T. reesei..........................................................................................The transcriptional activity of the intergenic promoter region was analyzed using hygromicin B phosphotransferase (hph) as a reporter gene. A functional region required for the transcription of both genes was identified in the centre of this promoter. It has a GC box that interacts with a putative transcription factor Sp1 from T. reesei (TrZnFSp1).The results presented in this work show that both genes are divergently transcribed from a bidirectional promoter that shares an essential central GC box. (Lander et al., 2001;Venter et al., 2001) e Saccharomyces cerevisiae (Goffeau et al., 1996), tem permitido a elaboração de mapas genéticos e físicos desses genomas. Esses mapas permitem determinar a estrutura e organização gênica, identificando e localizando genes e regiões intergênicas; estudar a distribuição de genes entre grupos taxonômicos; manipular a herança de determinadas características do indivíduo e determinar o padrão de expressão temporal e espacial de proteínas codificadas pelos genes (Lawrence et al., 2003).Análises de seqüenciamento de DNA e mapeamento de sítios de início de transcrição têm demonstrado que os genomas de vários organismos apresentam genes que são transcritos de forma divergente (em orientação oposta), a partir de promotores compartilhados ou não. Na organização divergente, a transcrição dos genes pode ser coordenada, ou co-regulada, se as regiões reguladoras da transcrição forem compartilhadas (Beck et al., 1988).A partir do banco de dados "Trichoderma reesei EST database and mitochondrial genome" (http//trichoderma.iq.usp.br), de Trichoderma reesei, um fungo filamentoso e 2 organismo modelo para análise genômica (Herrera-Estrella et al., 1990), foi inicialmente selecionado o gene da enzima citrato sintase (TrCit) para um estudo do controle de sua expressão gênica que envolveu a clonagem de seu locus gênico. Entretanto, a análise desse locus mostrou a orientação divergente dos genes citrato sintase (TrCit) e isocitrato liase (TrIcl), separados por uma curta região intergênica. Assim, pretendeu-se analisar está região promotora intergênica, com o intuito de determinar se ambos os genes estão sob o controle de um promotor bidirecional, identificar os prováveis elementos responsáveis pelo controle da transcrição e descrever pela primeira vez um promotor desta natureza em T. reesei.
Organização do genoma.O genoma de procariotos é, na maioria dos casos, altamente organizado. Os genes estão ordenados e orientados na direção da replicação, para evitar a colisão entre as enzimas DNA e RNA polimerases, e múltiplos genes estão organizados em operons e são co-transcritos num mRNA policistrônico (Koyanagi, et al., 2005).Em contraste direto, o arranjo dos genes no genoma eucariótico não é organizado, a maioria dos genes é regulada individualmente, com um promotor na extremidade 5´ e um terminador de transcrição na extremidade 3´ e os transcritos são mRNAs monocistrônicos; porém, nem todos os genes s...