Osteossarcoma (OSA) é um tumor mesenquimal primário maligno cujas células produzem matrizóssea. É um tumor agressivo, de crescimento rápido, e com grande incidência de formação demetástases. O diagnóstico é baseado em dados histopatológicos, contudo, não há consenso nossistemas de classificação desse tumor. Desta forma, nós nos propusemos a fazer uma avaliaçãohistológica e histoquímica de OSAs buscando fornecer informações que possam ser utilizadaspara a melhor compreensão da doença. Realizamos um levantamento dos casos de OSA no hospitalveterinário do Unipinhal. As amostras obtidas nos arquivos de histopatologia, foram analisadashistoquimicamente com hematoxilina e eosina (HE), azul de toluidina em pH 4,0 (AT), xylidineponceau em pH 2,5 (XP) e azul alcian em pH 2,5 (AA). A HE, confirmou o diagnóstico de OSAe mostrou uma intensa proliferação celular, além da produção de matriz osteoide. Com o AT,encontramos ao redor das células uma grande quantidade de glicosaminoglicanos, exceto onde seobserva osteoide formado. Esses resultados foram corroborados com o AA. Com o XP,detectamos proteínas em toda a região do osteoide. O diagnóstico de OSA se restringeprincipalmente na análise morfológica do tumor e na produção de matriz extracelular.Rotineiramente, isso é feito por HE. Aqui demonstramos um método rápido e fácil que permiteobter mais informações sobre o tumor e sua matriz, facilitando o diagnóstico.