Comparative assessment of the replication efficiency of dengue, yellow fever, and chikungunya arboviruses in some insect and mammalian cell lines

Abstract

Introduction: Insect cell cultures play an essential role in understanding arboviral replication. However, the replicative efficiency of some of these viruses such as dengue (DENV), yellow fever (YFV), and chikungunya (CHIKV) in a new cellular substrate (Lulo) and in the other two recognized cell lines has not been comparatively assessed. Methods: Vero, C6/36, and Lulo cell lines were infected with DENV, YFV, and CHIKV. The viral progeny was quantified through plaque assays and quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, while for DENV2, the findings were confirmed by immunofluorescence antibody assay. Results: The higher DENV2 titer (from multiplicity of infection 0.001) was obtained on day four post-infection in C6/36 and on day six in Vero cells, while the Lulo cell line was almost impossible to infect under the same conditions. However, C6/36 showed the highest values of viral RNA production compared to Vero cells, while the quantification of the viral RNA in Lulo cells showed high levels of viral genomes, which had no correlation to the infectious viral particles. Conclusions: C6/36 was the most efficient cell line in the alpha and flavivirus production, followed by Vero cells. Thus, Lulo cells may be a useful substrate to study the mechanisms by which cells evade viral replication.

Antibodies for Venezuelan Equine Encephalitis Virus Protect Embryoid Bodies from Chikungunya Virus

“…This has also been shown for multiple flaviviruses [24,25]. Reports on CHIKV replication efficiency in mammals and cell lines have shown a range of detection depending on the host [26,27]. The data here show that in BeWo and HUVEC cells, CHIKV replication peaks at 48 hours post inoculation while in EBs, CHIKV replication is greatest at 72 hours post inoculation.…”

Antibodies for Venezuelan Equine Encephalitis Virus Protect Embryoid Bodies from Chikungunya Virus

“…Thus, it is necessary to identify which cells participate in viral pathogenesis. Reports on CHIKV replication efficiency in mammals and cell lines have shown a range of detection depending on the host [40,41]. The data here show that in BeWo and HUVEC cells, CHIKV replication peaked at 48 h p.i., whereas in EBs, CHIKV replication was greatest at 72 h p.i.…”

Líneas celulares de dípteros: características, aplicaciones y aportes desde Colombia

“…Por otro lado, algunas líneas de Diptera han resultados pobremente susceptible o refractarias a la infección por arbovirus, por ejemplo, la línea celular Lulo del flebótomo Lutzomyia longipalpis fue pobremente susceptible a la infección por DENV2 a altos MOIs, por lo cual esta línea celular puede ser considerado una herramienta para entender los mecanismos a través de los cuales la célula puede evadir la replicación viral [68]. Al igual que esta línea celular, otras líneas celulares establecidas a partir de insectos, como CNE/LULS44 y CNE/LULS47, establecidas a partir de Culicoides nubeculosus, donde se estudió la replicación del virus lengua azul (familia Reoviridae), mediante la infeccion con dos cepas del virus BTV-1 (transmitía por el mosquito C. nubeculosus) y BTV-26 (no transmitido por insectos), se pudo observar que las células fueron susceptibles a la cepa BTV-1, pero refractarias a la cepa BTV-26, este tipo de células facilita la comprensión de los mecanismos de infección y liberación que subyacen a la competencia del vector y la transmisión del virus el cual afecta a bovinos [59]; finalmente, otro ejemplo, de líneas celulares refractarias es AEGY-28, establecida a partir de Ae aegypti, la cual resultó refractaria a la infección por FAV y DENV2 y se infirió como explicación a dicho evento que pudo estar asociado a la falta de tripsina en el cultivo celular, en razón a que en la infección natural la tripsina ofrece un clivaje proteolítico en la superficie del virión, facilitando la infección [69].…”