IntroduçãoEnzimas líticas são enzimas envolvidas na lise da parede celular de leveduras e fungos, podendo ser utilizadas para a obtenção de diferentes produtos intracelulares e/ou ligados à célula e para o biocontrole de microrganismos patogênicos.Com auxílio da lise enzimática, podem ser obtidos peptídeos, proteínas recombinantes, ácidos nucleicos, pigmentos, enzimas e lipídios (FLEURI; SATO, 2007). As enzimas líticas podem ainda ser aplicadas na obtenção de fonte de proteína unicelular para animais e humanos (FLEURI; SATO, 2005) e para a preparação de protoplastos de leveduras e fungos para fusão e transformação celular de microrganismos (SALAzAR; ASENjO, 2007). Estudos também têm sido conduzidos na extração enzimática do polissacarídeo β-glucana da parede celular das leveduras, o qual apresenta atividades antivirais, bacterianas, fúngicas e contra tumores, além de ser utilizado para aplicação cosmética e na indústria de alimentos saudáveis como estimulador do sistema imune (KIm et al., 2006). muitos microrganismos são capazes de produzir enzimas que lisam a parede celular de leveduras (FLEURI; SATO, 2008). As principais enzimas envolvidas na lise de leveduras são β-1,3 glucanases, β-1,6 glucanases, mananases, proteases e quitinases, uma vez que a parede é composta principalmente pelos polímeros β-1,3 glucana, β-1,6 glucana, mananaproteínas e pouca quantidade de quitina (FLEURI, 2006). Essas enzimas agem sinergicamente na lise da parede celular, mas somente duas são essenciais para o rompimento da célula: a protease lítica específica, que degrada a camada externa de mananaproteína, e a β-1,3 glucanase lítica, que degrada a camada interna de glucana (FLEURI, 2003).As glucanases podem, dependendo da massa molecular e da conformação tridimensional da enzima, lisar células de leveduras sem a presença de protease e outros produtos que exerçam o papel de hidrólise da camada externa de mananaproteína (GUILLOUx-bENATIER et al., 2000).O microrganismo Cellulosimicrobium cellulans, mencionado como Cellulomonas cartae por Fleuri (2003), Cellulomonas cellulans por Ferrer et al. (1996), Oerskovia xanthineolytic por Ventom e Asenjo (1991) e Arthrobacter luteus por Doi, K., Doi, A. e Fukui (1973), é produtor de um complexo enzimático lítico formado por várias isoformas de β-1,3 glucanases
AbstractThe aim of this work was the application of lytic β-1,3 glucanase obtained from Cellulosimicrobium cellulans strain 191 in the production of protoplasts and lysis of yeast cell walls. The crude extract demonstrated lysis activity against the yeasts Kluyveromyces lodderi, Saccharomyces cerevisiae (Fleischmann and Itaiquara), S. cerevisiae KL-88, S. diastaticus NCYC 713, S. cerevisiae NCYC 1001, Candida glabrata NCYC 388, Kluyveromyces marxianus NCYC 587, and Hansenula mrakii NCYC 500. The purified β-1,3 glucanase demonstrated lysis activity against the yeasts Saccharomyces cerevisiae KL-88, Saccharomyces capensis, Debaromyces vanriji, Pachysolen tannophillus, Kluyveromyces drosophilarum, Candida glabrata, Hansenula mrakii, and Pichia ...