Caracterização da atividade β-glucosidásica de Humicola insolens

Abstract

A José e Zilá, meus pais, pelo amor, paciência, tolerância, dedicação, por insistirem em me fazer seguir em frente sempre que eu estava desistindo.Agradeço por me ensinarem que fazemos diferença mesmo quando não percebemos. Amo vocês.A Rafael e Mateus, meus irmãos, pela amizade. Vocês são meus melhores amigos.A minha família, por estar sempre comigo.A Mônica, minha esposa, pela paciência, amor e dedicação. Amo você. AgradecimentosA minha querida orientadora Profa. Dra. Rosa dos Prazeres Melo Furriel Inocentes, pelo incentivo, pela paciência, por todos os conselhos, pelo meu desenvolvimento acadêmico e principalmente por sua amizade.Ao meu divertido co-orientador Prof. Dr. João Atílio Jorge por toda ajuda, conhecimento, paciência, pelo meu desenvolvimento acadêmico e pela amizade.A Douglas Chodi Masui pelas primeiras orientações, ajuda em meu trabalho e pela amizade.Ao Prof. Dr. Francisco de Assis Leone por ter sido o primeiro a abrir as portas do laboratório para mim e pela orientação prestada.Ao Prof. Dr. José César Rosa pela ajuda nos experimentos de sequênciamento da proteína.A Nilton Rosa Alves, Ivana Aparecida Borin e Maurício de Oliveira, pelo suporte técnico, ajuda em meu trabalho e pela amizade.Aos meus amigos de laboratório, Alexandre, Bruna, César, Cíntia, Daiana, Daniela, Fabrício, Giovana, Heloisa, Jaqueline, Jean, João, Kelly, Luana, Malson, Raquel, Rômulo, Sandra, Talita, Taty, Thaís e Vitor, me desculpem se eu esqueci alguém, vocês são muitos.Aos meus amigos Marcel, Marco e Vinícius. Aos funcionários da FFCLRPA Capes, CNPq e FAPESP pelo auxílio financeiro. Epígrafe"O tempo é o melhor autor: sempre encontra um final perfeito" Charles Chaplin ResumoOs materiais lignocelulósicos são os principais resíduos da atividade agroindustrial.Atualmente, é grande a procura por enzimas capazes de degradá-los, visando à produção de diversos compostos químicos, em especial combustíveis renováveis, como o etanol, com baixo impacto ambiental. A celulose é o polissacarídeo majoritário da parede celular das plantas e a macromolécula mais abundante produzida na Terra. A degradação enzimática da celulose é, portanto, de especial significado ambiental e comercial.A celulose é um polissacarídeo linear composto de unidades de glicose ligadas por ligações glicosídicas do tipo β-(1,4). A hidrólise enzimática da celulose envolve pelo menos três classes de enzimas: endoglucanases, celobiohidrolases (exoglucanases) e β-glucosidases. Apenas as duas primeiras enzimas agem diretamente sobre a celulose, depolimerizando as cadeias e liberando oligossacarídeos de diferentes tamanhos e celobiose. A celobiose é a unidade básica repetitiva da celulose e pode ser convertida em resíduos de glicose pelas β-glucosidases. Este sistema enzimático funciona sinergisticamente, e as β-glucosidases são responsáveis pelo passo terminal da sacarificação da celulose, liberando as endoglucanases e exoglucanases da inibição por celobiose.Entretanto, em sua grande maioria, as β-glucosidases também são inibidas pelo produto da reação catalisada, o que v...