol) con la finalidad de definir el mejor para anguila europea. Al mismo tiempo se estudió el efecto de la adición de suero fetal bovino (FBS) a los medios de congelación, y del factor de dilución esperma:medio de congelación. El efecto de estos factores se evaluó mediante la comparación pre y post-congelación del porcentaje de células móviles, porcentaje de células vivas y de su morfometría. Cada mezcla contenía 75 µl de crioprotector, 425 µl medio P1 y 250 µl de esperma en una relación de 1:2 (v/v).El mejor resultado global se logró con DMSO mezclado en P1 modificado, conteniendo FBS como diluyente, dando como resultado un incremento significativo del porcentaje de movilidad espermática post-c...

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Section: Discussionsupporting

confidence: 73%

Section: Nuevas Técnicas Para La Evaluación De La Calidad Espermáticaunclassified

Section: Análisis Morfológicos Asistidos Por Ordenador (Asma)unclassified

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Inducción hormonal de la espermiación y criopreservación de esperma en anguila europea (Anguilla anguilla).

Cortés¹,

Ladislao²

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“…En el presente trabajo encontramos que tanto el área como el perímetro del espermatozoide de carnero criopreservado, es significativamente menor (p<0.05), en relación a sus dimensiones en fresco y refrigerado, lo cual también ha sido comprobado por Marco-Jiménez et al (2006) en espermatozoides de anguilas y Ramón et al (2013) en ovinos, que podría deberse a diferentes razones que incluyen los cambios osmóticos, las alteraciones en algunos compartimientos de las células, sobrecondensación de la cromatina nuclear y daño o pérdida del acrosoma (Maroto-Morales et al, 2016). En relación con el acrosoma en el presente trabajo, se ha encontrado una disminución significativa (p<0.05) del 8.7% en el porcentaje del acrosoma con respecto a espermatozoide de semen fresco, apoyando a los reportes Maroto-Morales et al (2016).…”

Section: Discussionunclassified

Efecto de la congelación en los parámetros morfométricos del espermatozoide de carnero

Choquepuma¹,

Ordoñez²,

Quispe³

et al. 2017

SPERMOVA

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RESUMENEl objetivo del estudio fue evaluar el efecto de la congelación en los parámetros morfométricos de los espermatozoides del carnero. Para ello se utilizó el semen de 2 carneros jovenes de la raza Corriedale de 2 y 2.5 años, con una condición corporal de 3.5. Se evaluaron el volumen, motilidad, concentración, viabilidad, integridad de la membrana y la morfometría de los espermatozoides en las muestras. Todas las variables morfometricas se determinaron con un sistema CASA (ISAS, Proiser). El proceso de congelación se realizó con diluyente a base TRIS con 3% de lecitina de soya y glicerol como crioprotector. Se analizaron 12 parámetros morfométricos del espermatozoide, longitud, anchura, área, perímetro, elipticidad, elongación, regularidad y rugosidad de la cabeza del espermatozoide, porcentaje de acrosoma, y la anchura, distancia y ángulo de inserción de la pieza intermedia del espermatozoide de carnero. Se evaluaron una población de 2518 espermatozoides en semen fresco, refrigerado y descongelado. Nuestros resultados indican que algunos parámetros morfométricos del espermatozoide (longitud, anchura, área y perímetro de la cabeza) criopreservado son de menor dimensión (p<0.05) a lo encontrado en semen fresco y refrigerado.Palabras clave: CASA, morfometría espermática, criopreservación, semen carnero ABSTRACTThe objective of the study was to evaluate the effect of freezing on the morphometric parameters of ram spermatozoa. For this purpose, the semen of 2 young rams of the Corriedale breed of 2 and 2.5 years old was used, with a body condition of 3.5. The volume, motility, concentration, viability, membrane integrity and sperm morphometry were evaluated in the samples. All morphometric variables were determined using a CASA system (ISAS, Proiser). The freezing process was performed with TRIS based diluent with 3% soy lecithin and glycerol as cryoprotectant. A total of 12 morphometric parameters were analyzed (length, with, area, perimeter, ellipticity, elongation, regularity and roughness of head spermatozoa, acrosome percentage, and the width, distance and insertion angle mid piece ram sperm). A population of 2518 spermatozoa was evaluated in fresh, refrigerated and thawed semen. Our results indicate that some cryopreserved sperm morphometric parameters (length, width, area and perimeter of the head) are smaller (p <0.05) than that found in fresh and refrigerated semen

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H

2010

Handbook of Biological Dyes and Stains

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Cryopreservation of European eel (Anguilla anguilla) spermatozoa: Effect of dilution ratio, foetal bovine serum supplementation, and cryoprotectants

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Inducción hormonal de la espermiación y criopreservación de esperma en anguila europea (Anguilla anguilla).

Inducción hormonal de la espermiación y criopreservación de esperma en anguila europea (Anguilla anguilla).

Efecto de la congelación en los parámetros morfométricos del espermatozoide de carnero

H

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