Caracterização de Inibidores Sobre a Enzima de Processamento Furina

Abstract

RESUMOAs Pró-Proteínas Convertases funcionam no ramo regulatório ou constitutivo da via secretória, onde participam da ativação de precursores de proteínas secretadas ou transmembranais, através da hidrólise após um par de resíduos de aminoácidos básicos Lys(Arg)/Arg(Lys). Estas proteases estão envolvidas na maturação de um amplo número de precursores proteicos inativos, os quais participam em diversos processos fisiológicos e patológicos. A realização de ensaios de inibição utilizando a enzima Furina gerou valores de IC 50 que variaram entre 0,6-10,8M utilizando-se benzofenonas e IC 50 entre 2,79-16,8M para biflavonoides. Os compostos VG0 e LFQM-119 foram submetidos a determinação do mecanismo de inibição, onde ambos os compostos apresentaram mecanismo de inibição competitivo, sendo os valores obtidos de Ki=14µM para LFQM-119 e Ki=2,4µM para o biflavonoide VG0, podendo-se assumir que ∞.Palavras-chave: Furina, Benzofenonas, Biflavonóides. INTRODUÇÃOPró-proteínas convertases (PCs) pertencem à família das endoproteases cálcio dependente, estas enzimas apresentam papéis principais no processamento de precursores proteicos inativos produzindo suas formas maduras bioativas que estão envolvidas em uma ampla variedade de doenças incluindo câncer, infecções virais, infecções bacterianas, disfunções metabólicas como diabetes e dislipidemias. Muitos peptídeos bioativos são gerados através da transformação proteolítica de seus precursores, que são ativados através do processamento pós-transcricional. Esse processo é realizado pelas enzimas Pró-Proteínas convertases (ou pró-hormônios convertases), que fazem parte da família de enzimas intracelulares, essas endoproteases agem clivando resíduos de aminoácidos básicos. Até o momento, é comprovada a presença de sete pró-proteínas convertases em mamíferos, sendo elas PC1/PC3, PC2, PACE4, PC4, PC5/PC6, PC7/PC8/LPC/SPC7/PQP1 e Furina. Dentre essas convertases a primeira a ter sua estrutura tridimensional definida foi a Furina (1) . As SPCs (subtilisin-like proprotein convertases) de mamíferos funcionam ou no ramo regulatório ou constitutivo da via secretória. As convertases PC2 e PC1/3 são as principais formas expressas no sistema neuroendócrino e cerebral, onde elas agem sobre pró-hormônios e precursores neuropeptídicos em vesículas pela via secretória (2) . Nos eucariotos, diversas proteínas que passam pela via secretória são sintetizadas como pró-proteínas e sofrem endo ou exo-proteólise. São exemplos clássicos alguns fatores secretados como a insulina. Algumas proteínas de membrana podem sofrer esse tipo de processamento, como é o caso do receptor da insulina ou a proteína gp 160 do HIV (3,4,5) .