Correlación de la t(9;22), t(12;21) e hiperdiploidia de ADN, con el inmunofenotipo, y la tasa proliferativa de células B neoplásicas de pacientes pediátricos con leucemia linfoide aguda de precursores B

Abstract

Instituciones donde se llevó a cabo el trabajo: Fundación Santa Fe de Bogotá, Fundación Hospital de la Misericordia y Pontificia Universidad Javeriana.Introducción. Del 60 al 80 % de los pacientes con leucemia linfoblástica aguda de precursores B presentan alteraciones genéticas que influyen en el pronóstico de la enfermedad y en la biología del tumor. Objetivo. Analizar distintas alteraciones genéticas en leucemia linfoblástica aguda de precursores B en niños, y su relación con el inmunofenotipo y con la tasa de proliferación, en comparación con precursores B normales. Materiales y métodos. En 44 pacientes se evaluó, por citometría de flujo, el inmunofenotipo, el contenido de ADN y la proliferación, y por RT-PCR, las traslocaciones t(9;22), t(12;21), t(4;11) y t(1;19). Mediante un análisis jerarquizado de conglomerados se identificaron los patrones inmunofenotípicos de expresión asociados a las traslocaciones, tomando como referencia precursores B normales. Resultados. La cuantificación del ADN mostró que el 21 % de los casos de leucemia linfoblástica aguda de precursores B eran hiperdiploides de índice alto y, el 47,7 %, hiperdiploides de índice bajo. La presencia de hiperdiploidía se asoció con mayor proliferación tumoral y con inmunofenotipos aberrantes, que incluyeron expresión anormal de CD10, TdT, CD38 y CD45 y un mayor tamaño de los linfoblastos. La presencia de t(9;22) y t(12;21) discrimina células normales de células tumorales con aberraciones en la expresión de CD19, CD20, CD13, CD33, CD38, CD34 y CD45. Conclusiones. El perfil de aberraciones fenotípicas detectado en conjunto con anormalidades en la proliferación tumoral, se asocia de forma significativa con hiperdiploidiía de ADN y discrimina de forma clara linfoblastos con t(9;22) y t(12;21) de los precursores B normales. La identificación de estos parámetros será de gran utilidad como herramienta para la clasificación y seguimiento de los pacientes. Contribución de los autores:Sandra Milena Quijano, Carlos Eugenio Saavedra, María Mercedes Torres, Rafael Enrique Andrade: concepción del estudio. Adriana Linares, Silverio Castaño, Isabel Cristina Sarmiento, Edgar Cabrera, Gloria Inés Uribe: selección de pacientes, obtención de muestras de médula ósea y obtención de consentimientos informados. Gina Elizabeth Cuéllar y Edna Liliana Martín: procesamiento y marcación inmunofenotípica por citometría de flujo de las muestras de médula ósea. Sandra Milena Quijano, Carlos Eugenio Saavedra, Martha Liliana Romero: análisis e interpretación del inmunofenotipo de las muestras de médula ósea. Sandra Milena Quijano y Gina Elizabeth Cuéllar: procesamiento y marcación de muestras de médula ósea para estudios de ciclo celular por citometría de flujo. Sandra Milena Quijano y Carlos Eugenio Saavedra: análisis e interpretación de estudios de ciclo celular de las muestras de médula ósea por citometría de flujo. María Mercedes Torres, Liliana Edith Vásquez y Rafael Enrique Andrade: detección de traslocaciones cromosómicas por RT-PCR. Sandra Milena Quijano y Liliana Edith V...

Prognostic stratification improvement by integrating ID1/ID3/IGJ gene expression signature and immunophenotypic profile in adult patients with B-ALL

“…Similar to what has been reported in the literature, comparative immunophenotype analysis between B-ALL cases and their normal counterpart, revealed high heterogeneity in the expression of the different markers suggesting the existence of leukemia associated phenotypes (LAP) [ 11 , 26 ] in our cohort of patients. Leukemic lymphoblast cells were characterized by over-expression (median fluorescence channel) of CD34 and CD10 immaturity markers, B lineage markers such as CD19 and CD24, the lymphocyte common antigen CD45 and aberrant expression of myeloid lineage associated marker CD66.…”

“…The presence of CD38 (>30%) is associated with worse prognosis in mature B-cell tumors like B-chronic lymphoid leukemia and in hairy cell leukemia, T and NK lymphoma [ 41 , 42 ]. However, our work and another report on hematopoietic tumors of B-ALL pediatric Colombian patients [ 26 ], describes an under-expression of CD38 in the group of patients with poor prognosis. Similar to our findings, Quijano et al [ 26 ] reported that higher FSC (larger size) was associated with patients with good prognostic.…”

“…However, our work and another report on hematopoietic tumors of B-ALL pediatric Colombian patients [ 26 ], describes an under-expression of CD38 in the group of patients with poor prognosis. Similar to our findings, Quijano et al [ 26 ] reported that higher FSC (larger size) was associated with patients with good prognostic. Expression of CD45, protein phosphatases that regulates various cellular functions and signaling pathways, has been reported low or negative in patients with chromosomal aberrations as t(12;21), t(4;11), hyperdiploidy, t(9;22), t(1;19) [ 43 ], which is consistent with our finding of reduced expression of this molecule in the group with poor prognostic features.…”

“…Cell populations were classified as positive for each marker if the expression (percentage and MFI) was higher than that was observed in the negative control (basal autofluorescence basal cells without antibody). In addition, the MFI of each marker in leukemic populations was compared to the MFI of the same marker in normal bone marrow B-cell populations (normal counterpart) to define whether the analyzed marker was negative, under-expressed or overexpressed on the blast population [ 26 ]. The panel of 19 markers was evaluated in 42 patient samples at baseline to confirm the diagnosis of B-ALL and after induction chemotherapy to detect the presence of disease (MRD).…”