Binding characteristics of anti-atrazine monoclonal antibodies and their fragments synthesised in bacteria and plants.

Strachan, Gillian; Grant, Steven; Learmonth, D; Longstaff, Marian; Porter, A.J.; Harris, William J.

doi:10.1016/s0956-5663(98)00022-0

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“…While some authors reported that RAbs showed lower 530 affinity than its parental MAb (Kramer & Hock, 1996;Graham, Porter, & Harris, 1995;Choi et al, 2004), i.e. the same behaviour as we found, others reported a comparable (Tout, Yau, Trevors, Lee, & Hall, 2001;Alcocer, Doyen, Lee, & Morgan, 2000;Nishi, Ishiuchi, Morimune, & Ohkawa, 2005) or even higher (Alcocer, Doyen, Lee, & Morgan, 2000;Strachan, Grant, Learmonth, Longstaff, Porter, & Harris, 1998;Pan et 535 al., 2006) affinity of RAbs over their counterpart MAbs. Results obtained in this study and those reported in the literature suggest that the folding of each scFv and, therefore, their analyte interaction properties depend on its particular amino acid sequence.…”

Section: Scfv Expression and Characterizationsupporting

confidence: 86%

Development and application of recombinant antibody-based immunoassays to tetraconazole residue analysis in fruit juices

et al. 2014

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Plana-text revised.doc Click here to view linked References 2 ABSTRACTTetraconazole is currently used as a fungicide in fruit and vegetables. The aim of this work was the development of immunochemical techniques based on recombinant antibodies for the screening of tetraconazole residues in fruit juices. Recombinant antibodies were produced from a hybridoma cell line secreting a monoclonal antibody 5 specific for tetraconazole and from lymphocytes of mice hyperimmunized with tetraconazole haptens conjugated to bovine serum albumin. From these antibodies, enzyme-linked immunosorbent assays in the conjugate-coated format were developed, which were able to detect tetraconazole standards down to 1 ng/mL. From recovery studies with spiked samples, these immunoassays determined tetraconazole in orange 10 and apple juices with acceptable reproducibility (coefficients of variation below 25%) and recoveries (ranging from 78−145%) for a screening technique. The analytical performance of RAb-based immunoassays was fairly similar to that of the MAb-based immunoassays. Due to their simplicity and high sample throughput, the developed recombinant-based immunoassays can be valuable analytical tools for the screening of 15 tetraconazole residues in fruit juices at regulatory levels.

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Section: Scfv Expression and Characterizationsupporting

confidence: 86%

Development and application of recombinant antibody-based immunoassays to tetraconazole residue analysis in fruit juices

et al. 2014

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“…This is a popular technique as it can provide a wealth of information about the interaction of the antibodies with the analyte, in addition to having the potential to be the basis of an immunosensor technique. There are many research groups investigating pesticides with SPR transduction [43][44][45][46]. Keay and McNeil [47] used an amperometric immunosensor to determine atrazine.…”

Section: Immunosensors For Pathogenic Bacteria or Pesticides In Foodmentioning

confidence: 99%

Sensors and Food Quality

Connell

Guilbault

2001

Sensors Update

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Production processes require quality control. The quality of food going to the consumer must always be assured. Traditionally this was performed by taking a sample and sending it to a remote laboratory. While this is successful for most samples, this was not always the case. Having remote laboratories means that there could be a significant lag-time between sampling and results. Some unstable samples may have changed or the source material could have been already used/processed by the time they are analyzed. Sensor-based systems, especially those incorporated within flow injection analyzers, can overcome this problem. As the systems can be small and inexpensive relative to other automated analyzers, they can easily be fitted onsite. With the sensors fitted within the production process, a nearly instant reading can be achieved. The advantages and disadvantages of physical, chemical, and biosensors and their applicability to food analysis are discussed. Particular attention is focused on the improvements made to the underlying technology used in biosensor construction.

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“…Pan et al (2006) desarrollaron ELISAs de clembuterol basados en anticuerpos recombinantes, con un valor de I 50 (0.78 ng/ml) del mismo orden aunque ligeramente inferior al del ELISA basado en el anticuerpo monoclonal (1.34 ng/ml). Finalmente, Strachan et al (1998) obtuvieron un anticuerpo recombinante frente a atrazina con una afinidad hacia el analito 6 veces superior a la del anticuerpo monoclonal.…”

Section: Recapitulaciónunclassified

“…Estos valores mejoraron los obtenidos con el anticuerpo monoclonal de referencia, aunque en este caso, la afinidad del monoclonal por el analito era realmente baja (el valor de la I 50 del inmunoensayo era de 180 µg/ml). Por otro lado, Charlton et al (2001) llevaron a cabo ELISAs de atrazina con fragmentos scFv obtenidos a partir de linfocitos de ovejas inmunizadas, que mostraron una afinidad mayor que los realizados por Strachan et al (1998) con AcRbs obtenidos a partir de hibridomas. Por último, Finlay et al (2006) describieron la obtención de anticuerpos recombinantes de alta afinidad frente al ácido domoico a partir de pollos inmunizados.…”

Section: Recapitulaciónunclassified

Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas

Andani¹

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Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas. TESIS AGRADECIMIENTOSAl finalizar este trabajo de investigación quiero mostrar mi agradecimiento a todas las personas, sin las cuales, su realización no hubiera sido posible.En primer lugar, quiero dar las gracias a Ángel y a Juanjo por haberme dado esta oportunidad, porque de ella y de ellos he aprendido mucho. Gracias por confiar en mí y por haberme hecho sentir cómoda desde el principio, no sólo en lo que al trabajo se refiere.A todos mis compañeros, a los que han pasado más o menos fugazmente por el laboratorio y a los que todavía siguen en él. Porque son muchas las horas que se pasan entre esas cuatro paredes y es un privilegio poder hacerlo en buena compañía. En especial, a Fede por estar siempre dispuesto a echar una mano haciendo así que el trabajo se vuelva más fácil. Y, por supuesto, a Maria José, por todo lo que me ha enseñado, por haber trabajado conmigo durante una parte de esta tesis y por responder, siempre pacientemente, a mis innumerables preguntas.Me gustaría agradecerle a José María Carrasco haber aceptado ejercer como tutor al comienzo de esta tesis y a Ismael Rodrigo haber tomado su relevo en esta última etapa.No puedo olvidarme de darle las gracias a mi familia. A mis padres, porque les debo mi educación y porque siempre me han empujado a seguir adelante, aunque a veces no se lo haya puesto del todo fácil. A mis hermanos, por "aguantarme" o "soportarme" como hacen los hermanos y que, en mi caso, no es poco. A David, por su infinita paciencia, por darme su apoyo durante todo este tiempo y por compartir conmigo tantas cosas.También quiero darle las gracias a todos los que, de algún modo u otro, se han interesado, o al menos lo han intentado, por mi trabajo. Por darme la oportunidad de compartir, aunque sólo sea por un momento, mis motivaciones o mis frustraciones.Finalmente, quisiera dejar constancia de que la realización de este estudio ha sido posible gracias a la concesión de una beca predoctoral por parte de la ..................................................................

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Binding characteristics of anti-atrazine monoclonal antibodies and their fragments synthesised in bacteria and plants.

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Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas

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