Characterization of a peptide domain within the GB virus C envelope glycoprotein (E2) that inhibits HIV replication

Abstract

GB virus C (GBV-C) infection is associated with prolonged survival in HIV-infected cohorts, and GBV-C E2 protein inhibits HIV entry when added to CD4+ T cells. To further characterize E2 effects on HIV replication, stably transfected Jurkat cell lines expressing GBV-C E2 or control sequences were infected with HIV and replication was measured. HIV replication (all 6 isolates studied) was inhibited in all cell lines expressing a region of 17 amino acids of GBV-C E2, but not in cell lines expressing E2 without this region. In contrast, mumps and yellow fever virus replication was not inhibited by E2 protein expression. Synthetic GBV-C E2 17mer peptides did not inhibit HIV replication unless they were fused to a tat-protein-transduction-domain (TAT) for cellular uptake. These data identify the region of GBV-C E2 protein involved in HIV inhibition, and suggest that this GBV-C E2 peptide must gain entry into the cell to inhibit HIV.

GB Virus C Particles Inhibit T Cell Activation via Envelope E2 Protein-Mediated Inhibition of TCR Signaling

“…Six truncated E2 proteins were ligated into a modified pTRE2-HGY plasmid (Clontech, Inc.) as described (24,25). This plasmid generates a bicistronic message encoding the GBV-C E2 sequence followed by the encephalomyocarditis virus (EMC) internal ribosomal entry site (IRES) that directs translation of GFP.…”

“…FITC labelled synthetic peptides with an N-terminal HIV TAT protein transduction domain (TAT) alone (GGGGGRKKRRQRRR), or with the GBV-C E2 aa 86-101 (GGGGGRKKRRQRRRVYGSVSVTCVWGS; Y87), or the Y87H mutation (GGGGGRKKRRQRRRVHGSVSVTCVWGS) were purchased from Ana Spec, Inc. Peptides with the TAT domain and GBV-C E2 aa 276-292 (GGAGLTGGRYEPLVRRC), or the same amino acids in a scrambled order (GCRCARGVLLTPGEGYF) were previously described (25). Peptides were dissolved in RPMI with 10% DMSO.…”

GB Virus C Envelope Protein E2 Inhibits TCR-Induced IL-2 Production and Alters IL-2–Signaling Pathways

“…Since IL-2 plays an important role in HIV infection and disease progression, the effects of GBV-C on IL-2 signaling pathways may contribute to the protective effect of GBV-C coinfection in HIV infected individuals. Previous studies demonstrated that GBV-C envelope glycoprotein (E2) inhibits HIV replication when added to cells (2, 36, 37), or when expressed in a CD4+ Jurkat T cell line (38). In this study we examined the role of the GBV-C E2 protein in the modulation of IL-2 production and IL-2 signaling pathways.…”

Interacción entre el virus de la inmunodeficiencia humana y el virus GB tipo-C durante el estado de co-infección

“…Con base en estos resultados, y con el fin de determinar el mecanismo de inhibición, se han diseñado pseudopartículas de VIH (con la glicoproteína del VSG) capaces de ingresar a la célula mediante endocitosis, encontrando ausencia de inhibición, lo que sugiere que E2 interviene específicamente en el paso de adhesión del VIH 42,43 . Otros estudios más recientes sugieren la posibilidad de que péptidos derivados de la glicoproteína E2 del GBV-C tendrían la capacidad de inhibir la unión al receptor y/o la fusión de VIH vía interacción con la partícula viral, o incluso realizar la inhibición en pasos tempranos pos-entrada 43,44 (Figura 3B); Koedel y cols., utilizaron 32 péptidos sintéticos derivados de E2, que al ser adicionados a cultivos celulares antes de la infección con VIH (pseudopartículas virales), inhibieron el paso de entrada. Específicamente identificaron que las porciones entre los residuos 45 a 64 (péptido P6-2) y 37 a 64 (péptido P4762) presentaban la actividad más alta para afectar el ciclo replicativo de VIH; al hacer el análisis más detallado, la inhibición en el modelo utilizado involucraba un mecanismo no reportado previamente de interacción directa con las glicoproteínas de VIH 44 .…”

“…Estos autores encontraron que la actividad inhibitoria fue asociada a 17 residuos de E2 (276-292aa), distinto a lo reportado anteriormente por Koedel y cols. Al tratar de evaluar la actividad de E2, utilizando un péptido sintético compuesto por estos 17aa, la actividad inhibitoria sobre VIH no fue observada, siendo re-establecida sólo cuando se aseguraba la entrada del péptido al fusionarlo con el dominio de transducción de la proteína viral TAT, indicando que E2 tendría un mecanismo adicional de inhibición de VIH dependiente de su ingreso a la célula (paso post-entrada) 43 . De otra parte, se ha observado actividad neutralizante anti-VIH con anticuerpos anti-E2 del GBV-C (anti-GB/ E2).…”