Combination index of the concentration and in vivo antagonism activity of racemic warfarin and its metabolites to assess individual drug responses

Review Metode Analisis Warfarin dalam Plasma dengan Berbagai Instrumen

“…Selain pH, bentuk puncak pada kromatogram dipengaruhi oleh dapar, fase gerak organik, serta penambahan modifier fase gerak lain. Modifier untuk memperbaiki bentuk puncak yang digunakan seperti asetonitril dan methanol untuk fase gerak organik serta asam fosfat [25,26,33], asam asetat [24,29,36], trietilamin [2,39], dan asam format [1,8,13,14,16,20,22,28,43]. Nilai pH dan pKa dari senyawa menentukan derajat ionisasi analit serta afinitasnya terhadap fase diam dan fase gerak.…”

“…Nilai pH dan pKa dari senyawa menentukan derajat ionisasi analit serta afinitasnya terhadap fase diam dan fase gerak. Pada uji bioanalisis warfarin, banyak fase gerak yang dibuat bersifat asam dengan penambahan buffer [3,8,11,16,20,[23][24][25][26][27][28] atau asam format [1,[5][6][7]10,14,15,17,[21][22][23]26,[29][30][31][32][33][34][35][36]. Hal ini menyebabkan warfarin akan terdapat dalam bentuk tak ter-ion sehingga bersifat non polar dan akan lebih terjerap pada fase diam, sehingga puncak yang dihasilkan dapat memiliki resolusi yang baik.…”

“…Namun detektor ini kurang sensitif bila digunakan untuk mendeteksi analit dalam jumlah yang kecil. Dalam tinjauan artikel ini, sejumlah 9 artikel menggunakan detektor UV [2,7,25,32,38,40,41], panjang gelombang maksimum untuk deteksi warfarin yang digunakan beragam, yakni 280 nm [24], 288 nm [38], 305 nm [25], 308 nm [41], 310 nm [2], dan 313 nm [43]. Perbedaan panjang gelombang dapat disebabkan oleh substitusi atau perbedaan fase gerak.…”

“…15 diantaranya QQQ dan 3 diantaranya quadrupole. Mode ion yang digunakan beragam, ada yang menggunakan positive ion spray [34] dan negative ion spray [18,24]. Pada LC-MS, nilai LLOQ berkisar antara 0,5-130 ng/mL.…”

“…Oleh karena itu, warfarin akan terdapat dalam fase yang bersifat organik. Nilai recovery tertinggi yang didapatkan pada metode ekstraksi cair-cair yang ditinjau dalam artikel ini mencapai 98,61% dengan pelarut ekstraksi diklorometana : heksana 1:5 yang dilakukan oleh Shen et al Penelitian lainnya menggunakan pelarut dietil eter dan mendapatkan nilai recovery 96,2% [43], kemudian menggunakan pelarut etil asetat dan mendapatkan nilai recovery 89,6-109,3% [3,19], kemudian menggunakan pelarut diklorometana : heksana 1:5 dan mendapatkan nilai recovery 86-106,4% [24,27,48], kemudian menggunakan pelarut metanol dan mendapatkan nilai recovery 94,48% [32], kemudian menggunakan pelarut etil asetat : dietil eter 1:1 dan mendapatkan nilai recovery 112,5% [18], dan menggunakan pelarut metil butil eter : diklorometana dan mendapatkan nilai recovery 87,6-96,3% [39]. Bila dibandingkan dengan metode presipitasi protein, metode ekstraksi cair-cair ini memiliki nilai recovery yang lebih rendah, serta prosedurnya sedikit lebih rumit serta lebih membutuhkan pelarut yang mahal.…”