Caracterização do efeito da crotoxina sobre a funcionalidade dos neutrófilos da medula óssea

Abstract

À Cristina, pela orientação, e mais do que isso, pela amizade que construímos ao longo desses 10 anos. Obrigada pela oportunidade de fazer ciência, pela confiança depositada em mim para a realização de mais este trabalho e pelos ensinamentos ao longo desses anos.À Camila, pela ajuda e a companhia para a realização de tantos experimentos.Obrigada por trabalhar ao meu lado, por estar sempre disponível a ajudar e por trabalhar de forma tão dedicada e criteriosa. À Dr. Sandra Sampaio, sempre disponível para uma conversa, uma ajuda, uma discussão de resultado. Obrigada pela colaboração em mais este trabalho e obrigada pela amizade desses 10 anos. À Dr. Cornelia Brunner e à Dr. Katia Fiedler, por terem me recebido tão bem no Laboratório de Química Fisiológica e por terem me ensinado tanto durante minha estada na Alemanha. À Dr. Primavera Borelli, pela colaboração e pela disponibilidade para sempre discutirmos este e outros trabalhos.Ao Dr. Luis Roberto Gonçalves, pela oportunidade de desenvolver mais este trabalho no Laboratório de Fisiopatologia do Instituto Butantan.Ao André Alves, por realizar a purificação da fração crotoxina.A todos os pesquisadores do Laboratório de Fisiopatologia: Cris, Sandra, Luis, Ida, Marcelo, Renata e Diva, pela convivência enriquecedora durante esses 10 anos. .................................................................................................... I. RESUMOEstudos anteriores demonstraram que a crotoxina (CTX), o principal componente do veneno de Crotalus durissus terrifucus, apresenta ação antiinflamatória, inibindo a migração celular e a atividade fagocítica de neutrófilos peritoneais. Esses efeitos inibitórios são prolongados, uma vez que podem ser observados até 14 dias após a administração de uma única dose dessa toxina. Considerando-se a vida média curta dos neutrófilos, é difícil explicar como a ação inibitória da CTX sobre os neutrófilos circulantes e peritoneais persiste por períodos prolongados após a administração de uma única dose da toxina. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar o efeito in vitro e in vivo da CTX sobre a atividade funcional dos neutrófilos da medula óssea de camundongos e alguns dos mecanismos moleculares envolvidos na ação inibitória da CTX sobre as funções avaliadas. Para os ensaios in vitro, os neutrófilos foram incubados com a CTX (0,08 μg/mL), por 1 ou 24 horas. Para os ensaios in vivo, os animais foram pré-tratados com uma única administração de CTX (44 mg/kg), 1 dia antes do isolamento das células. Uma vez obtidos os neutrófilos, os seguintes parâmetros funcionais foram avaliados: quimiotaxia, adesão à fibronectina, fagocitose, produção de espécies reativas do oxigênio e desgranulação. Os resultados obtidos demonstraram que a CTX, in vitro e in vivo, inibiu os processos de quimiotaxia, adesão à fibronectina e fagocitose de partículas opsonizadas, entretanto não alterou a produção de espécies reativas do oxigênio ou a desgranulação em neutrófilos da medula óssea. Esses resultados demonstram que a CTX induz efeito inibitório sobre ...