Construção de sistemas bacterianos para a detecção de metais pesados em amostras ambientais.

Abstract

Quadros OF. Construção de sistemas bacterianos para a detecção de metais pesados em amostras ambientais. [tese (Doutorado em Biotecnologia)]. São Paulo (Brasil): Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo; 2011. Para a obtenção de biossensores bacterianos para os metais mercúrio, arsênio e chumbo, fragmentos dos operons mer, ars e pbr foram amplificados por PCR, a partir do DNA da bactéria Cupriavidus metallidurans CH34. Estes fragmentos de DNA foram inseridos à montante do gene EGFP, no plasmídeo pBB-EGFP, obtendo-se os plasmídeos pGHg, pGAs e pGPb, que foram clonados em C. metallidurans CH34 e Escherichia coli DH5α. As linhagens recombinantes foram incubadas em diferentes concentrações dos metais e analisadas quanto à emissão de fluorescência empregando-se microscopia e citometria de fluxo. As linhagens recombinantes C. metallidurans CH34 / pGHg e E. coli DH5α / pGHg, C. metallidurans CH34 / pGAs e C. metallidurans CH34 / pGPb permitiram a determinação de diferentes concentrações de mercúrio, arsênio e chumbo, respectivamente. Os resultados obtidos indicam forte potencial de aplicação para rápidos diagnósticos de águas contaminadas com estes metais pesados tóxicos. Palavras-chave: Bactérias. Bioluminescência. Biotecnologia. Meio ambiente. Metais pesados. Regulação gênica.